60种中草药抗乙型肝炎病毒的实验研究

本文利用抑制HBV-DNAp及降解HBV-DNA的体外实验方法对临床治疗肝病用的60种中草药进行研究。其中28种药对HBV-DNAp抑制率达50％以上,18种达25～50％,主要为清热解毒类药。其中部分可降解HBV-DNA。文中对部分中药组份进行了追踪研究,还讨论了中药配伍增效作用。     

聚合酶链反应检测TT病毒核酸的优化条件

目的探讨聚合酶链反应(PCR)扩增TTV核酸的优化条件,初步测定慢性丙型肝炎及慢性非甲-戊,非庚肝炎患者中TT病毒的检出率.方法将标本分别予以4℃保存1wk、室温保存1wk及1wk内将标本于-35℃与室温间反复冻融6次3种储存方法.分别以SDS-蛋白酶K方法(方法1),NP-40法(方法2)及聚乙二醇法提取TTV DNA,分别以套式PCR与单管套式PCR检测TTV.以PCR直接序列分析方法测定扩增产物以验证扩增产物的特异性.结果在10份已知病毒标志均为阴性的血清中,方法1与方法2提取核酸后可在4份血清中检出TTV,方法3提取核酸后的检出率为0.1次PCR、单管PCR与单管套式PCR对10份已知病毒标志均为阴性血清的TTV检出率分别为10%,40%和40%.将2份血清按原血清、10-1～10-10系列稀释后检测,发现,1次PCR、套式PCR和单管套式PCR的检出水平分别为原倍、10-5与10-4及阴性、10-4与10-4.4℃保存1wk、室温保存1wk及反复冻融标本的最低检测稀释度为10-5,10-4,10-3与10-4,10-4,10-3.对一份PCR产物进行序列分析证实为TTV特异性基因.检测31份慢性丙型肝炎及32份慢性非甲-戊,非庚肝炎标本,阳性率分别为29.03%和34.38%.结论建立了一种敏感、快速、特异的TT病毒检测方法.在1wk内,不同的标本储存方法对检测结果的影响不大,TT病毒可能是慢性非甲-戊,非庚肝炎及输血后肝炎的重要致病因子.     

从HBsAg阳性携带者血清中提取HBcAg用于固相放免法检测抗HBc

1971年Almeida等把血清中Dane颗粒用tween-80裂解得到直径为27μm的HBcAg,并指出它不同于HBsAg。此后,国外先后从乙肝患者的肝细胞或血浆中提到粗制或精制的HBcAg。1978年本研究室与解放军302医院协作应用密度梯度超速离心法从尸肝中精制了HBcAg,并建立了国家标准品。HBcAg的提取对研究乙肝病毒,及乙肝的临床和实验室研究具有重要意义,其实用价值之一是可用于检测抗HBc。     

多肽研究XIX:丙型肝炎病毒的免疫选择性

丙型肝炎病毒(HCV)基因组有显著的异源性和高度的可变性。其中E2HV(高变区)认为是宿主识别HCV,并且产生免疫压力的靶目标之一。文中设计并合成了三段多肽抗原P2,P9和P10。抗原性及免疫原性研究结果表明:(1)HCV宿主体内存在抗-E2HV抗体,但这种抗体是非中和性的,或者是抗体滴度太低。不足以中和HC病毒抗原;(2)同一基因型的HCV抗-E2HV抗体有某种共同的结构特点,从而使某一HCV病毒株E2HV抗原能够与其它病毒株抗-E2HV抗体反应,大约有30%的代表性;(3)丙型肝炎病毒E2HV区里碳端398～412多肽片段可以引起动物免疫应答。     

乙型肝炎疫苗研究进展

乙型肝炎疫苗人体免疫效果和实用价值,已被越来越多的人所公认。近来国内外已有不少文献报导了该疫苗的人群试用观察结果和发展前景,由于乙型肝炎病毒(HBV)体外培养尚未成功,目前除少数报导抗原效价很低的多肽疫苗外,大多采用提纯乙型肝炎表面抗原(HBsAg)灭活疫苗。因此,如何改进抗原的提纯方法,及提高疫苗的免疫效果,就成了当前研制乙型肝炎疫苗过程中急待解决的问题。     

抗HCV国家参考品及高质量丙肝诊断试剂的研究

丙型肝炎病毒(HCV)于1989年刚刚被发现,它的基因为一条正链RNA分子,在我国人群中的感染率为3.2％。丙型肝炎通过血液传播,慢性化率很高,目前尚无预防疫苗,也无特效治疗药物。阻断其传播的最有效途径为用丙肝试剂筛查供血员和血液制品,为诊断丙型肝炎则需要进行基因检测和对初筛结果进行确证。     

检测丙型肝炎患者NS5区抗体的临床意义探讨

目的检测慢性丙型肝炎患者和１４例ＨＣＶ原发感染后ＮＳ５抗体长达一年半的动态变化，探讨ＮＳ５抗体的临床意义。方法应用重组ＮＳ５抗原，建立ＥＩＡ方法进行检测。结果慢性丙型肝炎患者抗－ＮＳ５抗体阳性率为６０．４８％，ＨＣＶ感染后一月抗－ＮＳ５抗体阳性率为１６．３５％，三月为７５％。结论抗－ＮＳ５抗体无早期诊断价值。抗－ＮＳ５抗体持续阳性者，血清ＡＬＴ多明显升高，抗－ＮＳ５抗体与肝脏疾病活动性相关。丙型肝炎患者中存在抗－Ｃ、抗－ＮＳ３、抗－ＮＳ４抗体阴性，而抗－ＮＳ５抗体单独阳性，表明检测抗－ＮＳ５抗体具有独特的诊断价值     

~(32)P-HBV DNA探针的制备

<正> 自从1973年Kaplan和1974年Ro-binson证实乙型肝炎病毒(HBV)内含有内源性DNA聚合酶(DNAP)活性以来,许多研究者利用其内源性DNAP活性,以原HBV DNA为模板,用放射性核素标记制备HBV DNA探针来进行HBV DNA分子生物学的研究。     

血清乙肝病毒X基因的检测方法及意义

目的 探讨血清乙肝病毒（ＨＢＶ）Ｘ基因的检测方法及肝病患者Ｘ基因检测的意义。方法 通过ＰＣＲ扩增法探讨ＨＢＶ Ｘ基因的检测方法,对扩增产物的序列进行测序分析,并对３０例肝癌及３２例肝硬化患者血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ与Ｘ基因进行检测。结果经琼脂糖电泳与序列分析表明,扩增产物与Ｘ基因序列一致。血清学检测显示,２例肝癌与２例肝硬化患者血清中Ｘ基因检测阳性,但ＨＢｓＡｇ检测阴性。结论 应用ＰＣＲ法能在血清中扩增出完整Ｘ基因片段,为研究Ｘ基因的序列变化与肝癌发生的关系提供了一个有效途径。部分肝病患者血清ＨＢｓＡｇ阴性,但在血清中能检出Ｘ基因,提示肝组织中存在Ｘ基因整合。