2'-5' oligoadenylate synthetase in chronic hepatitis C patients

２＇┐５＇ｏｌｉｇｏａｄｅｎｙｌａｔｅｓｙｎｔｈｅｔａｓｅｉｎｃｈｒｏｎｉｃｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｐａｔｉｅｎｔｓＴｏｎｇＷｅｎｂｉｎ仝文斌，ＺｈａｎｇＣｈｕｎｙｉｎｇ张春英，ＦｅｎｇＢａｉｆａｎｇ冯百芳ａｎｄＴａｏＱｉｍｉｎ陶其敏ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴ...     

SEQUENCE ANALYSIS OF THE NS5 REGION OF GBV-C／HGV AND DETECTION OF THE VIRUS BY REVERSE TRANSCRIPTASE PCR

GBV-C/HGV is a newly identified virus associated with human hepatitis.In this study,the nucleotide sequences of the partial NS5 gene of GBV-C/HGV derived from sera of 8 Chinese patients were determined.The nucleotide homology among the 8 isolates were 92% on average.On the basis of sequence analysis,two sets of oligonucleotide primers derived from highly conserved region of GBV-C/HGV NS5 gene were designed to establish both sensitive and specific nested PCR for detection of GBV-C/HGV RNA.253 Chinese patients were examined for the virus RNA.GBV-C/HGV RNA positive rates in patients infected with HBV,HCV and patients with chronic non-B,non-C hepatitis were 18.4%,19.8% and 8.9% respectively.This result suggested that HBV,HCV and GBV-C/HGV shared the same transmission risk factors.8 patients with GBV-C/HGV and HCV coinfection were retrospectively observed for the response to interferon.Coinfection with GBV/HGV did not negatively influence the responsiveness of HCV,and GBV-C/HGV was sensitive to interferon to a certain degree.     

肝功能实验诊断研究进展

肝功能实验诊断研究进展陶其敏肝功能检测是诊断肝病、判断肝病病情变化最常用最简便的方法。随着肝病研究的深入及分子生物学的飞速发展，新的检测项目和检测方法为肝病诊断治疗提供了更好的指标。一、酶学检验酶是机体物质代谢、生命活动的必要条件。由于酶的合成、释放...     

自动化免疫分析的进展

自动化免疫分析的进展仝文斌陶其敏目前，临床检测中自动化分析已经成为各学科的发展趋势和方向。１９８３年，Ｌｙｎｎ即指出，今后免疫技术的发展方向应该是采用均相自动化分析系统及使用固相和免疫计量分析。但直到现在，自动化免疫分析技术在临床实验中的应用却还是远...     

多肽研究——Ⅸ.乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)Pre-S区域肽段的合成和抗原特异性测定

采用溶液法和固相法,合成了HBsAg Pre-S蛋白区域七个六肽片段。将其与载体蛋白结合。用多克隆抗HBsAg和单克隆抗“α”测定了肽—蛋白结合物的抗原特异性,结果表明P₁和P₅有较高的抗原特异性。     

多肽研究——Ⅸ.乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)Pre-S区域肽段的合成和抗原特异性测定

采用溶液法和固相法,合成了HBsAg Pre-S蛋白区域七个六肽片段。将其与载体蛋白结合。用多克隆抗HBsAg和单克隆抗“α”测定了肽—蛋白结合物的抗原特异性,结果表明P_1和P_5有较高的抗原特异性。     

HCV E2和HBV preS融合蛋白真核表达载体的构建及在哺乳动物细胞 …

目的 构建丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｅ２和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ｐｒｅＳ融合蛋白的真核表达载体。方法 用ＰＣＲ方法扩增ＨＢＶｐｒｅＳ和ＨＣＶＥ２蛋白基因,并将二者克隆到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３中,用脂质体转染试剂将其转入ＣＯＳ７细胞,通过免疫荧光检测细胞瞬时表达的融合蛋白,结果Ｅ２－ｐｒｅＳ融合蛋白基因包括了全长的ＨＢＶｐｒｅＳ和ＨＣＶＥ２蛋白基因,嵌合基因长度约１．６ｋｂ表达载体在ＣＯＳ７细胞表达出     

丙型肝炎病毒E2蛋白的高效表达及其临床应用

目的：在大肠杆菌中表达丙型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃｖｉｒｕｓ,ＨＣＶ）Ｅ２ 包膜蛋白,并对其进行初步纯化。用纯化的包膜蛋白检测ＨＣＶＲＮＡ 阳性血清中Ｅ２ 抗体,研究其检测Ｅ２ 抗体的敏感性和特异性。方法：将ＨＣＶＥ２ 蛋白基因克隆到原核表达载体中,并转化大肠杆菌。用ＩＰＴＧ 诱导细菌表达Ｅ２ 蛋白,经离子交换层析纯化蛋白。用纯化的包膜蛋白包被微孔板,经ＥＬＩＳＡ方法检测ＨＣＶＲＮＡ阳性血清中的Ｅ２ 抗体。结果：在大肠杆菌表达了相对分子质量为４５ ０００ 的可溶性Ｅ２ 蛋白,占细菌总蛋白量的２１％ ,纯化后,蛋白纯度为８５％ 。用其检测ＨＣＶ 患者血清１７１ 例,Ｅ２ 抗体的检出率为６３％ 。在Ｅ２ 抗体阳性的血清中,部分为抗ＨＣＶ 阴性。结论：Ｅ２ 蛋白的表达及初步纯化的成功,可能用于临床检测。各基因型ＨＣＶＥ２ 包膜蛋白的抗体之间有交叉反应,在目前的抗ＨＣＶ 诊断试剂中加入可溶性、非融合Ｅ２ 包膜蛋白,可以改善抗ＨＣＶ 诊断试剂的特异性和敏感性。     

HBV、HCV、HGV重叠感染的回顾性研究

目的了解10年前我国HBsAg阳性献血员中HBV,HCV,HGV重叠感染状况。方法采用逆转录套式PCR技术检测血清中HCWI：NA、HGVRNA,免疫PCR技术检测HBVDNA。结果发现在HBsAg阳性献血员中,HBVDNA阳性率90％,HCVRNA阳性率20％,HGVRNA阳性率6％,三重感染阳性率3％。结论HBsAg阳性献血员中有较高比例的双重感染,且以HCV感染为主。     

乙型肝炎病毒前S蛋白作为“饵”载体的构建及表达(简报)

乙型肝炎 (ＨＢ)是一种全球性疾病 ,病毒携带率约 8%～ 10 % ,ＨＢ又常常发展为慢性肝炎、肝硬化和肝癌。ＨＢＶ属于嗜肝ＤＮＡ病毒 ,有包膜 ,有很强的种属特异性 ,ＨＢＶ只能感染人和大猩猩 ,这有碍于体外模型的建立和研究。但是用ＨＢＶＤＮＡ转染其他哺乳动物细胞系后 ,可获得病毒的复制 ,因此认为ＨＢＶ的种属特异性决定于病毒受体和配体的特异性结合。对病毒特异性受体的研究有利于研究病毒感染机制 ,也有助于阻断病毒受体的入胞。酵母双杂合体系 (ｙｅａｓｔｔｗｏ ｈｙｂｒｉｄｓｙｓｔｅｍ)的基本原理是利用酿酒酵母(Ｓａｃｃｈａｒ…