声诺维增强超声辐照介导pEGFP-N1转染RPE细胞的实验研究

目的探讨超声与微泡造影剂声诺维（SonoVue）介导基因转染体外培养RPE细胞的作用。 方法在24孔板中,用1MHz,2W/cm2,50Hz的脉冲波辐照RPE细胞2min,质粒用量6μg/孔,加或不加20%浓度的SonoVue,72h后流式细胞仪测瞬时转染率,台盼蓝染色检测细胞活性。 结果单纯超声辐照组转染率为（1.07±0.22）%,加SonoVue组为（12.58±1.75）%（P〈0.05）,各组细胞生存率在95%以上。 结论SonoVue能促进超声辐照基因转染RPE细胞,且对细胞基本无损伤。     

产科护理质量缺陷与对策

近年来,由于医学知识的普及和人们法制观念的增强,医疗纠纷呈逐渐上升的趋势,其中护理缺陷是导致纠纷的一大隐患,新的<医疗事故处理条例>的实施,扩大了医疗事故的内涵,护理人员将面临更多的责任和挑战.护理质量缺陷系在护理工作中,由于各种原凶导致患者对护理工作的不满意或造成医疗事故与医疗纠纷.护理质量缺陷的发生,直接影响到医院和患者的利益.     

灭菌粉(过氧乙酸)对内镜有机物清除力的实验研究

目的检测灭菌粉(过氧乙酸)对内镜有机物的清除力。方法采用人工模拟实验方法,将30根肠镜分成3组,每组10根,分别采用清洗剂灌流浸泡3min、灭菌粉(过氧乙酸)灌流浸泡3min、灭菌粉(过氧乙酸)灌流浸泡1min方法清除肠镜有机物,采用ATP生物荧光法检测清洗效果。结果 3种方法清洗肠镜后,ATP生物荧光法检测结果两两比较,差异均无统计学意义。结论与清洗剂比较灭菌粉(过氧乙酸)对有机物的去除有效性成立,且灌流浸泡1min即可达到合格的有机物清除力。     

加减大黄廑虫丸抑制血管生成的实验研究

目的探讨加减大黄廑虫丸对血管生成的抑制作用。方法鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）法检测加减大黄磨虫丸对血管生成的影响;采用MTS比色法观察不同浓度的加减大黄磨虫丸对血管内皮生长因子（VEGF）诱导的ECV-504细胞增殖的影响;Tran—swell小室检测不同浓度的加减大黄廑虫丸对ECV-304细胞移行的影响;Matrigel实验检测不同浓度的加减大黄磨虫丸对ECV-304细胞内皮管腔形成的影响。结果加减大黄磨虫丸中、低浓度组能够抑制鸡胚CAM血管生成;MTS比色法显示,0．05—0．20g/ml浓度的加减大黄鹰虫丸对VEGF诱导的ECV-304细胞增殖具有抑制作用,而更低和更高浓度的加减大黄廑虫丸则无抑制作用。Transwell小室实验显示,加减大黄廑虫丸浓度为0、12．5、25．0和50．0mg/ml时ECV-504细胞移行数分别为208．67±17．16、132．67±16．50、78．33±13．50和18．67±6．66;Matrigel实验显示,加减大黄磨虫丸浓度为0、12．5、25．0和50．0mg/ml时ECV-304细胞内皮管腔形成数分别为25．67±1．53、22．33±1．53、16．33±2．52和2．33±1．53,可见抑制细胞移行和管腔形成的作用随浓度增大而增强。结论加减大黄廑虫丸具有明显抑制血管生成的作用。     

尿毒症患者血浆同型半胱氨酸及内皮细胞功能变化的意义

目的探讨血浆同型半胱氨酸（Hcy）水平变化对尿毒症患者的意义及尿毒症患者Hcy与内皮细胞功能的关系。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定59例尿毒症患者Hcy、血浆血管性血友病因子（vwF）、内皮素-1（ET-1）、血栓调节蛋白（TM）,应用化学比色法检测一氧化氮（NO）,并比较各指标在尿毒症组与对照组间的差异;同时评价尿毒症患者肾小球滤过率（GFR）、肌酐（Cr）与Hcy之间的相关性;评价GFR、Cr、Hcy与反映内皮细胞功能指标之间的相关性结果尿毒症患者组GFR为（5．19±1．88）mL／min,Cr为（1146．81±304．57）μmol／L。血浆Hcy、NO、ET-1、WF、TM与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05、P〈0．01）。尿毒症患者NO／ET-1比值明最低于对照组。在尿毒症组中,Hcy与GFR呈负相关（r=-0．369,P=0．04）,和Cr呈正相关（r=0．274,P=0．039）;GFR与TM呈负相关（r=-0．278,P=0．035）。结论Hcy与尿毒症有密切的关系,高Hcy血症是尿毒症合并心脑血管疾病的独立危险因子,TM是尿毒症患者反映内皮细胞功能损伤最佳的指标,并与肾脏损伤的严重程度相关。     

胰岛素对正常糖和高糖浓度下牛视网膜微血管内皮细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的 探讨胰岛素、糖浓度及其两者的联合作用对牛视网膜微血管内皮(BRE)细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 对照实验研究.采用选择性培养方法,培养BRE细胞,传代后分别在正常糖(5 mmol/L)或高糖(30 mmol/L)浓度下培养3 d,甘露醇平衡渗透压,血清饥饿12 h,给予或不给予100 nmol/L胰岛素作用24 h.实时荧光定量检测VEGF mRNA表达水平;人脐静脉血管内皮细胞增殖法、免疫荧光检测法、免疫印迹法检测VEGF蛋白表达水平.采用SPSS 12.0统计学软件对数据进行分析,胰岛素、糖浓度及其交互作用对BRE细胞的VEGF mRNA和VEGF蛋白表达水平的影响,采用2×2析因设计定量资料方差分析,以P<0.05作为差异有统计学意义.结果 胰岛素或高糖浓度可以显著提高BRE细胞的VEGFmRNA(F=5.67,9.04;均P<0.05)和VEGF蛋白(F=5.50,5.57;均P<0.05)表达水平,但胰岛素联合高糖浓度的作用较其单独作用减弱.结论 高糖浓度下可以降低胰岛素诱导的VEGF表达水平,因此,VEGF可能不是胰岛素治疗导致的糖尿病视网膜病变短期恶化的主要因素.     

人视网膜色素上皮细胞条件培养液对视网膜干细胞生物学特性的影响

目的观察人胚视网膜色素上皮细胞条件培养液(HRPE-CM)对人胚视网膜干细胞(HRSCs)体外生物学特性的影响。方法利用HRPE-CM模拟体内环境,分为对照组、表皮生长因子(EGF) 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)组和HRPE-CM组。体外培养HRSCs,通过细胞计数方法比较不同环境条件对HRSCs体外生物学特性的影响,并进一步鉴定其神经干细胞特性。结果与对照组比较,HRPE-CM对HRSCs有明显的促增殖作用(P<0.01);与EGF bFGF组相比较,HRPE-CM的促增殖作用也更为强大(P<0.01)。在HRPE-CM中培养的原代和子代HRSCs均表达Nestin,具有自我更新能力和多向分化潜能。结论HRPE-CM对HRSCs的增殖能力具有明显的促进作用,并且能很好地维持其神经干细胞特性。     

改良的视网膜血管消化铺片联合共聚焦显微镜观察--视网膜血管的三维检查方法

目的探讨一种视网膜血管的三维检查方法。设计实验性研究。研究对象大鼠视网膜血管消化铺片。方法将大鼠深度麻醉后,行全身循环灌注,至眼球变苍白,再灌注4％多聚甲醛作血管内固定。取双眼以4％多聚甲醛固定24小时后,取出视网膜,改良视网膜血管消化铺片方法,采用胶原酶消化制备视网膜血管铺片,经免疫荧光染色后采用激光扫描共聚焦显微镜观察。主要指标视网膜血管铺片消化状况及三维结构的观察。结果胶原酶消化处理后可获得理想的、完整视网膜血管铺片, 通过激光扫描共聚焦显微镜扫描,可以观察到视网膜血管三维特征。结论改良的视网膜血管消化铺片联合共聚焦显微镜观察是一种有效的视网膜血管三维检查方法。     

流动酸性氧化电位水去除胃镜污染的评价

胃镜若不进行严格消毒,容易造成医源性交叉感染,给受检患者造成痛苦和经济损失.酸性氧化电位水(electrolyzed oxidaxing water,EOW)是近年来出现的一种新型内镜消毒剂.     

视神经损伤时视网膜睫状神经营养因子受体的表达

目的研究睫状神经营养因子受体于视神经损伤后不同时间在视网膜中的表达情况,探讨外源性的睫状神经营养因子在神经损伤疾病中的应用价值。方法采用钳夹视神经的方法建立神经损伤的模型,在损伤后1、7、14、28d获取视网膜,提取总RNA及总蛋白,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定视网膜中睫状神经营养因子受体(CNTFR)αmRNA的表达,用WesternBlot方法了解损伤后不同时间CNTFRα蛋白水平的表达。结果在正常大鼠视网膜内CNTFRαmRNA无表达,在损伤后的1、7、14、28d均有一定水平的CNTFRαmRNA的表达,与正常对照比较差别具有显著性意义(P<0.01);损伤后备时间均有CNTFRα蛋白的表达,但CNTFRα蛋白的表达较弱。结论神经损伤后CNTF的表达先短暂升高以后持续下调,而CNTFRα-mRNA在损伤后4周内均有一定量的表达,提示补充外源性CNTF可能改善神经再生的微环境而发挥保护效应。