Blast-病毒物种鉴定的新方法

采集自愿献血员中56份HCV-Ab阳性血样，常规分离血清。应用RT-nPCR对HGV-NS3区进行核酸扩增，PCR扩增产物与PMD18-T载体连接，转染DH5d工程菌株，挑选白色菌落，经内套PCR验证克隆阳性者，以碱裂解法提取质粒DNA，应用荧光染料Bignye标记、Sanger双脱氧末端终止法进行重组DNA的核酸序列测定。将测得的核酸序列，经国际互联网络输入到NCBI的GenBank数据库的局部序列相似形查询(Blast)的查询框中，借助于GenBank数据库中的资料和计算机分析程序中的BlastN软件，与数据库中所有已知的核酸序列进行序列同源性比对搜索分析。     

组织工程材料捕获成体干细胞的影响因素研究

目的探索体内埋植组织工程材料方法获取成体干细胞的相关影响因素。方法BALB／c小鼠随机分为2组,分别埋植经环氧乙烷灭菌的明胶海绵与聚乳酸,在植入后第3、7、14天时分别取出材料,HE染色观察细胞捕获情况。将埋植相同质量明胶海绵的小鼠随机分为成骨蛋白-1（OP-1）组、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）组和对照组,在植入后第3、6、9、12、15天时分别取出材料,称取质量并进行细胞计数,采用流式细胞术检测第12天时分离获得的各组细胞表面CD34和干细胞抗原-1（Sca-1）的阳性表达率。另取第12天时分离获得的对照组细胞,分为OP-1组、G—CSF组和空白对照组,采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活性。结果HE染色显示,明胶海绵与聚乳酸捕获的细胞数量均随时间延长而增加。各组植入的明胶海绵质量均随时间延长而减少,而捕获细胞数量均随时间延长而增加,OP-1组第9、12、15天和G．CSF组第9天时捕获细胞数量分别与对照组相比均有统计学意义（均P〈0．05）：OP-1组细胞表面CD34、Sca-1单阳性表达率和双阳性表达率（分别为13．07％±0．19％、3．98％±0．15％、17．02％±0．12％）均明显高于对照组（分别为11．62％±0．44％、3．03％±0．11％、2．91％±0．14％,均P〈0．05）,G—CSF组细胞表面CD34、Sca-1单阳性表达率（分别为12．79％±0．39％、4．52％±0．35％）分别与对照组相比均无统计学意义,但双阳性表达率（10．21％±0．15％）与对照组相比有统计学意义（P〈0．05）。MTT检测结果显示,OP-1组和G-CSF组各时间点测定的吸光度值均高于空白对照组（均P〈0．05）。结论通过体内埋植复合OP-1明胶海绵的方法可增加干细胞的捕获数量,为建立一种简易提取自体干细胞的新方法奠定了基础。     

生物光子相干性理论的形成、发展与争议

生物系统的超微弱光子辐射(UPE)是自然界一个普遍的生命现象,是生物体固有的一种功能属性。关于UPE的产生机制却存在两种理论假说即相干性理论和代谢发光之破缺理论。然而,随着研究的不断深入,生物光子相干性理论被越来越多的研究者所认可。我们综述了自1923年以来UPE的研究进展,详细介绍了生物光子相干性理论的形成背景及其提出过程,总结了生物光子相干性理论的主要实验以及存在的争议,概括说明UPE作为生命系统普遍存在的一种现象,其研究不仅对生命科学领域具有重大的科学意义,在医学、中医学、农业、食品和环境科学等领域也具有广泛的应用价值。     

基于栅藻延迟发光表征中药药性的方法学验证

对栅藻延迟发光定量化表征中药寒热药性的方法进行优化,并进行方法学验证。用YPMS-2生物光子测量仪检测栅藻激发延迟发光强度,对测得的激发延迟发光强度用Statistica 10.0软件进行线性拟合,得到表征栅藻性质的可靠参数K,用产自于道地产地的经典寒性中药黄芩作为样本,验证本研究方法的精密度、稳定性、重复性,并进行空白实验。栅藻最佳使用K值波动范围是2.81~3.89,本研究方法精密度高,重复性、稳定性良好,空白溶剂无干扰。     

丁型肝炎病毒核酶反式切割HBV mRNA片段的实验研究

目的　探讨反式作用丁型肝炎病毒 (HDV)核酶体外切割乙型肝炎病毒 (HBV)mRNA片段的可行性。方法　将化学合成的核酶cDNA克隆到含有T7启动子的载体PGEM 4Z中。利用体外转录技术转录出核酶及底物 ,研究其体外切割活性。利用E H作图法进行核酶的酶促动力学研究。结果　在体外实验中显示两酶均能成功的将底物切割 ,37℃温浴 90min的切割百分率为 5 0 %和5 1%。利用E H作图法进行的酶促动力学研究中求得Rc1、Rc2的Km值分别为 0 6 1μmol L、0 5 8μmol L,Kcat值分别为 :0 6 4·min 1 、0 6 0·min 1 。结论　反式作用HDV核酶对非HDV底物 HBVmRNA片段的成功切割为寻找新的HBV的反义抑制手段开辟了途径。     

多重PCR归化法平行检测HBV和HCV的研究

目的：建立一种多重PCR归化法并应用于对HBV、HCV平行检测。方法：利用PCR反应5′端允许添加非互补序列的原理，运用内外两对引物，经过2轮扩增，使目的产物均带上共有序列，再以共有序列为引物进行扩增，实现多重扩增。比较和筛选四种核酸提取方法。运用正交优化法，优化并确定最佳扩增条件。对28份血标本进行对比试验，并进行质量评价。结果：归化多重PCR方法对于HBV、HCV病毒合并感染患者的诊断敏感性为83.5%，诊断特异性为70.0%，诊断指数为153．3％，诊断效率为72．2％；对HBsAg阳性患者的HBV DNA的诊断敏感性为78．6％，诊断特异性为80．0％，诊断指数为158．6％，诊断效率为79．2％。对抗－HCV阳性患者的HCV RNA的诊断敏感性为75．0％，诊断特异性为90．0％，诊断指数为165．0％，诊断效率为83．3％。结论：多重PCR归化法在多基因扩增或多种病原体的同时平行检测领域具有较大应用潜力。该方法实用、准确、可靠，对HBV HCV的防治具有实际意义。     

检测HSV等5种病原体抗体的微阵列技术

目的 建立抗原微阵列技术检测多种病原体抗体。方法 将病原体的基因工程抗原，以电脑操纵的机械手将其点在赖氨酸修饰的玻片上．制备抗原微阵列，与血清反应后随之与Cy3标记的二抗反应，用激光共聚焦扫描仪扫描玻片，检测血清中相应病原体的IgG，并进行了灵敏度和重复性的检测。结果 5种抗原的最低检测限度为HSV1-gG 1．56μg／ml，HSV2-gG 3．125μg／ml，CMV-p150 1．56μg／ml，RV-E1E2 3．125μg/ml，MT-EAM 31．26μg／ml；抗原微阵列与ELISA检测的结果相比有较高的符合率；检测IgG和IgM的灵敏度分别为50pg、10pg；不同批次2张玻片间总体变异系数为IgG 6．52，IgM 18．89。结论 抗原微阵列可用于平行检测血液中病原体特异性抗体。     

BMP-2与肿瘤关系的研究进展

骨形态发生蛋白(BMPs)属于转化生长因子-β超家族,其在骨的再生和修复中起重要作用。许多的研究还发现BMP参与调节许多种细胞的增殖、分化和凋亡的生物学过程,本文就其生物学特征、作用方式及BMP-2与肿瘤发生关系的作用简要综述。     

中国肿瘤分子生物学研究的现状及述评

对中国肿瘤分子生物学的研究近况进行综述,讨论了我国肿瘤分子生物学研究已取得的进展和有待改进的方面,提出了应进行系统化研究的建议。     

城市社区老年人生活质量研究

目的 描述社区老年人生活质量的现状,探讨影响老年人生活质量的相关因素.方法 采用分层整群抽样方法,应用世界卫生组织生活质量量表和社会支持评定量表等对北京市西城区60~80岁老人进行生活质量调查.结果 在2342名社区老人中,91.89%能获得社会支持,6.32%有焦虑情绪,8.58%有抑郁情绪.老年人的生活质量与家庭类型、家人关系、月收入、退休适应、情绪调节、锻炼、焦虑、抑郁和社会支持等因素有关.结论 北京市西城区老年人生活质量及获得的社会支持均较高,生活质量与家庭类型等诸多因素有关.