重组人肝再生增强因子对大鼠肝部分切除后肝再生的影响

目的观察原核表达的重组人肝再生增强因子（rhALR）对大鼠肝再生的影响。方法按Higgins方法进行大鼠34％肝切除。术后4-6h各实验组大鼠经腹腔注射rhALR剂量分别为50μg、100μg、200μg、400μg、800μg,对照组给生理盐水。术后30h杀鼠取肝,增殖核抗原（PCNA）免疫组化染色和HE染色,进行肝细胞核PCNA阳性细胞计数和有丝分裂计数。结果rhALR能促进肝部分切除后大鼠肝细胞的有丝分裂和细胞核PCNA的表达,并呈现一定的剂量依赖关系。结论rhALR能促进在鼠肝再生和肝细胞增殖。     

自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化临床观察

目的 观察白体骨髓干细胞移植治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化患者的临床疗效及安全性.方法 67例失代偿期乙型肝炎肝硬化患者被分为自体骨髓干细胞移植组33例和基础治疗对照组34例.对照组采用常规口服核苷类似物抗病毒和对症支持治疗,细胞移植组在基础治疗的同时无菌抽取白体骨髓65～95ml,分离纯化自体骨髓单个核细胞,培养、扩增至3.0×106～5.0×106个,然后经肝动脉导管注入肝脏.分别在治疗前,治疗后4周、12周和24周观察疗效.结果 在治疗后第4周,治疗组和对照组ALT分别为49.8±31.3U/L和64.4±39.7U/L(P＜0.05),PTA为38.48％±7.2％和37.48％±6.9％(P＞0.05),CHE为2025±127U/L和2012±321U/L(P＞0.05);在治疗后第12周,治疗组和对照组ALT分别为41.8±17.9U/L和43.6±21.8U/L(P＞0.05),TBIL为23.2±9.5μmol/L和27.5±13.2μmol/L(P＜0.05),ALB为27.3±6.7g/L和26.8±6.8g/L,PTA为44.3％±9.4％和37.5％±6.9％ (P＜0.05),CHE为3018±243U/L和2098±431U/L(P＜0.05);在治疗后第24周,治疗组和对照组ALT分别为32.2±12.1U/L和35.6±18.2U/L,TBIL为20.9±8.8μmol/L和24.9±10.7μmol/L(P＜0.05),ALB为29.2±6.3g/L和28.9±7.5g/L,PTA为48.2％±6.7％和46.2％±7.8％,CHE为5012±213U/L和4089±278U/L(P＜0.05);在治疗4周时,治疗组患者Child-Pugh计分和MELD评分分别为9.8±2.3和28.8±10.3,显著低于对照组(10.3±3.4和29.8±10.3,P＜0.05);在治疗12周,治疗组患者Child-Pugh计分和MELD评分分别为8.8±3.5和25.6±10.0,显著低于对照组(9.0±4.5和27.5±13.2,P＜0.05);在治疗24周,治疗组患者Child-Pugh计分和MELD评分分别为7.9±4.5和24.0±8.9,显著低于对照组(8.2±3.6和27.0±10.7,P＜0.05).结论 在综合治疗的基础上联合白体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化,能更有效地改善肝功能,手术相对安全,风险较低.     

HBV(ayw)转基因小鼠HBV复制中间体的检测

目的建立稳定、高灵敏度化学发光Southern blotting检测系统,检测HBV(ayw)转基因小鼠肝脏及其他组织的HBV复制水平。方法采用地高辛标记HBV探针,利用pTHBV1047质粒检测杂交系统的灵敏度及重复性;提取第27代HBV(ayw)转基因小鼠肝、肾、脾和肌肉组织总DNA,经HindⅢ酶切后电泳、转膜,利用高灵敏度化学发光杂交Southern blotting检测各组织中HBV复制中间体的水平。结果地高辛标记的化学发光检测系统灵敏度达0.1pg,且杂交系统稳定可靠。HBV(ayw)转基因小鼠基因组DNA中检测到整合的外源HBV DNA,但低于HepG2.2.15细胞的HBV复制水平。肝、肾、脾和肌肉组织中都有HBV复制中间体存在,以肝组织中含量最高。结论第27代HBV(ayw)转基因小鼠染色体含有稳定的HBV基因整合,为复制型HBV转基因小鼠。     

干扰素及肿瘤坏死因子对瘢痕成纤维细胞影响的实验研究

目的　观察干扰素 (INF r)及肿瘤坏死因子 (TNF α)对体外培养瘢痕成纤维细胞的影响 ,探讨其作用机制。方法　将瘢痕组织来源的成纤维细胞经培养后通过不同浓度的INF r及TNF α处理 ,一定时间后测定成纤维细胞抑制率及细胞内DNA含量。结果　一定浓度的INF r和TNF α可以抑制瘢痕成纤维细胞的分化和增长 ,并呈剂量依赖关系 ,且可使其细胞内DNA含量明显减少。结论　INF r和TNF α可在细胞水平上抑制瘢痕成纤维细胞的增殖和DNA合成。     

血HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1 等位基因多态性与肝细胞癌发生关联研究*

目的 探讨中国广东汉族人血HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1等位基因与HBV感染罹患肝细胞癌（HCC）的关联性。方法 采用聚合酶链反应-直接测序分型法检测广东地区56例HCC患者和97例健康志愿者血HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1基因型。结果 HCC患者血HLA- A*02:03和A*02:07等位基因频率明显高于健康人（0.116071对0.046392和0.178571对0.061856,x²=5.167、x²=10.33,P=0.023、P=0.001）;HCC患者血HLA-B*46:01等位基因频率为0.205357,明显高于健康人的0.108247（x²=5.439,P=0.02）;HCC患者血HLA- DRB1*14:54 和 DRB1*12:02等位基因频率明显高于健康人（0.089286对0和0.142857对0.06701,x²=14.502、x²=4.761,P=0.000、P=0.026）;HCC患者血HLA-DQB1*05:03等位基因频率为0.098214,明显高于健康人的0.036082（x²=4.951,P=0.026）;HCC患者血HLA-A*30:01等位基因频率为0.017857,明显低于健康人的0.082474（x²=5.355,P=0.021）;HCC患者血HLA-B*13:02等位基因频率为0.008929,明显低于健康人的0.07732（x²=6.702,P=0.01）。结论 在中国广东地区人群中,HLA-A*02:03、A*02:07、HLA-B*46:01、HLA-DRB1*14:54、DRB1*12:02、HLA-DQB1*05:03与感染HBV的HCC发病有关,而与HLA-A*30:01和HLA-B*13:02可能无关。