羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠后半数致死量(LD_(50))的测定

目的测定羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠后的LD50。方法将感染羊瘙痒因子263K的仓鼠脑组织用生理盐水制成10%(w/v)脑组织匀浆,梯度稀释后感染仓鼠,观察仓鼠的发病情况。以Reed-Muench公式计算LD50,用West-ern blot方法检测观察期结束后发病及仍存活的仓鼠脑组织、脾组织中抵抗蛋白酶K的PrPSc。结果当颅内接种稀释度由低到高变化时,仓鼠发病的潜伏期及病程同时也由短到长发生变化。发病仓鼠脑组织中可以检测到PrPSc,但是PrPSc的量在不同的组之间无太大差别。观察期结束后,仍存活的仓鼠脑组织中未检测到具有PK抗性的PrP信号。结论本实验室保存的羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠的LD50为9.2-log10LD50i.c.units/0.001g brain,即当对仓鼠颅内接种10μl羊瘙痒因子263K的10-9.2稀释液时,50%的仓鼠会死亡。     

电喷雾离子化质谱法及其在药物与生物大分子分析中的应用

静电场使液体分散成荷电液滴的电喷雾现象至少在两个世纪以前人们就已发现 ,但直到 80年代中期 ,Ｊ .Ｆｅｎｎ等[1,2 ] 成功地将电喷雾引入质谱离子化 ,才开创了电喷雾离子化质谱法 (ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙｉｏｎｉｚａｔｉｏｎｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ ,ＥＳＩ/ＭＳ)的新纪元。ＥＳＩ与质谱的其它离子化方法相比 ,有 3个显著特点 :(1)ＥＳＩ可以形成多电荷离子 ,所以除了小分子化合物的测定外 ,还可以用ｍ/ｚ有限的质量分析器分析强极性、热不稳定的大分子化合物 ,大大拓展了已有质谱电离技术的应用范围。 (2 )在ＥＳＩ中 ,样…     

结合于NISV或ISCOM释放系统的HSV-2抗原免疫小鼠后的抗体应答、细胞因子水平和保护作用

作者用小鼠模型研究结合于免疫刺激复合物 ( ISCOM)或非离子表面活性剂小泡( NISV)的 2型单纯疱疹病毒 ( HSV- 2 )抗原制剂的免疫原性。　　将 Vero细胞培养的 HSV- 2用两性去污剂提取糖蛋白 ,经蔗糖密度梯度离心和用不同糖蛋白特异性单克隆抗体来检测 HSV共同糖蛋白 B、D、E和 HSV- 2特异糖蛋白 G-2。应用 Quil A法将 HSV- 2糖蛋白制成 IS-COM疫苗。通过不同温度反复冻融或脱水 -再水化处理将抗原捕入 NISV制成三种NISV疫苗 :NISV30、NISV6 0和 DR- NISV。　　选 8～ 1 0周龄雌性 Balb/c小鼠 ,分别间隔 3周皮下接…     

脑炎心肌炎病毒3C蛋白酶抗体的制备和检测

目的:制备脑炎心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus, EMCV)的3C蛋白酶抗体并检测抗体特异性反应位点。方法:构建原核表达载体pQE30-3C,将蛋白进行体外原核表达,免疫纯种BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,通过Western blot检测制备的抗体与3C蛋白结合的特异性,通过免疫荧光和...     

BSL-2实验室开展SARS-CoV-2核酸检测过程中的生物安全管理

目的:总结生物安全二级（bio-safety level 2,BSL-2）实验室开展新型冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2）核酸检测过程中的生物安全管理经验与效果。方法:检测样本来源于2020年2月21日到2020年11月5日送...     

褪黑素对睡眠剥夺大鼠胃黏膜损伤的保护作用

目的:研究褪黑素对睡眠剥夺大鼠胃黏膜损伤的保护作用及机制。方法:将24只SD大鼠采用随机数字表法分为3组,分别为对照组(生理盐水腹腔注射)、模型组(生理盐水腹腔注射+睡眠剥夺)和实验组(15 mg/kg褪黑素腹腔注射+睡眠剥夺)。采用小平台水环境法建立大鼠睡眠剥夺模型,睡眠剥夺前大鼠适应环境7 d,从适应环境开始至睡眠剥夺期间继续给药。睡眠剥夺72 h后用相应试剂盒检测各组大鼠血清丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)及前列腺素E2(PEG2)含量。观察胃黏膜组织病理损伤情况并进行胃黏膜损伤指数测定。结果:3组大鼠血清MDA、GSH、PEG2及胃黏膜损伤指数比较,差异均有统计学意义(F=9.441、9.667、9.747、486.804,P均<0.05)。与对照组比较,模型组胃黏膜损伤指数升高(P<0.05),血清MDA和PEG2含量升高、GSH含量降低(P均<0.05);与模型组比较,实验组胃黏膜损伤指数降低(P<0.05),血清MDA和PEG2含量降低、GSH含量升高(P均<0.05)。结论:褪黑素可通过降低血清MDA和升高GSH减轻睡眠剥夺造成的胃黏膜损伤。     

甘露散治疗更年期潮热证的实验研究

目的研究甘露散(GanLuSan,简称GLS)对更年期潮热证的影响。方法1.小鼠静注氨茶碱造成潮热模型,灌胃GLS治疗,测定给药后耳廓微循环微动脉血流速度及微动脉与微静脉口径。2.大鼠口服党参与黄芪煎剂造成热证模型,灌胃GLS治疗,测定给药后体温与ATP酶活性。结果GLS可减轻小鼠潮热模型潮热症状,使循环微动脉血流速度降低,微动脉与微静脉口径缩小;对热证模型大鼠,GLS可以降低体温,减少ATP酶活性。结论GLS对试验性更年期潮热证具有治疗作用。     

超声引导下使用空芯针行乳腺亚临床病灶穿刺活检应用价值的研究

目的探讨超声引导下使用空芯针行乳腺亚临床病灶穿刺活检的诊断方法及其临床应用价值。方法回顾性分析本院自2000～2006年间门诊或住院的162例乳腺亚临床病灶的综合诊断资料和随访资料。结果162例患者中,超声首检诊断恶性及可疑恶性27例,超声引导下CNB诊断恶性病变30例,经开放手术证实全部为恶性;随访过程中超声引导下CNB新诊断恶性病变9例,经开放手术证实其中一例为炎性病变,其余8例为恶性。结论采用超声探查与CNB病理学检查相结合的方法对乳腺亚临床病灶进行综合判断,可提高乳腺亚临床病灶诊断的准确率,避免了不必要的开放手术,对于CNB活检阴性的病例有必要进行定期随访。     

miR-452-5p靶向SOX7促进食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭及EMT

目的：检测miR-452-5p在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达,并探讨其异常表达对食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭能力和EMT进程的影响及其分子机制。方法：收集2012年3月至2015年12月在河北医科大学第四医院就诊的86名ESCC患者的癌组织样本和对应的癌旁组织,用qPCR法检测miR-452-5p及其他相关基因在ESCC组织和细胞中的表达;向KYSE-150细胞中分别转染miR-452-5p mimic或pcDNA3.1-SOX7构建过表达的细胞株。分析miR-452-5p表达与ESCC病理特征和患者5年OS的关系。用MTS、Tanswell法检测miR-452-5p过表达对食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭能力和EMT进程的影响;用双荧光素酶报告基因实验及TOP/FOP报告基因系统检测miR-452-5p与SRY盒转录因子（SOX7）3’UTR区的结合作用及对Wnt/β-catenin通路活化水平的影响。结果：miR-452-5p在ESCC组织中呈明显高表达（P<0.01）,并与ESCC患者的淋巴结转移、TNM分期及5年OS密切相关（均P<0.01）。mi...     

坎地沙坦与坎地沙坦酯在Caco-2细胞模型中的转运特性

目的 研究坎地沙坦(Cand)与坎地沙坦酯(Cil)在Caco-2细胞中的跨膜转运特征.方法 采用Caco-2细胞单层膜模型来考察药物的浓度、介质pH与P-gp抑制剂维拉帕米对Cand与Cil跨膜转运的影响,并比较两者双向跨膜转运的差异.结果 两者的吸收转运具有pH依赖性,分泌转运具有浓度依赖性,其分泌(BL-AP)方向转运均快于吸收(AP-BL)方向转运,且Cil的AP-BL方向转运比Cand快;在P-gp抑制剂维拉帕米存在下,两者的转运外排率显著下降(P<0.01).结论 Cil容易通过Caco-2细胞的单层膜,且外排蛋白参与了Cand与Cil的跨膜转运.