肝细胞凋亡模型的建立

目的　建立体内、外肝细胞凋亡模型 ,为进一步研究药物对肝细胞凋亡的调控作用奠定基础。方法　 (1)采用D GalN +LPS小鼠腹腔注射建立体内肝细胞损伤模型 ;(2 )采用H2 O2 (0 0 5～ 0 4mmol·L-1)与原代大鼠肝细胞共培养建立体外肝细胞损伤模型 ,分别用形态学、DNA电泳和流式细胞术检测等方法。结果　 (1)D GalN(70 0mg·kg-1,ip) +LPS(1μg·kg-1,ip)可明显升高小鼠血中TNF水平和MDA含量 ,使肝线粒体Mn SOD活性降低 ,小鼠肝细胞皱缩变小、核染色质凝聚和DNA片段化 (DNA梯状条带 ) ;(2 )H2 O2(0 1mmol·L-1,1h)可致大鼠肝细胞增殖受抑、肝细胞MDA含量升高 ,肝细胞DNA的AO荧光染色变亮 ,DNA电泳呈片段化 ,流式细胞术肝细胞DNA亚G1峰 (即凋亡峰 )明显升高。结论　采用D GalN +LPS与低浓度H2 O2 可分别建立较理想的体内、外肝细胞凋亡模型     

N－取代苯基邻氨基苯甲酸衍生物的合成及其免疫促进作用的研究

本文选择氯苯扎利二钠（ＣＣＡ）为先导化合物，设计并合成了Ｎ－取代苯基邻氨基苯甲酸衍生物，并经ＩＲ，ＭＳ，元素分析等证实。合成中发现Ｕｌｌｍａｎｎ反应有竞争性的反应产物，初步考察了反应性能；研究了目标化合物的免疫促进作用，发现其中ＳＱ１（１μｍｏｌ／Ｌ）和ＳＱ４（０．０１μｍｏｌ／Ｌ）对ＣｏｎＡ诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖反应均有促进作用；其强度与ＣＣＡ相当；ＳＱ４（１μｍｏｌ／Ｌ）并能促进ＣｏｎＡ诱导小鼠淋巴细胞产生白细胞介素（ＩＬ－２），其作用较ＣＣＡ强（Ｐ＜０．０１），但其ＬＤ５０为１０７．９ｍｇ／ｋｇ（ｉｐ小鼠），明显大于ＣＣＡ，提示ＳＱ４的安全范围较狭。     

rhIL-10对银屑病动物模型的治疗作用及免疫功能的影响

目的　研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对银屑病动物模型的治疗作用以及免疫功能的影响。方法　用小鼠雌激素期阴道上皮模型、鼠尾鳞片表皮模型观察重组人白细胞介素 10的抗银屑病作用 ,并检测ConA诱导T淋巴细胞增殖、LPS诱导B淋巴细胞增殖、NK细胞活性及细胞因子(IFN γ、IL 2、IL 1、TNF α)水平。结果　rhIL 10 (5 ,2 0 ,80μg·kg-1·d-1,sc)对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂有抑制作用 ,促进小鼠尾鳞片颗粒层的形成。对ConA诱导T淋巴细胞增殖反应及IL 2、IFN γ产生有抑制作用 ;对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生IL 1、TNF α具有抑制作用 ;对NK细胞活性有抑制作用 ;对LPS诱导B淋巴细胞增殖有促进作用。结论　rhIL 10可能是通过抑制表皮细胞增殖与促进其分化 ,并参与抗炎与免疫调节过程而发挥治疗银屑病动物的作用     

白芍总甙对大鼠腹腔巨噬细胞产生肿瘤坏死因子的影响

采用Ｌ９２９细胞株细胞毒检测法，观察了白芍总甙（ＴＧＰ）对ＬＰＳ诱导大鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）产主肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的影响。结果表明、亚适量ＬＰＳ（５ｍｇ·Ｌ－１）诱导大鼠腹腔ＭΦ培养上清在６ｈ对Ｌ９２９细胞杀伤百分率最大．ＴＧＰ（２．５ｍｇ·Ｌ－１）能促进ＬＰＳ诱导大鼠腹腔ＭＯ产生ＴＮＦ，但不改变其动力学过程。ＴＧＰ（０．５～２５０ｍｇ·Ｌ－１）对ＬＰＳ诱导ＭΦ产生ＴＮＦ量效曲线呈钟罩形．提示ＴＧＰ对ＭΦ产主ＴＮＦ具有浓度依赖性双向调节作用。不同浓度ＴＧＰ对Ｌ９２９细胞无直接杀伤作用，亦无ｒｈＴＮＦ－α拮抗作用。     

~3H—木犀草素的药代动力学研究

大鼠静脉注射(1185μci/kg)~3H-木犀草素后测定不同时间的血中放射性。采用微型计算机推算其体内各动力学数据,其衰变符合二室模型,α相T_(1/2)α为0.0359小时,β相T_(1/2β)为2.9157小时。     

紫外分光光度法测定血浆和胆汁中湿痛喜康的含量

用紫外分光光度法测定大鼠血浆及胆汁中湿痛喜康的含量,每个生物样品用血浆1.0ml,胆汁0.5ml,以硼酸-磷酸二氢钾缓冲液稀释样品,用0.1N盐酸0.8ml酸化,正庚烷(含1.5％异戊醇)萃取,取有机相4.0ml,加入缓冲液5.0ml反萃取,取水相在λ=360nm测定吸光度值,方法简便,准确性高。