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目的观察普卡霉素对大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡的保护作用。方法建立大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡模型,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记,Hoechst 33258核染色,琼脂糖凝胶电泳以及醋酸荧光素染色等方法,根据细胞凋亡的形态学及生物化学等特征,分析普卡霉素对大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡的影响。结果大鼠小脑颗粒神经元与普卡霉素预孵育1 h及持续作用下,普卡霉素浓度依赖性地抑制低钾诱导24 h所致的大鼠小脑颗粒神经元凋亡,其有效浓度在50~200 nmol.L-1之间,普卡霉素浓度为200nmol.L-1时达到的最大凋亡抑制率约为80%。结论普卡霉素对大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡具有较强的抑制作用。 相似文献
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咖啡因对谷氨酸诱导神经元凋亡的保护作用 总被引:6,自引:2,他引:4
目的 研究咖啡因对谷氨酸诱导的神经元凋亡是否具有保护作用,并对其机制进行探讨。方法 采用DNA凝胶电泳分析及Hoechst33258核染色方法进行凋亡分析;使用荧光指示试剂Fura 2检测单细胞内游离钙浓度变化。结果 谷氨酸可诱导小脑颗粒神经元凋亡,咖啡因能拮抗谷氨酸的这一效应,其IC50为5-0mmol·L-1。咖啡因的这一保护作用不能被forskolin模拟,也不能被Rp cAMP阻断。此外,内质网Ryanodine受体阻断剂dantrolene也不能取消咖啡因的保护作用,咖啡因不影响谷氨酸诱导的钙超载。结论 咖啡因对谷氨酸诱导的神经元凋亡具有保护作用,这一保护作用与咖啡因升高细胞内cAMP和Ca2+水平的药理作用无关。 相似文献
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采用放射配基结合分析法及光亲和标记技术研究家兔脑前叶皮质苯二氮受体的动力学特征及其分子基础。[~3H]FNP与突触体膜P_2饱和结合的Hill系数为0.74,Scatchard分析为双曲线型。低温(0℃)条件下的动力学显示表观不均一性,但提高温度至25℃时,结合与解离过程均符合一位点反应模型。P_2膜制备与[~8H]FNP光亲和标记后进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳仅见一条放射性区带,其表观分子量为56000±1600道尔顿。实验结果提示家兔前叶皮质中苯二氮受体可能以二种不同亲和力的构象存在。 相似文献
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中枢神经元凋亡模型的建立及其信号转导 总被引:12,自引:3,他引:9
颜光美 《中山医科大学学报》1998,19(1):1-3
程序性细胞死亡是多细胞机体在发育吕调控机体正常生理功能的重要机制。日益增多的语气表明,某些中枢神经系统疾病的发生与发展涉及到神经元的程序性死亡。应用体外去极化条件下,原代培养的小脑颗粒神经元,经复极化处理可以诱导黄型的神经元程序性死亡。研究发现,小脑中 神经质谷氨酸和乙酰胆碱,育 笥的受体调节神经元的程序性死亡。从而提示,神经质在传导神经冲动的同时,也特异性地传导神经元的生存信号。进一步的实验证明 相似文献
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Remicade调节强直性脊柱炎患者滑膜细胞基因表达谱的初步研究 总被引:7,自引:2,他引:7
目的 通过比较抗肿瘤坏死因子 (TNF) α单克隆抗体Remicade治疗强直性脊柱炎(AS)病人前后的膝关节滑膜细胞的基因谱变化 ,筛选出Remicade效应相关的差异表达基因 ,并探讨其在AS发病机制中的意义。方法 用 5例活动期AS病人在Remicade治疗前和 3个月后 (每次 5mg/kg ,第 0、2、6、12周静脉注射 ,以后每 8周用 1次 )的膝关节滑膜细胞 ,提取总RNA ;微阵列基因检测用含 1176个基因的cDNA芯片进行 ;数据用GeneSpring 5 1软件进行基因差异表达和聚类分析。结果 5例AS病人在Remicade治疗前后滑膜细胞基因差异表达和变化趋势总体聚类分析结果显示基因谱相关性强。用K mean聚类分析 ,其中第 5组与炎症相关密切的基因主要包括细胞因子、金属蛋白酶、黏附分子、与凋亡和致癌有关基因、受体、信号转导有关基因等。再按基因功能聚类 ,其中在致癌基因组共有 10个基因。比较AS病人治疗前后的关节滑膜细胞基因表达差异有显著性的基因(P <0 0 5 )共 4 5个 ,其中下调基因 4 4个 ;治疗后下调的基因主要包括三组 :①Th1细胞因子干扰素(IFN) γ ;②黏附分子 (VCAM 1、ICAM 1,Integrinβ4 ) ;③金属蛋白酶家系成员 3、7、8、11(MMP 3、7、8、11)和金属蛋白酶抑制体 (TIMP) 1。多数致炎基因包括TNF α、白细胞介素 (IL) 相似文献
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哺乳类动物脑内发现特异的、高亲和力的BZ受体是近年来神经科学领域中的一项重要进展。迄今的大量研究提示,BZ受体存在种属差异,研究不同种属中BZ受体的特性,有助于阐明其生物学功能。本文应用放射配基受体结合分析法研究家兔脑内BZ受体的特性、分布及与GABA受体的关系。 相似文献
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目的:克隆75AEST全长cDNA序列。方法:抽提在25mmol/LKCl条件下培养7d的大鼠小脑颗粒神经元的总RNA后,用DNA连接酶介导的5'RACE法克隆75A表达序列标签(EST)cDNA5'端未知序列,其产物亚克隆到pGEM-Teasy后进行序列测定以及同源性分性。结果:首轮5'RACE扩增出2.5kb序列后,75AEST鉴定为神经来源孤儿受体1(Nor1)基因的部分序列;再经过二次轮5'RACE,我们首次克隆Nor-1的全长cDNA序列。结论:T4DNA连接酶介导的5'RACE是一种效率较高的克隆mRNA5'端未知序列的好方法,为进一步研究Nor1在小脑颗粒神经元存活或分化过程中的作用奠定基础。 相似文献
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鲤鱼精巢DNA对果蝇和小鼠寿命的影响 总被引:7,自引:1,他引:6
目的研究鲤鱼精巢DNA对动物寿命的影响。方法采用黑腹果蝇和NIH小鼠作实验对象,于果蝇培养基或小鼠饮水中掺入一定浓度的鲤鱼精巢DNA,每天观察动物生活状况,并记录动物死亡情况,将实验结果作统计学处理并进行组间t检验;绘出动物的时间-存活率曲线(即存活曲线)。结果鲤鱼精巢DNA使果蝇和小鼠的最小寿命、半数存活时间、平均存活时间、最大寿命都得以延长;DNA给药组动物的存活曲线越位于空白对照组动物的存活曲线的右侧。结论鲤鱼精巢DNA可明显延长果蝇和小鼠的寿命。 相似文献
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鲤鱼精巢DNA对自由基的清除作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究鲤鱼精巢DNA对自由基的清除作用。方法:采用 化学发光法测定鲤鱼精巢DNA对Cu2 -Vit C-H2O2发光体系产生的·OH自由 基的清 除作用,采用分光光度法检测鲤鱼精巢DNA对大鼠腹腔多形核白细胞(PMNs)呼吸爆发产生O ÷2自由基的清除作用,采用电子自旋共振(ESR)法测定鲤鱼精巢DNA对DPPH有机自由基的 清 除作用。结果:鲤鱼精巢DNA使Cu2 -Vit C-H2O2发光体系的发光计数率降低, 使 PMNs呼吸爆发产生O÷2自由基的数量减少,使DPPH的特征波峰逐渐降低直至消失。结论 :鲤鱼精巢DNA对·OH自由基、O÷2自由基和有机自由基均有显著的消除作用。 相似文献