藏羚羊大脑皮质cDNA文库的构建

目的:构建藏羚羊大脑皮质组织的cDNA文库并鉴定文库质量。方法:提取藏羚羊大脑皮质组织总RNA,经oli-gotex试剂盒纯化得到mRNA。利用SMART技术,使用含有SfiIB酶切位点的oligo(dT)引物和含有SfiIA酶切位点的SMARTIV寡核苷酸在PowerScript逆转录酶作用下运用mRNA5′末端的模板转换方法合成cDNA第1链。利用LDPCR扩增cDNA,经SfiI(ⅠA和ⅠB)酶切后,通过CHROMASPIN-400柱进行分级分离去除<500bp的片段,再同经SfiI酶切的λTripIEx2载体连接,体外包装后转染到大肠杆菌XL1-Blue宿主菌中,进行文库滴度和重组率的测定,然后扩增文库并随机挑取10个噬菌斑行PCR反应鉴定插入片段大小。结果:构建的cDNA文库滴度为1.8×109pfu/L,重组率>98%,文库扩增后滴度达8×1012pfu/L,插入片段长度在750～6000bp之间,平均长度为4250bp。结论:文库具有良好的质量,为进一步筛选、克隆藏羚羊大脑皮质组织特异表达基因奠定了基础。     

去甲肾上腺素对大鼠腹腔巨噬细胞内IP_3、［Ca~（2＋）］_i和Ia抗原表达

本文应用细胞膜放射标记和离子交换层析法测定巨噬细胞（ＭФ）内肌醇－１，４，５－三磷酸（ＩＰ３）、用Ｃａ￣（２＋）指示剂的分光光谱法测定ＭФ内Ｃａ￣（２＋）浓度（［Ｃａ￣（２＋）］）、用ＡＰＡＡＰ桥联酶标法检测ＭФ表面Ｉａ抗原的表达，研究去甲肾上腺素（ＮＥ）对大鼠腹腔的ＭФ内ＩＰ３、［Ｃａ￣（２＋）］ｉ和ＭФ表面ｌａ抗原表达的影响。结果显示ＮＥ（１０￣（－８）ｍｏｌ／Ｌ）可显著增高ＭФ中ＩＰ＿３含量（４４２±２２ｃｐｍ／１０￣６ｃｅｌｌｓ，对照组１０２±８ｃｐｍ／１０￣６ｃｅｌｌｓ，Ｐ＜０．０１）；ＮＥ可使ＭФ内［Ｃａ￣（２＋）］ｉ显著增高（３２２±７８ｎｍｏｌ／Ｌ，对照组９７±１７ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１）；ＮＥ可显著增高ＭФ表面Ｉ－Ａ、Ｉ－Ｅ抗原的表达（６４±８％、５８±６％，对照组５０±３％，４４±４％，Ｐ＜０．０１）。提示神经递质ＮＥ促进ＭФ表面Ｉａ抗原表达的作用可能是通过第二信使ＩＰ＿３和Ｃａ￣（２＋）介导的。     

疏肝和胃方水提醇沉法的急性毒性试验及部分药效学研究

目的：探索疏肝和胃方水提醇沉法的安全性并验证其疗效,为疏肝和胃方新药的推广提供实验依据。方法：1)急性毒性试验。将昆明小鼠分为药物高、中高、中、低剂量组及对照组,每组各10只,雌雄各半。灌胃剂量根据昆明小鼠10倍生药量计算,并按85%等比递减,按照4 ml/10 g体质量,1 d内灌胃2次,连续14 d。观察14 d内实验小鼠的一般情况、体质量变化、内脏湿重与内脏病理改变。2)药效学研究。将SD大鼠分为假手术组(0.9%氯化钠注射液1.5 ml)、模型组、中药组(中药混悬液1.5 ml)、西药组(奥美拉唑水溶液1.5 ml),每组各10只。对除假手术组外的其余组大鼠制备酸反流模型后给药,每天2次,连续14 d。观察各给药组大鼠食管病理改变及食管下段组织白细胞介素-1β(IL-1β) mRNA、白细胞介素-6(IL-6) mRNA表达情况。结果：急性毒性试验结果显示,各组小鼠精神状态良好,组间体质量差异无统计学意义(P>0.05),组间内脏湿重无明显改变、内脏无明显病理改变。药效学研究结果显示,中药组大鼠食管下段组织黏膜上皮基底层更为平坦,棘细胞减少,无黏膜糜烂与溃疡。各给药组大鼠...     

糖通饮经miRNA-21/TGF-β1/Smad信号转导对糖尿病肾病大鼠肾脏功能的保护作用

目的 基于miRNA-21/TGF-β₁/Smad信号转导探讨糖通饮(黄芪、生地黄、山药、山萸肉等)对糖尿病肾病(DN)大鼠的肾脏保护作用及机制。方法 将大鼠随机分为正常组、模型组、厄贝沙坦组(13.5 mg·kg^-1)及糖通饮低、中、高剂量组(6.21、12.42、24.84 g·kg^-1),每组10只。采用高脂高糖饲料喂养结合腹腔注射链脲佐菌素制备DN大鼠模型。模型复制成功后开始灌胃给药,每日1次,连续8周。采用考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白;全自动生化分析仪检测血清空腹血糖、血尿素氮、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯水平;HE及PAS染色法观察肾组织病理改变;RT-PCR法检测肾组织miRNA-21、转化生长因子(TGF)-β1、Smad2、Smad3、Col-ⅢmRNA表达水平;Western Blot法检测肾组织TGF-β₁、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、Col-Ⅲ蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组的空腹血糖、24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯...     

某区三所医院托管成效比较研究

目的科学、客观、量化评价医院托管建设效果,为卫生管理机关提供参考。方法采用综合评价指标体系,对3所被托管医院托管效果进行量化评估。结果5年来,A医院平均得分82.28分,且平稳上升;B医院平均得分80.53分,但发展有波动;C医院平均得分78.03分,发展较为平稳。结论在评估工作中引入第三方评价机制,制定科学合理公正的评价指标体系,是提升医院托管效能的有效途径。     

传统腹股沟斜疝修补术与疝环充填式无张力疝修补术临床对比研究

目的探讨传统斜疝修补术与疝环充填式无张力疝修补术治疗腹股沟斜疝的临床疗效比较.方法选择腹股沟斜疝病人100例,随机分为Ⅰ,Ⅱ两组,每组50例,Ⅰ组施行疝环充填式无张力疝修补术,所用疝环充填物和成形补片由单纤维编织的聚丙烯网(Marlex)制成,Ⅱ组行传统修补术.结果Ⅰ组病人手术时间短,术后疼痛轻,不需用抗生素,恢复快,并发症少,并且不增加费用.结论疝环充填式无张力疝修补术完全可以替代传统腹股沟斜疝修补术,且对不能耐受手术者尤为适宜.     

Establishment of in vitro cellular model predicting histocompatibity in allograft

Histocompatibility is crucial in effecting survivalof allografts.Due to differences in histocompatibilitybetween donor and recipient,rejection would happento some extent after transplantation. Therefore,theevaluation of differences in histocompatibility betweendonor and recipient would be contributive to selectionof donor and judgement on prognosis oftransplantation. HLA typing and mixed lymphocyticreaction (MLR) are the classical methods to evaluatethe histocompatibility between donor and r…     

肾盂肾下盏夹角对结石清除率的影响

目的：观察肾盂肾下盏夹角及结石大小对结石排净率的影响。方法：选择68例肾下盏结石患者,通过IVU影像,测量夹角与结石直径,并经ESWL治疗,随访2月,观察结石排空情况。结果：68例患者,结石完全排出42例,总的排石排空率为61．7％。结论：提示肾盂肾下盏夹角,结石直径对结石排净率有重要影响。     

1998年～1999年我院抗感染药物利用分析

目的通过分析我院抗感染药物的利用情况,以发现问题,指导临床用药.方法运用DDD分析法,比较各药品的年用药金额、日用药金额、用药频度、序号比(DDDs序号/年用药金额序号),并展开分析.结果我院抗感染药物的用药比例基本合理,但新贵药品使用频度偏大,提示应加强新贵药品的指导用药.结论DDD方法能较清晰、全面地反映医院药品的利用情况,是医院药剂人员指导临床用药的有效方法.     

电针结合有氧运动对自然衰老大鼠骨骼肌IGF-I/Akt通路的作用

目的:探索低频电针结合有氧运动对增龄性骨骼肌萎缩的效应,以及IGF-I/Akt及其下游蛋白质合成相关通路信号蛋白的影响。方法:以自然衰老SD大鼠为研究对象,将6月龄雄性SD大鼠32只,体重400～450 g,饲养至大鼠12月龄,根据体重随机分为4组。对照组(YC,只抓取、固定、放回,不做其他干预),电针组(YA,电针干预),运动组(YE,运动干预),电针+运动组(YEA,电针结合运动干预),自SD大鼠12月龄开始持续干预至18月龄,实验结束时观察各组自然衰老大鼠:骨骼肌湿重/体重比;光学显微镜下比目鱼肌HE染色形态;Real-time qPCR法检测骨骼肌中IGF-I mRNA的表达水平;Western印迹法测定的大鼠腓肠肌中AKT、mTOR、p70S6K和p-p70S6K相关蛋白表达情况。结果:与YC组相比,YA组、YEA组皆明显增加18月龄大鼠腓肠肌湿重/体重比(P0.05);YEA组能明显增加比目鱼肌湿重/体重比,高于YC组和YA组(P0.05)。与YC组相比,各个干预组大鼠的腓肠肌IGF-I mRNA表达水平皆有上升趋势,其中YEA组IGF-I mRNA表达增加更为明显(P=0.051)。与YC组相比,电针组(YA)p-Akt,p-mTOR表达升高(P0.05),电针+运动组(YEA)p-Akt,p-mTOR,p-p70S6K表达也显示出升高趋势(P0.05)。结论:电针结合有氧运动可延缓18月龄自然衰老大鼠增龄性骨骼肌萎缩,其分子机制可能与通过激活IGF-I/Akt通路,促进蛋白合成有关。