Hsa-miR-204反义寡核苷酸对急性淋巴细胞白血病细胞的增殖抑制作用

目的:观察抑制hsa-miR-204表达对人急性淋巴细胞白血病细胞（MOLT-4）生长与凋亡的影响。方法:设计合成hsa-miR-204的反义核苷酸序列（AMO-miR-204）并用脂质体转染法将其转染MOLT-4细胞。Q-PCR检测hsa-miR-204的表达量。噻唑蓝（MTT）试验和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞早期凋亡率。Transwell检测细胞侵袭能力。结果:AMO-miR-204可抑制hsa-miR-204的表达,以反义核酸浓度为0.6μmol/L时,下调最为明显（P<0.05）。MTT实验示AMO-miR-204的最佳转染抑制浓度为0.6μmol/L。AMO6组细胞平板克隆形成能力明显减弱［（29±8）%］,差异有统计学意义（P<0.05）。流式细胞术检测AMO6组细胞凋亡达(7.47%）。Transwell细胞侵袭能力实验示AMO6组细胞侵袭能力较其余两组减弱。结论:AMO-miR-204能有效抑制MOLT-4细胞的增殖,并促进其凋亡。hsa-miR-204有可能作为急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia,ALL）基因治疗的靶基因,同时也为深入揭示ALL的发生和发展机制提供了实验依据。     

联合检测血清胱抑素C、β2微球蛋白和尿微量白蛋白对早期糖尿病肾病的诊断价值

目的:探讨联合检测血清胱抑素C(CysC)、β2微球蛋白(β2MG)和尿微量白蛋白(mAlb)对早期糖尿病肾病(DN)的诊断价值.方法:采用免疫比浊法分别检测80例早期DN患者(DN组)、63例无肾病的糖尿病患者(NDN组)和60例健康成年人(对照组)血清CysC、β2MG和晨尿中mAlb的含量,并分析比较三者单项、两两联合及三项指标联合检测对早期DN的诊断效能.结果:早期DN组的血清CysC、β2MG和尿mAlb含量及异常检出率均显著高于对照组和NDN组(P＜0.05);三者诊断DN的灵敏度分别为79.7%、50.6%和75.9%,三项指标联合检测灵敏度达89.9%,明显高于任一单项和两两联合检测组合(P＜0.05);三项指标诊断早期DN的ROC曲线下面积分别为0.896、0.832、0.890,以血清CysC最优.结论:CysC、β2 MG与mAlb,都是诊断早期DN较敏感的指标;三项指标联合检测能大大提高检测灵敏度,对于监测早期DN的发生和病情发展程度有重要意义.     

冠心病患者血清同型半胱氨酸、C反应蛋白检测的临床意义

目的 探讨冠心病（CHD）患者血清同型半胱氨酸（HCY）和C反应蛋白（CLP）的水平变化及临床意义.方法 选择经冠状动脉造影检查确诊为CHD的门诊及住院患者105例作为观察对象,其中包括稳定型心绞痛（SAP组）31例、不稳定型心绞痛（UAP组）39例、急性心肌梗死（AMI组）35例;并选择同期体检的健康人40例作为对照组.检测所有观察对象的血清HCY、CRP水平,并对检测结果进行统计学分析.结果 CHD组患者血清HCY和CRP水平均显著高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;CHD患者各组之间血清HCY、CRP水平亦存在显著差异（P＜0.05）.结论 CHD患者血清HCY和CRP水平与冠状动脉病变程度相关,对CHD的临床诊断及疗效监测有重要价值.     

基于生物学信息分析及推测PCGEM1在前列腺癌中的表达分子调控网络

非编码 RNA,包括以 miRNA、siRNA 和 piRNA 等为代表的短小 RNA 和长链非编码 RNA（long non-coding RNA,lncRNA）。长链非编码 RNA,有别于其他小分子非编码 RNA,是目前非编码 RNA 研究的热点。随着研究的不断推进,人们发现 lncRNA 与物种进化、胚胎发育、物质代谢以及肿瘤发生等都有着密切的联系[1]。miRNA 是一类长度为21~25个核苷酸（nt）的单链 RNA,属于非编码蛋白 RNA,广泛存在于生物界,miRNA 调节人类1/3基因的表达,miRNA 是一类新发现的基因调节剂,可以在转录水平或转录后水平调节基因的表达,在肿瘤的发生与发展中扮演着“癌基因”与“抑癌基因”的角色[2]。前列腺癌基因表达标记1（prostate cancer gene expression marker 1, PCGEM1）全长1643 nt,在前列腺组织及前列腺癌组织中呈特异表达的长链非编码 RNA,但其表达调控网络目前未知[3],本文旨在运用生物学软件对其进行生物学信息分析,为下一步实验验证其表达分子调控网络机制提供线索。     

泌尿系统分离的超广谱β酶菌及其耐药性分析

目的:了解泌尿系统分离的产超广谱β内酰胺酶细菌(ESBLs)泌尿系统分离的状况,并对其作耐药性分析。方法:对121株革兰阴性杆菌用复合纸片法做表型确证试验及双纸片协同法进行对照监测。结果:泌尿系统分离的革兰阴性杆菌中,ESBLs菌分离率为23.1%,其中大肠埃希菌占16.5%,肺炎型肺炎克雷伯菌占6.6%,对产ESBLs菌耐药率较低的药物有:阿米卡星(20.0%),阿莫西林、克拉维酸(37.6%),头孢噻肟/克拉维酸(14.1%),头孢吡肟(18.1%),亚胺培南(8.7%),而氨苄西林,头孢唑林等均超过50%。结论:泌尿系统分离ESBLs菌主要为大肠埃希氏菌和肺炎型肺炎克雷伯菌为主,对头孢类等药有较高的耐药性,提示对泌尿系统分离ESBLs菌的治疗根据药敏结果有重要意义。     

米诺环素体外抑制弓形虫增殖作用的研究

目的 评价米诺环素(MNC)体外抑制弓形虫速殖子的增殖作用.方法 体外在96孔板中用Hela细胞培养弓形虫速殖子,设置SMX给药组、MNC给药组和未给药组.观察各组弓形虫速殖子的增殖情况、形态变化,并对各组进行活虫计数.结果 给药后72 h,与未给药组比较,SMX给药组活虫计数显著减少[(2.08±0.40)vs(15.17±2.07),P<0.01],MNC给药组活虫数亦显著减少[(1.42±0.20)vs(15.17±2.07),P<0.01];给药后96 h,与未给药组相比,SMX给药组活虫计数显著减少[(1.42±0.20)vs(10.92±0.47),P<0.01],MNC给药组活虫数亦显著减少[(1.92±0.33)vs(10.92±0.47),P<0.01],差异均有统计学意义;给药后120 h,各组活虫计数比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 MNC在体外能够明显抑制弓形虫速殖子的增殖.     

人工股骨头置换治疗严重股骨转子间骨折的有限元分析

目的　建立股骨转子间骨折、人工关节假体的三维数字模型,应用有限元对人工股骨头置换术后的股骨应力分布进行分析,评价置换术后的初始稳定性。 方法　利用螺旋CT对志愿者的左侧股骨进行断层扫描获取图像数据,经Mimics软件和Unigraphics建模软件处理,重建股骨三维模型。在此基础上,建立股骨转子间骨折、标准柄股骨假体三维实体模型,最后利用有限元分析软件Ansys10.0建立人工股骨头置换术治疗股骨转子间骨折的三维有限元模型,并对该模型进行生物力学分析。 结果　应力分析显示：正常股骨的应力由近端向远端逐渐上升,并于中下段达到最高。同时人工股骨头假体的应力集中于中段,与正常股骨的应力变化基本一致。人工股骨头置换没有改变股骨总体的应力模式,股骨距部位未见明显的应力集中区,依然是由近端向远端逐渐增加,应力峰值区域亦于全长股骨的中下段。 结论　标准柄人工股骨头置换治疗股骨转子间骨折不会引起股骨应力分布的明显改变,可以获得重建后的初期稳定。     

化学发光免疫分析法HER-2测定试剂盒的初步临床评价

目的评价试验产品HER-2测定试剂盒(化学发光免疫分析法,深圳市新产业生物医学工程股份有限公司)与参比产品HER-2/neu蛋白测定试剂盒(化学发光法,西门子)的临床使用的等效性。方法使用两种试剂对临床收集的样本进行平行盲法检测。试验结束后对参比产品和试验产品的测定结果进行离群值检验、回归分析、Bland-Altman一致性分析、医学决定水平处的预期偏倚分析以及定性结果的一致性分析。结果共测定 360例临床样本,均为女性样本。对纳入定量分析的355例样本测定结果进行方法间离群值检验,无离群值。线性回归方程: Y =0.9758 X +0.1668, R 2 = 0.9910 。试验产品与参比产品差值百分比的95%一致性界限(LoA)为(-21.80%,18.87%);其中98.87%(351/355)的点在95%一致性界限内。两种方法在医学决定水平15 ng/mL处的预期偏倚百分比为-1.31%,满足评价标准。试验产品与参比产品阳性符合率为98.76%,阴性符合率为98.49%,总符合率为98.61%。其中有5例标本两种方法检测定性结果不一致,但均为非恶性组且结果在参考值附近。定性结果经Kappa一致性检验,κ值=0.9719。结论试验产品HER-2测定试剂盒与参比产品HER-2/neu蛋白测定试剂盒临床应用中具有等效性,即临床应用上的有效性和安全性。     

has-miR-203真核表达载体的构建及对K562细胞增殖与凋亡的影响

目的构建hsa-miR-203(人微小非编码RNA-203)的真核表达载体,观察其对人慢性粒细胞白血病细胞株(K562)增殖和凋亡的作用。方法构建hsa-miR-203靶向基因的真核表达载体PmiR-203,用脂质体转染法将PmiR-203转染K562细胞;可溶性噻唑盐-8(WST-8)法检测转染后的K562细胞增殖的情况,流式细胞术检测转染后K562细胞的早期凋亡率,实时荧光定量RT-PCR检测bcr/abl mRNA的表达水平,比色法测定caspase-3、caspase-9的活性。结果本法成功构建了重组真核表达载体PmiR-203,流式细胞术结果表明,K562细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达率52.6%。PmiR-203转染K562细胞48 h后,能明显抑制K562细胞的增殖,并促进细胞的早期凋亡。实时荧光定量RT-PCR结果表明,不同浓度的PmiR-203能显著下调bcr/ablmRNA的表达水平,转染后K562细胞的caspase-3、caspase-9的活性明显增强。结论成功构建了hsa-miR-203的真核表达载体PmiR-203,后者主要通过下调bcr/abl融合基因的表达抑制K562细胞的增殖,并通过活化caspase-3、caspase-9促进K562细胞的早期凋亡。     

利用新鲜全血标本制作糖化血红蛋白室内质控物的初步应用

目的探讨利用新鲜全血标本制备的溶血液作为糖化血红蛋白（HbAlc）室内质控物使用的可行性。方法选择2份新鲜EDTA—K,抗凝全血标本,其中1份HbAlc浓度为正常值（N）、1份为高值（H）。按SOP制备溶血液,经赋值后分装,置-20℃冻存;与Roche商品化HhAlc室内质控物同时使用,对其质控效果和稳定性进行评估。结果自制HbAlc室内质控物与Roche商品化质控物具有相似的质控效果,质控图走势基本一致,且所有质控点的离散程度基本接近;-20％冻存至少稳定3个月。结论利用新鲜全血标本制备的溶血液可作为免疫比浊法测定l-IbAlc的室内质控物使用。