丙型肝炎病毒结构基因转基因小鼠模型的建立

目的建立丙型肝炎病毒(HCV)转基因小鼠模型，探讨丙型肝炎发病机制，研究HCV结构蛋白编码基因的功能与致病作用。方法采用长片段聚合酶链反应技术扩增HCV结构基因，构建稳定表达与诱导表达两种真核细胞表达重组体，经体外细胞转染后，将具有表达功能的线性化表达元件采用显微注射法，直接导入1736枚小鼠受精卵，先后移入69只假孕母鼠输卵管。结果妊娠受体25只，产仔105只，成活57只。注射卵成仔率仅3．28％。经聚合酶链反应扩增、测序、酶切及Southern杂交鉴定，获阳性首建鼠26只，注射卵首建鼠成功率仅1．50％。其中稳定表达型10只，诱导表达型16只。经与正常鼠交配，获F1阳性杂合鼠分别38只、20只。一个纯合子品系。结论研究建立了稳定表达与诱导表达两类HCV结构基因转基因小鼠，为进一步研究HCV致病机制，HCV基因功能奠定了基础。     

HCV基因型对慢性丙型肝炎干扰素疗效的影响

目的 探讨HCV基因型对慢性丙型肝炎的干扰素（IFN）治疗效果的影响。方法 采用随机、开放和对照的多中心临床试验设计。208例受试者按1：1随机分到聚乙二醇干扰素α—2a(Peg-IFN）组和IFN-α-2a组。在治疗之前，用Simmonds基因分型法酶切分型，在治疗24周结束和完成24周的随访后检测患者的ALT和HCV RNA，以HCV RNA的阴转率作为主要评价指标，经ITT人群的统计学分析。结果 202例患者确定了HCV基因型，基因1型158例（78.2%），非基因1型44例（21.8%），治疗结束病毒应答率（ETVR）和持续病毒应答率（SVR）基因1型患者分别为53.8%和25.3%，非基因1型患者分别为61.4%和43.2%，SVR两组患者差异有显著性，x^2=5.313,P=0.021。Peg IFN组基因1型和非1型患者的ETVR分别为76.8%和81.0%，SVR分别为35.4%和66.7%，SVR两组患者差异有显著性，x^2=6.735,P=0.01。病毒复发率基因1型和非基因1型患者分别为55.6%和23.5%，差异有显著性，x^2=5.496,P=0.02.IFN-α-2a组，ETVR和SVR基因1型患者分别为29.0%和14.5%，非基因1型患者分别43.5%和21.7%，差异无显著性。病毒复发率基因1型患者为72.7%，非基因1型患者为50.0%，差异无显著性。结论 IFN对基因1型丙型肝炎患者的疗效低于非基因1型，HCV基因型主要影响IFN对慢性丙型肝炎的持续应答，也与药物和IFN的疗程相关。     

上海等地区慢性丙型肝炎患者中HCV基因型的分布

目的：探讨上海等地区丙型肝为患者ＨＣＶ基因型的分布，方法：以一种新的ＨＤＶ基因分型方法－线探针试验（ＩＮＮＯ－ＬｉＰＡ）对来源于上海等地区９６例慢性丙型肝炎患者进行ＨＣＶ基因分型，结果：显示９６例患者中以１ｂ型为主（占７７．６％）其次为２ａ／２ｃ（占８．６２％）并发现１ａ４ａ和４ｅ基因亚型，８２例感染单一型（１ｂ）基他１４例为混合感染，有一例慢性丙型肝炎患者感染５个亚型，对其中３９例病人应用干扰素     

急性固体光气中毒并吸入性肺损伤的救治

固体光气是一种稳定的固体化合物、重要的基础化工原料，已成功地在农药、医药、香料、染料和高分子材料等诸多领域获得应用。目前尚未查到固体光气本身的毒性资料，但固体光气运输和贮存不当，亦可造成急性中毒。本研究报道一起因生产泄漏而导致集体急性固体光气中毒并吸入性肺损伤的成功救治体会。     

丙型肝炎病毒高变区1融合蛋白的表达、纯化及其初步应用

目的　克隆并表达中国不同地区不同基因型的丙型肝炎病毒高变区 1(HCVHVR1)蛋白 ,并用表达纯化产物检测慢性丙型肝炎患者血清中的相应抗体 ,分析其临床意义。方法　根据 31株HCVHVR1序列分析及免疫原性预测结果 ,选择 4株克隆 (1b型 3株 ,2a型 1株 ) ,从 pGEMT E2克隆中扩增得到 4个HVR1片段 ,将其分别克隆到原核表达载体 pQE4 0中 ,表达产物经纯化后用以检测慢性丙型肝炎患者血清中的HVR1抗体。结果　构建的HVR1原核表达载体在大肠埃希菌中成功表达了 4种相对分子质量约为 2 80 0 0的二氢叶酸还原酶 (DHFR) HVR1融合蛋白 ,纯化蛋白的获得率约为 32 0～ 80 0 μg/ 10 0ml培养液。这 4种融合蛋白 (SH1b、BJ1b、SD1b、SD2a)与慢性丙型肝炎患者的血清结合率分别为 72 .8% (5 1/ 70 )、6 0 % (4 2 / 70 )、4 8.6 % (34/ 70 )和 5 8.6 % (4 1/ 70 )。在 2 0例用干扰素治疗的丙型肝炎患者中 ,5 7% (4 / 7)的干扰素治疗无应答者治疗前血清能与之反应 ,而应答者血清中只有 15 .3% (2 / 13)能与之反应。干扰素治疗应答者血清与 4种融合蛋白反应的A值高于治疗无应答者 (P <0 .0 5 )。结论　选择的 4株HCVHVR1片段在大肠埃希菌中获得成功表达 ,所得 4种HVR1融合蛋白能与HCV感染者血清发生较广泛的反应     

心电图检查在危重病急诊中的作用

心电图检查以其无创、快捷简便及重复性好等特点,成为临床诊断及监测的重要方法.尤其急诊心电图检查在危重病急救中尤为重要.     

中医对农药急性中毒病人的预检分诊探讨

农药急性中毒是急诊科常见的一种急性中毒,大都病势凶险．发展迅猛．如不及时抢救．往往危及生命。分诊护士作为病人到急诊科的第一接触者．为患者提供正确的分诊以及采取及时有效的抢救措施．能为病人抢救赢得宝贵的时机。我院急诊科于2002年1月。2006年3月期间共接诊农药急性中毒病人112例．现将预检分诊经验总结如下。     

禽流感病毒H_5N_1对人类的威胁和控制

人类正遭受到高致病性禽流感病毒H5N1流行的巨大威胁,世界卫生组织(WHO)2005年8月发布《应对禽流感大流行的威胁——建议的战略行动》[1],并向所有国家发出详细的行动指南。2005年10月6日在华盛顿召开防控禽流感国际会议达成共识:一是信息要透明,即要迅速和准确地报告疫情;二是要向受疫情影响和可能受到影响的国家提供援助;三是要与WHO紧密合作。禽流感全称是禽流行性感冒病毒感染,是由甲型流感病毒(见图1)引起的常见禽类传染性疾病,世界各地流行的高致病性禽流感病毒外膜血凝素抗原主要为H5和H72种亚型,对禽类具有高度致病性。H5N1亚…