HPLC测定鲜肿节风挥发油中b-榄香烯的含量

目的建立鲜肿节风挥发油中β-榄香烯的TLC鉴别方法和HPLC含量测定方法。方法TLC鉴别采用硅胶G薄层板,以正己烷为展开剂;HPLC含量测定采用Waters 5C18-AR-Ⅱ（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱,甲醇-乙腈-水为流动相,流速1mL·min^-1,检测波长210nm,柱温30℃。结果供试品薄层色谱在与β-榄香烯色谱相应的位置上,显相同的紫红色斑点。β-榄香烯在0.2215～2.2148μg呈良好的线性关系（r=0.9999）,精密度试验的RSD为1.89%,方法平均回收率为98.49%,其RSD为1.02%（n=6）。结论该方法为评价鲜肿节风挥发油的质量提供了可靠保证。     

铁皮石斛超微粉对LPS致肠黏膜损伤小鼠的保护作用研究

探究铁皮石斛Dendrobiumofficinale对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肠黏膜损伤的预防作用.采用40只SPF级8周龄C57BL/6J雄性小鼠,随机分为正常组(NC组)、模型组(LPS组)、铁皮石斛超微粉不同剂量组(DOF-L组和DOF-H组,剂量分别为0.30,0.60 g·k...     

石斛在糖尿病等代谢性疾病中的作用及机制研究进展

石斛是历代中医治疗"消渴证"的要药。近年来,随着代谢相关疾病的高发,其在防治糖尿病、高血压等相关代谢性疾病中的作用逐渐被挖掘,也越来越受到关注。综述不同石斛对糖尿病、高血压、高脂血症等相关代谢性疾病的作用及其共同作用机制,并从传统功效入手,总结提出石斛"益胃生津、滋阴清热"治疗"脾瘅——中满内热"是其改善糖尿病等相关代谢性疾病的关键,为石斛在防治糖尿病等相关代谢性疾病研究及临床应用中提供参考。     

超长腓肠神经营养血管蒂逆行岛状皮瓣移位修复足底、跟部软组织皮肤缺损的护理

足底具有负重、行走及吸收震荡的功能.因此,足底软组织皮肤缺损的修复需要的最佳皮瓣要具有耐磨、具有保护性感觉功能、防止足底皮肤负重后形成压力性溃疡[1]、修复后跟部不臃肿、可穿合适的鞋袜等特点.     

长期高糖高脂饮食对大鼠血压及肝肾功能的影响

目的:结合高血压与长期高糖高脂饮食的密切联系,采用动物长期高糖高脂饲料喂养,以期得到接近人类病症的生活性高血压动物模型。方法:采用SD大鼠长期高糖高脂饲料(普通饲料、蔗糖、猪油、胆固醇、胆盐按一定比例配比制成)喂养,每天正常饮水,连续30周,建立生活性高血压大鼠模型。于造模0、6、15、21、30周分别采用无创尾动脉法测定大鼠收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MBP);于8、10、12、18、20、24周取血,测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿酸(UA)、肌酐(Cr)水平;于7、9、11、16、19、22周进行尿代谢,收集4h尿液,测尿Cr、UA水平。结果:大鼠高糖高脂饲料喂养6周则血压开始明显升高,15周收缩压达到160mmHg;大鼠高糖高脂饲料喂养12周血清ALT、AST、GGT、ALP、TP、ALB、UA、Cr水平升高(P<0.01～0.05),9周时尿液UA水平降低(P<0.01～0.05),16周时尿液Cr水平降低(P<0.01～0.05),提示肝肾功能生化指标出现紊乱;大鼠高糖高脂饲料喂养10周血清中TC、TG含量升高,提示血脂生化指标出现紊乱。结论:采用长期高糖高脂饲料喂养造模法,连续造模15周以上能使SD大鼠的血压升高到一定程度,达到轻、中度高血压水平,同时还能造成肝肾损伤以及血脂异常等伴随症状。     

瘦素对新生期大鼠惊厥性脑损伤的康复作用及对皮质Drd2/cPLA2表达的影响

目的 探讨瘦素对新生期大鼠惊厥性脑损伤的神经康复作用及对脑皮质多巴胺受体D2（Drd2）和胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)表达的影响。 方法 采用随机数字表法将5日龄SD大鼠分为对照组、瘦素对照组、惊厥组及瘦素干预组。惊厥组和瘦素干预组大鼠于实验第6天给予氯化锂（212mg/kg体重）腹腔注射,24h后给予匹鲁卡品（320mg/kg体重）腹腔注射,在匹鲁卡品注射前30min给予氢溴酸东莨菪碱（1mg/kg体重）腹腔注射以拮抗其副作用。从实验第8天开始,瘦素对照组及瘦素干预组大鼠每日给予瘦素（4mg/kg体重）腹腔注射,连续注射7d。于实验进行23d时检测各组大鼠平面翻正、负向趋地反射情况,于实验进行30d时采用旷场实验评定各组大鼠认知情绪改变。于实验进行34d时取各组大鼠脑组织,采用实时PCR技术检测脑皮质中Drd2及cPLA2表达。 结果 4组大鼠平面翻正时间及负向趋地时间组间差异具有统计学意义（P<0.05）;与对照组及瘦素对照组比较,惊厥组和瘦素干预组平面翻正时间及负向趋地时间均明显延长（P<0.05）;与惊厥组比较,瘦素干预组平面翻正时间及负向趋地时间均明显缩短（P<0.05）。各组大鼠旷场实验开场得分组间差异具有统计学意义（P<0.05）,与对照组和瘦素对照组比较,惊厥组和瘦素干预组开场得分明显降低（P<0.05）;与惊厥组比较,瘦素干预组开场得分明显升高（P<0.05）。瘦素对照组、惊厥组和瘦素干预组Drd2表达均明显高于对照组（P<0.05）;惊厥组和瘦素干预组Drd2表达较瘦素对照组显著增加（P<0.05）。瘦素对照组及惊厥组cPLA2表达均明显高于对照组（P<0.05）;瘦素干预组cPLA2表达较惊厥组和瘦素对照组明显降低（P<0.05）。 结论 瘦素对新生期大鼠惊厥所致神经行为损伤具有神经康复作用,其作用机制可能与调节大脑皮质Drd2介导的cPLA2表达有关。     

探讨保元汤加减方通过AMPK/SIRT1/PGC－1α通路对小鼠的抗疲劳作用

目的探讨保元汤加减方(人参、黄芪、甘草、肉桂、红景天)缓解疲劳的作用及机制。方法用HPLC检测保元汤加减方主要成分及含量。将160只SPF级ICR雄性小鼠分为4部分(各40只),每部分均完全随机分为空白对照组(等体积纯化水)及保元汤加减方低、中、高剂量(1.9、2.1、2.3g/kg)组,各组每日灌胃1次,共30d。末次灌胃后取材并处死。(1)40只小鼠分别于第21天检测行为学指标(抓力、背温、自主活动次数、转棒疲劳时间),第30天检测负重游泳时间。(2)40只小鼠用于检测肝/肌糖原水平。(3)40只用于检测血乳酸(BLA)含量及计算血乳酸曲线下面积。(4)40只小鼠用于检测机体代谢产物[血清尿素氮(BUN)、乳酸脱氢酶(LDH)、BLA]水平,氧化应激相关酶[骨骼肌及心脏中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)]活性,血液运氧能力[全血红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、平均血红蛋白浓度(MCHC)],三磷酸腺苷(ATP)相关酶[骨骼肌及心脏中Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶、琥珀酸脱氢酶(SDH)及血清中肌酸激酶(CK)]活性,腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)通路相关蛋白表达。结果保元汤加减方中人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、红景天苷、毛蕊异黄酮含量分别为8.15、3.82、1.07、0.41、0.067g/L。各剂量保元汤加减方可增加心脏与骨骼肌中Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶、SDH、CAT、SOD活性(均P<0.05);降低小鼠心脏与骨骼肌中MDA水平(均P<0.05);降低小鼠血清中CK、LDH水平(均P<0.05);增加肝糖原、肌糖原储备量(均P<0.05);降低小鼠血清BUN水平与BLA曲线下面积(均P<0.05);增加全血RBC、HGB与MCHC(均P<0.05);增加小鼠骨骼肌和心脏p-AMPK、SIRT1、PGC-1α、TFAM蛋白表达(均P<0.05)。结论保元汤加减方可能通过激活骨骼肌、心脏中AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路,增强线粒体能力,减少机体代谢产物的积累,抑制机体氧化应激与增加血液运氧能力,达到抗疲劳的作用。     

黄精改善中年房劳肾精亏虚大鼠免疫功能紊乱的作用研究

[目的] 研究黄精对中年房劳肾精亏虚模型大鼠免疫功能紊乱的调节作用。[方法] 采用“中年雄鼠+雌雄同笼”方法制备中年房劳肾精亏虚大鼠模型,模拟中年男性因房劳致肾精亏虚引起的免疫功能紊乱状态。实验期间测定大鼠脾脏系数;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察脾组织形态学变化;测定骨髓中性粒细胞和淋巴细胞占比,外周血淋巴细胞数量及其占比和中性粒细胞占比;脾淋巴细胞增殖试验检测脾脏淋巴细胞增殖能力;流式细胞术测定脾组织T淋巴细胞亚群占比;原位末端转移酶标记(terminal-deoxynucleoitidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)检测脾组织细胞凋亡情况;免疫印迹检测脾组织与增殖相关蛋白磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(phospho-phosphatidylinositol 3-kinase,p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phospho-ptotein kinase B,p-AKT)和与凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bcl-2 associated X,Bax)蛋白表达。[结果] 黄精可降低中年房劳肾精亏虚模型大鼠骨髓和外周血中性粒细胞占比,升高骨髓淋巴细胞占比,升高外周血淋巴细胞数量及其占比,降低脾组织T淋巴细胞(CD4+/CD8+)比值,提高脾组织T淋巴细胞增殖能力,减少脾组织内的细胞凋亡,升高脾组织中与增殖相关蛋白p-PI3K和p-AKT的表达。[结论] 黄精通过影响T淋巴细胞及其亚群占比,改善中年大鼠因肾精亏虚引起的免疫功能紊乱,其机制可能与调控脾组织与增殖相关蛋白PI3K/AKT的表达有关。     

基于肠道菌群-LPS/TLR4通路探讨野菊花提取物对“过食膏粱厚味”致高尿酸血症大鼠的作用

[目的] 研究野菊花提取物(Chrysanthemi Indici Flos extract,CYM.E)对“过食膏粱厚味”致高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)大鼠的治疗作用及机制。[方法] 将64只大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,别嘌醇10 mg·kg-1组,苯溴马隆5 mg·kg-1组,CYM.E 15、30、60、90 mg·kg-1组,每组8只。除正常对照组外,其余各组均灌胃脂肪乳剂,建立拟人“过食膏粱厚味”致HUA大鼠模型。实验期间测定血清尿酸(uric acid,UA)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-c)和低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-c)水平;酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法测定血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和血浆脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)法测定小肠中TNF-α、Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)的mRNA表达;免疫印迹法检测小肠中TLR4蛋白表达;应用16S rDNA 测序技术,对肠道菌群进行操作分类单元(operational taxonomic units,OTU)分类,选择合适的OTU进行结构分析、LEfSe差异贡献分析等。[结果] CYM.E能显著降低模型大鼠血清UA、TC、LDL-c、IL-6和TNF-α水平;显著降低血浆LPS水平;同时显著下调小肠组织TNF-α mRNA、TLR4 mRNA表达和TLR4蛋白表达,改善肠道的微炎症状态;增加乳酸杆菌、双歧杆菌的丰度与种类,降低拟杆菌、大肠杆菌的丰度与种类。[结论] CYM.E具有降低血清UA水平、调节血脂、减低炎症损伤、减少LPS释放等作用,可能通过调节肠道微生态发挥作用。     

野菊花有效部位对两种高尿酸血症动物的作用研究及安全性评价

[目的] 探讨野菊花有效部位(effective parts of wild chrysanthemum,CYM.E)对氧嗪酸钾复合次黄嘌呤致高尿酸血症模型小鼠和高嘌呤饮食致高尿酸血症模型大鼠的作用,并对CYM.E的安全性进行评价。[方法] (1)药物安全性实验:将小鼠分为对照组,别嘌醇组(15 mg/kg),苯溴马隆组(7.5 mg/kg),CYM.E低、中、高剂量组(30、60、90 mg/kg),灌胃给药2周,评价CYM.E给药的安全性。(2)氧嗪酸钾复合次黄嘌呤致高尿酸血症小鼠实验:将小鼠分为对照组,模型组,别嘌醇组(15 mg/kg),苯溴马隆组(7.5 mg/kg),CYM.E低、中、高剂量组(30、60、90 mg/kg),灌胃给药1周,检测各组小鼠血清中尿酸(uric acid,UA)、肌酐(creatinine,CR)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平。(3)高嘌呤饮食致高尿酸血症大鼠实验:将大鼠分为对照组,模型组,别嘌醇组(10 mg/kg),苯溴马隆组(5 mg/kg),CYM.E低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg),灌胃给药5周,检测各组大鼠血清中UA、CR、BUN、ALT和AST水平。[结果] 药物安全性实验证实,CYM.E不影响正常小鼠血清中UA与肝肾功能指标水平。氧嗪酸钾复合次黄嘌呤致高尿酸血症小鼠实验提示,CYM.E中、高剂量能够显著降低高尿酸血症小鼠血清UA水平(P<0.05,P<0.01)。高嘌呤饮食致高尿酸血症大鼠实验发现,给药3周后,高剂量CYM.E能够显著降低大鼠血清UA水平(P<0.01);给药5周后,中、高剂量CYM.E能够显著降低大鼠血清UA水平(P<0.05,P<0.01),高剂量能够显著降低大鼠血清CR、BUN水平(P<0.01,P<0.05),中剂量能够显著降低大鼠血清AST水平(P<0.05)。[结论] CYM.E不影响正常小鼠的UA水平,未见相关肝肾损伤,达到一定剂量后,对两种高尿酸血症动物模型均能够较好地降低UA水平,且具有一定的肝肾功能保护作用。