与植入物感染相关大肠埃希菌的耐药特征

背景：生物材料植入人体后,往往会发生感染引起植入物松动、脱落甚至造成菌血症。以往研究未注重植入物相关感染中的细菌耐药性问题。 目的：了解与植入物感染相关大肠埃希菌的耐药特征,为预防和更有效治疗该类感染提供策略。 方法：以大肠埃希菌ATCC 25922、金黄色葡萄球菌ATCC 25923和铜绿假单胞菌ATCC 27853为质控菌株,选取17种临床常用抗生素进行药敏试验,计算耐药率,分析耐药特征。用表型确证试验筛选产Amp C酶和产ESBLs菌株,明确产酶率。抽提耐药质粒,以聚合酶链反应扩增检测耐药基因,分析基因型分布情况。 结果与结论：17种抗生素中耐药率最低的是亚胺培南,其次为阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和头孢吡肟,大部分菌株对其他抗生素均有较高耐药率,且呈多重耐药。筛选出42株(61.8%)产ESBLs菌株和27株(39.7%)产Amp C酶菌株,同时产ESBLs和Amp C酶菌株有23株(33.8%)。产ESBLs菌株中以携带CTX-M型基因最为多见占66.7%,有19株(45.2%)同时携带两种以上基因,产Amp C酶中大多数是产DHA型,有5株(18.5%)同时携带两种基因。提示与植入物感染相关的大肠埃希菌菌株耐药水平高、耐药谱扩大,且多呈多重耐药,耐药基因复杂多样。建议使用敏感药物联合阿米卡星治疗该类感染。     

叉头转录因子1质粒标准品的构建

背景：研究表明叉头转录因子1是一种新的2型糖尿病易感基因,但2型糖尿病患者与健康人的叉头转录因子1基因在转录水平上差异性的研究不多。由于还没有商品化叉头转录因子1的质粒标准品,因此有必要构建其标准品。 目的：构建应用实时荧光定量-聚合酶链反应检测叉头转录因子1 mRNA的质粒标准品。 设计、时间及地点：单一样本重复实验,于2007-11/2008-03在苏州大学附属第一医院检验科实验室完成。 材料：SYBR ExScript TM反转录-聚合酶链反应Kit试剂盒,SYBR Premix Ex TaqTM试剂盒,凝胶回收纯化DNA试剂盒,质粒DNA小量纯化试剂盒,PMD18-T Vector试剂盒等。 方法：从健康志愿者血标本中提取总RNA,反转录合成cDNA,以cDNA为模板应用聚合酶链反应扩增出目的片段,对其回收纯化连接到PMD18-T载体及转化JM109,阳性克隆经测序分析,确认重组质粒正确。抽提重组质粒,用紫外分光光度仪测定其浓度,再根据公式换算成拷贝浓度,最后稀释成梯度标准品。 主要观察指标：重组质粒聚合酶链反应和基因测序结果,标准品标准曲线的相关系数及标准品的重复性。 结果：成功构建了叉头转录因子1质粒标准品,通过聚合酶链反应及基因测序鉴定其目的片段已成功插入载体。各稀释度的标准品经荧光定量-聚合酶链反应扩增后,其循环阈值与起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系,线性范围是2.39×(105~1012) copies/mL。各稀释度标准品的批内重复性好,其变异系数范围为0.29%~1.16%。 结论：实验成功构建了具有较好灵敏度和重复性的叉头转录因子1质粒标准品。     

氟桂利嗪添加治疗难治性癫痫的疗效观察及其逆转P-糖蛋白的表达

目的了解氟桂利嗪添加治疗难治性癫痫患者的临床疗效与逆转多药耐药基因（MDR1）表达的关系。方法42例难治性癫痫患者在原抗癫痫药不变的基础上应用氟桂利嗪添加冶疗,12周后评价临床疗效。同时用ELISA法检测患者氟桂利嗪添加治疗前后血清P-糖蛋白（PGP）,并和正常对照组10人比较。结果氟桂利嗪添加治疗难治性癫痫的总有效率达52.5%。难治性癫痫患者血清PGP水平显著高于正常对照组,且治疗后血清PGP水平较治疗前明显下降,差异均有统计学意义（分别P〈0.01和〈0.05）。结论氟桂利嗪添加治疗难治性癫痫有效,其抗癫痫机制可能与逆转PGP表达有关。     

急性脑血管病和老年性痴呆症患者血清MBP变化初探

目的 探讨急性脑血管病和老年性痴呆症血清髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）的含量变化及其临床意义。方法 采用ＭＢＰ－ＥＬＩＳＡ法对２０例急性脑出血、２８例急性脑梗死、１０例老年性痴呆症患者及２１名正常对照者血清ＭＢＰ进行检测。结果 ３组患者血清ＭＢＰ含量均显著高于正常对照组（Ｐ〈０．０５）；８例急性脑出血患者治疗前后其ＭＢＰ进行检测。结果 ３组患者血清ＭＢＰ含量均显著高于正常对照组（Ｐ〈０．０５）；８例急性脑     

可溶性CD40配体酶联检测试剂盒的研制及其运用

目的 :建立灵敏、特异和稳定的人可溶性CD4 0配体 (sCD4 0L)酶联检测试剂盒。方法 :采用鼠抗人CD4 0L单克隆抗体 1B1为包被抗体 ,识别人CD4 0L不同位点的单克隆抗体 4F1经琥珀酰羟基生物素 (BNHS)标记后为检测抗体 ,建立双抗体夹心的人sCD4 0L酶联检测方法。在此基础上 ,测定 2 0 0例健康供血员血清和血浆中sCD4 0L的含量。结果 :成功研制人sCD4 0L酶联检测试剂盒 ,灵敏度为 0 5ng ml。该试剂盒 4℃放置 3个月 ,离散度 (CV) <± 6 9% ,回收率为 94 7%～ 10 4 8% ,提示该检测系统具有良好的灵敏度、稳定性和准确性 ,与国外商品化试剂盒的分析结果相似。应用该试剂盒测得的健康供血员血清和血浆sCD4 0L含量分别为 9 5 6± 4 71、2 98± 1 13ng ml。结论 :研制成灵敏、特异和稳定的人sCD4 0L酶标检测试剂盒 ,能够对血清和血浆中sCD4 0L进行准确定量分析 ,并首次证实血清和血浆中sCD4 0L水平的差异性     

急性脑血管病和老年性痴呆症患者血清MBP变化初探

目的　探讨急性脑血管病和老年性痴呆症血清髓鞘碱性蛋白 (MBP)的含量变化及其临床意义。方法　采用MBP ELISA法对 2 0例急性脑出血、2 8例急性脑梗死、10例老年性痴呆症患者及 2 1名正常对照者血清MBP进行检测。结果　 3组患者血清MBP含量均显著高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ;8例急性脑出血患者治疗前后其MBP含量有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　血清MBP检测有助于急性脑出血、急性脑梗死、老年性痴呆症的诊断和疗效观察     

血管紧张素转换酶在肾脏疾病中的研究进展

血管紧张素转化酶（ACE）是肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAS）的重要组成部分，在血管紧张素Ⅱ的产生及缓激肽的降解过程中起关键性的作用。现对血管紧张素转化酶的生物学功能、基因多态性及在肾脏疾病中的临床应用等方面进行综述。     

表皮葡萄球菌细胞间脂多糖黏附素的表达与耐药特征的相关性

目的：探讨表皮葡萄球菌细胞间脂多糖黏附素（polysacchatide intercellular adhesion,PIA）的表达与细菌耐药特征的相关性.方法：收集分离临床标本中的表皮葡萄球菌,通过使用刚果红琼脂平皿检测PIA,考察该菌生物膜的形成能力;按照结果分为PIA阳性组和阴性组,选取八种抗生素,应用K-B琼脂扩散法进行药物敏感试验并计算耐药率,同时探讨两者之间的关系.结果：临床标本中分离到的表皮葡萄球菌对青霉素G有极高的耐药率（100%）,对甲氧西林、红霉素、克林霉素、环丙沙星有较高的耐药率（40.5%～96.8%）.对利福平耐药率较低（2.4%～3.1%）,而对万古霉素和替考拉宁耐药率极低（0%）;除对利福平外,PIAF阳性和阴性菌株对其他四组抗生素的耐药率均有显著性差异（P＜0.05）.结论：生物膜形成能力强的表皮葡萄球菌通常对抗生素的耐药性更高（对利福平除外）,推荐使用利福平作为治疗和预防治疗植入物生物膜感染的联合用药.     

600例健康成人iQ200全自动尿沉渣分析仪的参考值调查

iQ200全自动尿沉渣分析仪是一套真正能对临床尿液标本进行自动吸样处理，对尿液中的各种有形成分（原称尿沉渣）进行自动成像并定量分析报告的系统，仪器采用数字成像和自动粒子识别（APR^TM）技术来分类和定量12种有形成分。目前，该仪器所用的尿沉渣参考值由美国Iris公司提供，但健康人参考范围是否存在地区性差异尚未见报道，为此我们用iQ200分析仪对600例健康成人尿液沉渣的参考值作了调查，现将结果报道如下：