扩增片段长度多态性标记技术应用于药用植物种质资源研究的前景

对AFLP(扩增片段长度多态性)标记技术应用于药用植物品种鉴定、遗传多样性检测、遗传图谱构建、地道基因发掘及控制有效成分合成的关键基因的发掘等方面的进展进行了简要概述,并对其应用前景进行了分析。认为利用AFLP标记技术可以建立药用植物的遗传图谱,可以克隆控制中药材有效成分合成酶的关键未知基因;AFLP标记技术用于育种中,可早期对药材进行选择,大大缩短育种进程等。AFLP标记技术有望在药用植物种质资源的研究中成为最具潜力的分子标记技术。     

托吡酯有关物质的HPLC测定方法的改进

目的 确定托吡酯有关物质检测条件及定量方法。方法 采用C18柱,流动相为乙腈–水（50∶50）,柱温和检测器温度为55 ℃,体积流量为0.6 mL/min,采用示差折光检测器。测定托吡酯有关物质检测质量浓度4～40 mg/mL与峰面积的线性关系;并对检测方法进行验证。结果 托吡酯有关物质检测质量浓度在4～40 mg/mL,随着主成分质量浓度的提高,逐渐不呈线性关系;托吡酯在0.008～0.800 mg/mL与峰面积呈良好的线性关系,其相关系数为1.000 0;最低检测限为0.2 μg;重复性良好。结论 采用自身对照法比面积归一化法更准确可靠,更适宜于托吡酯的质量控制     

宏基因组学与道地药材研究

宏基因组学是将分子生物学技术应用于微生物基因总和研究的一门新兴学科,现已广泛应用于医药、农业、海洋生态环境、土壤生态环境等领域。道地药材凭借其质优、疗效好的优势自古以来被各医家所青睐,其形成与诸多因素有关,其中根际微环境在药用植物次生代谢产物形成中起着重要作用。着重介绍宏基因组学的概念、技术策略以及其在道地药材研究中的应用现状,进一步阐明土壤微生物对道地药材形成机制的影响,并为解决药用植物连作障碍提出新的研究思路。     

中药材DNA条形码鉴定的基因序列比较

该文综述了中药材DNA条形码的研究现状,在此基础上分析了叶绿体基因和核基因在中药材系统进化及鉴定中的优缺点。ITS序列在植物中进化速率较快,适合属、种等较低分类阶元的系统关系研究,而ITS2更适合于中药材的鉴定。因此,中药材系统进化与鉴定研究应当根据研究问题选择相应DNA条形码序列。随着测序成本不断下降,叶绿体全基因组条形码在药用植物鉴定中的应用将更卓有成效。     

基于SNP位点鉴定砂仁药材物种

目的：为建立基于单核苷酸多态性（SNP）技术鉴别砂仁3 个基原（阳春砂Amomum villosum、海南砂Amomum longiligulare、绿壳砂Amomum villosum var.xanthioides）的方法,对这3 个种共计60 份材料ITS2 序列进行分析比较。方法：将实验所得砂仁ITS2 序列,应用CodonCode Aligner 软件进行序列拼接比对。用MEGA 5.0 导出各序列变异位点,并对变异位点进行分析。为验证结果准确性,下载砂仁3 个基原GenBank 的所有ITS2 序列,共计34 条,对结果进行验证。结果：砂仁ITS2 序列比对后长度为230 bp,3个不同基原在135 bp 和199 bp 处存在稳定SNP（s）变异位点。结论：本研究开发的两个稳定的SNP（s）位点可以快速准确地鉴定砂仁药材3 个基原。     

基于SNP位点鉴定藏菖蒲及其近缘种

目的：采用DNA条形码技术和SNPs技术,快速准确鉴定藏菖蒲及其近缘种、混伪品。方法：提取藏菖蒲及其近缘种的全基因组DNA,扩增内部第二转录间隔区（internal transcribed spacer 2,ITS2）并测序,测序结果用CodonCode Aligner 4.2.7拼接;基于隐马尔科夫模型（Hidden Markov Model,HMM）注释ITS2,采用MEGA5.1进行序列比对,SNP位点查找、种内主导变异分析和系统进化树构建。结果：通过对藏菖蒲同属近缘种的96条ITS2序列进行分析,发现第23位和212位存在稳定的SNP位点,可准确鉴定藏菖蒲;藏菖蒲ITS2序列的种内变异很小,仅在158位存在一个多拷贝位点。结论：该方法快速、准确、特异性强,可用于藏菖蒲的鉴定。     

瑞芬太尼复合异丙酚静脉麻醉在开胸手术中的应用

目的评价瑞芬太尼复合异丙酚全凭静脉麻醉在开胸手术中的麻醉效果。方法选择开胸手术患者40例,ASAⅠ～Ⅱ级,随机分为瑞芬太尼复合异丙酚组(R组)和芬太尼复合异丙酚(F组),每组20例。观察麻醉诱导前(T0)、气管插管前(T1)、气管插管即刻(T2)、气管插管后5min(T3)的BP、HR;记录术毕停药后患者自主呼吸恢复时间、呼之睁眼时间及拔管时间;记录拔管后即刻、30min疼痛視觉模拟评分(VAS);随访记录术中知晓发生率和术后恶心、呕吐等不良反应。结果R组插管期心血管不良反应显著低于F组(P<0·05),R组术后自主呼吸恢复时间、呼之睁眼时间及拔管时间明显短于F组(P<005)。两组患者均未出现术中知晓,术后恶心呕吐发生率差异无统计学意义。结论瑞芬太尼复合异丙酚静脉麻醉可安全、有效地应用于开胸手术的患者,瑞芬太尼半期短,需提前实施术后镇痛。     

三叉苦叶挥发油的化学成分分析

三叉苦Evodia lepta(Spreng．)Merr．是芸香科吴茱萸属植物，始载于《岭南采药录》，又名三桠苦、三叉虎等，药用根、茎或叶，分布于中国海南、广东、广西、福建、台湾、云南等省区，《中华人民共和国药典》1977年版曾收载。本品味苦、性寒，具有清热解毒、祛风除湿等功效。主治咽喉肿痛、疟疾、黄疸型肝炎、风湿骨痛、湿疹皮炎，乙型脑炎、流行性脑脊髓炎、感冒发热、扁桃体炎、咽喉炎、跌打肿痛、风湿痹痛等。为进一步开发其药用价值，本实验利用气相色谱-质谱-计算机联用系统对三叉苦叶挥发油化学成分进行了研究。     

ITS2序列鉴定筋骨草及其近缘种

本研究对筋骨草ITS2区段测序,探讨该片段用于中药筋骨草、白苞筋骨草、白毛夏枯草和夏枯草种间分子鉴别和系统学研究中的意义,我们对核基因ITS2区段进行PCR扩增并测序,获得了该区间的完整序列,所得序列用软件MEGA4.0进行相关分析。测得筋骨草、白苞筋骨草、夏枯草和白毛夏枯草的ITS2片段长度分别为312bp,304bp,303bp,304bp。四个物种ITS2片段序列的遗传距离(Kimura2)为0.010～0.175,各个筋骨草种内的不同产地该序列无差异。用MP法根据ITS2序列的遗传距离建立系统发生树,聚类结果和形态分类相符。根据ITS2序列特征,能有效区分筋骨草和其他易混中药材。ITS2具有做为鉴定的条形码序列的潜力。应用该序列可以有效鉴定筋骨草及其近缘种。