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目的分析胆酸降载脂蛋白A(Apo A)效应与miR-23b-3p的关系,研究胆酸降Apo A作用新机制。方法首先用生物信息学在线工具对miR-23b-3p与调控LPA基因的转录因子肝细胞核因子4γ(HNF4γ)进行靶基因分析,使用荧光素酶报告系统对miR-23b-3p与调控LPA基因的转录因子HNF4γ进行靶基因验证实验,Western blot检测Apo A表达水平、p38MAPK(MAPK:丝裂原活化蛋白激酶)及p-p38MAPK,实时定量PCR检测miR-23b-3p表达水平。结果生物信息学分析表明HNF4γ可作为miR-23b-3p的靶基因,荧光素酶报告系统转染miR-23b-3p处理组细胞裂解后荧光强度显著低于对照组,验证了HNF4γ可作为miR-23b-3p的靶基因。胆酸呈剂量和时间依赖性抑制Hep G2细胞Apo A的表达,以32 mg/L和24 h的作用最显著。胆酸抑制Apo A表达与活化MAPK和上调miR-23b-3p有关。结论胆酸呈剂量和时间依赖性地下调Hep G2细胞Apo A表达水平;胆酸降Apo A与上调miR-23b-3p有关。 相似文献
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[目的]为获得生菜高频率的离体再生体系.[方法]采用正交试验设计,探讨不同生菜品种、不同消毒时间对培养生菜无菌苗的影响,并研究不同浓度的植物生长调节剂、AgNO3和不同外植体切段对生菜外植体芽分化及生根成苗的影响.(结果]美国大速生品种用70%乙醇浸泡60s,再用2%次氯酸钠处理15min,发芽率达到80%,无菌苗生长好;生菜离体培养再生芽的优化分化条件组合为MS(Murashige and Skoog's)培养基附加BA(6-苄基腺嘌呤,6-benzylaminopurine)0.5mg/L IAA(吲哚乙酸, indole-3-acetic acid)0.5mg/L,外植体为2-3d的子叶;生菜再生芽在含低浓度的生长素NAA(萘乙酸,a-naphthaleneacetic acid)浓度为0.05mg/L,或IAA浓度为0.5mg/L的1/2MS培养基中生根情况较好.[结论]优化的生菜离体再生体系具有很好的重复性,可用于遗传转化获得保健生菜. 相似文献
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目的 探索5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)的DNA去甲基化作用对HepG2细胞载脂蛋白A(ApoA)表达的影响,并探讨其作用机制。方法 选取ApoA高表达细胞株HepG2细胞为研究对象。噻唑蓝法测定HepG2经不同浓度(0、10、20、40、80 μmol/L)的5-Aza-CdR处理不同时间(12、24、48、72、96 h)后细胞相对存活率;Western blot检测5-Aza-CdR不同浓度组HepG2细胞ApoA、法尼酯X受体(FXR)的表达水平;逆转录聚合酶链反应检测ApoA、FXR的mRNA水平;亚硫酸氢盐测序PCR检测FXR基因启动子在5-Aza-CR不同浓度组的甲基化水平。结果 与对照组相比,5-Aza-CR 10、20、40 μmol/L组在12、24、48、72 h各组间细胞存活率无统计学差异(P>0.05),而在20 μmol/L 96 h组、40 μmol/L 96 h组、80 μmol/L 24 h组、80 μmol/L 48 h组、80 μmol/L 72 h组以及80 μmol/L 96 h组HepG2细胞存活率存在统计学差异(P<0.05),选取0~40 μmol/L为5-Aza-CdR的安全浓度范围,0~72 h为合适作用时间。与对照组相比,5-Aza-CdR呈剂量和时间依赖性上调FXR蛋白、下调ApoA蛋白表达,其中以40 μmol/L组最为明显(P<0.05);与对照组相比,5-Aza-CdR呈剂量依赖性上调FXR mRNA、下调ApoA mRNA表达,其中以40 μmol/L组最为明显(P<0.05)。随着5-Aza-CdR浓度的递增,FXR基因启动子甲基化水平呈下降趋势,其中对照组FXR基因启动子甲基化率为58.3%,而40 μmol/L组FXR基因启动子甲基化率仅为8.3%。结论 5-Aza-CdR通过DNA去甲基化作用促进FXR表达,从而下调ApoA的表达。 相似文献
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目的 设计用于胰十二指肠切除术中Braun吻合的磁环并进行临床试用。方法 根据人体空肠解剖特点,结合胰十二指肠切除手术中Braun吻合需求,设计并加工了用于Braun吻合的子磁环(Daughter Magnetic Ring,DMR)和母磁环(Parent MagneticRing,PMR)。PMR为椭圆形位于输出袢肠管,DMR为圆形位于输入袢肠管。电子万能试验机测试DMR和PMR的磁力学性能。在临床中利用磁环为2例胰十二指肠切除手术患者实施Braun磁吻合,记录吻合操作时间、术后并发症及磁体排出时间。结果 成功加工出用于Braun吻合的DMR和PMR。DMR和PMR在零距离时可获得最大吸力为44.60 N,随着位移增加,其间的吸力迅速减小。临床应用2例患者,吻合操作时间分别为2 min和1.5 min;术后患者未出现肠梗阻、肠瘘等并发症;磁体排出时间分别为21 d和25 d。结论 利用磁环建立Braun吻合操作简单,临床初步试用显示安全可行,具有临床推广潜力。 相似文献
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正交设计优化皱叶生菜离体再生体系 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 为获得生菜高频率的离体再生体系.方法 采用正交试验设计,探讨不同生菜品种、不同消毒时间对培养生菜无菌苗的影响,并研究不同浓度的植物生长调节剂、AgNO3 和不同外植体切段对生菜外植体芽分化及生根成苗的影响.应用回归分析法对试验结果进行分析.结果 美国大速生品种用70%乙醇浸泡60 s,再用2%次氯酸钠处理15 min,发芽率达到80%,无菌苗生长好;生菜离体培养再生芽的最优分化条件组合为Ms(murashige and skoog's medium)附加BA(6-苄基腺嘌呤,6-benzylaminopurine)0.2 mg/L,NAA(萘乙酸,α-naphthaleneacetic acid)0.1 ms/L,外植体为2~3 d的子叶;生菜再生芽在含低浓度的生长素[NAA浓度为0.05 mg/L,或LAA(吲哚乙酸,indole-3-acetic acid)浓度为0.5 mg/L]的1/2 MS培养基中生根情况较好.结论 优化的,生菜离体再生体系具有很好的重复性,可用于遗传转化获得保健生菜的研究. 相似文献