改建型STAT1-CC基因慢病毒载体的构建及其在肺癌A549细胞中的表达

目的:构建携带STAT1基因和突变型STAT1-CC基因的慢病毒表达载体,转染肺癌A549细胞并检测STAT1和STAT1-CC基因在肺癌A549细胞内的表达.方法:采用PCR技术从质粒模板中扩增得到目的基因STAT1和STAT1-CC,将其接入含有CMV启动子和绿色荧光蛋白(EGFP)的慢病毒载体中,构建慢病毒载体表达载体Lenti-STAT1和Lenti-STAT1-CC,双酶切和测序鉴定.分别将重组子Lenti-STAT1、LentiSTAT1-CC和包装质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,感染非小细胞肺癌细胞株A549.荧光显微镜观察A549细胞EGFP表达,Western Blotting验证STAT1在A549细胞株中的表达.结果:酶切及测序结果显示成功构建重组慢病毒表达载体Lenti-STAT1和Lenti-STAT1-CC,将慢病毒颗粒感染A549细胞48 h后,观察到宿主细胞内EGFP表达,Western Blotting证实STAT1蛋白在A549细胞中过表达.结论:本实验成功构建了携带STAT1基因和STAT1-CC基因的慢病毒表达载体,并在A549细胞中过表达STAT1基因.     

球囊扩张术治疗结核性气道狭窄的疗效评价

目的探讨球囊扩张术治疗结核性气道狭窄的价值。方法15例结核性气管和支气管狭窄病人,经临床、肺功能评价后,在透视下经纤维支气管镜进行气道球囊扩张术,每周扩张1次,连续3次,多叶狭窄病例采用分段扩张法,评价气道开放、近期疗效和肺功能改善情况。结果15例病人共扩张50次,平均3．3次,气道开放为90．6％,气道直径在扩张前后有显著性差异(t=6．783 0,P＜0．05),扩张后肺功能有明显的改善(t=5．152 7,P＜0．05);6个月内再狭窄率为18％,4例支气管狭窄合用支架。结论球囊扩张术对以纤维疤痕为主的气道狭窄疗效好,以肉芽增生为主的气道狭窄应多次扩张,必要时并用其他手段。球囊扩张术治疗结核性气道狭窄是气道开放、改善肺功能的较好介入手段。     

吲达帕胺致急性过敏性肺炎一例

吲达帕胺(商品名寿比山，天津力生制药厂)是一种具有钙离子拮抗作用的类噻嗪口服长效利尿降压药，临床应用较为广泛。我科收治了1例吲达帕胺致急性过敏性肺炎，现报告如下。     

TGF-β1调控肺泡上皮细胞PI3K亚基构成变化的研究

目的探讨肺泡上皮细胞（AECs）中PI3K亚基的表达情况和TGF-茁1是否可以调控PI3K亚基的构成变化。方法采用实时定量PCR法检测AECs中PI3K亚基mRNA的表达情况,予5ng/mlTGF-茁1刺激A549细胞0、3、6、12、24和48h不同时间点,实时定量PCR法检测PI3K亚基mRNA的表达变化,Westernblot法检测PIK3CD蛋白表达水平。结果AECs中Ⅰ型PI3K催化亚基以表达PIK3CA、PIK3CB和PIK3CD为主,Ⅰ型PI3K调节亚基以表达PIK3R1、PIK3R2和PIK3R3为主,Ⅱ型PI3K亚基和Ⅲ型PI3K亚基以表达PIK3R4、PIK3C3、PIK3C2A和PIK3C2B为主。TGF-茁1刺激可以调控Ⅰ型PI3K催化亚基中的PIK3CDmRNA和蛋白的表达呈时间依赖性升高。结论AECs中Ⅰ型PI3K亚基、Ⅱ型PI3K亚基和Ⅲ型PI3K亚基均有不同程度表达,TGF-茁1经调控PIK3CD的表达导致Ⅰ型PI3K催化亚基的构成变化。     

基质蛋白CCN1与肺部疾病的研究进展

正富半胱氨酸蛋白61(cysteine-rich angiogenic inducer 61,Cyr61/CCN1)是即刻早期基因(early growth response gene,Egr)编码的富含半胱氨酸的分泌型基质蛋白,属于CCN家族成员之一。CCN家族包括CCN1、结缔组织生长因子、肾母细胞瘤过度表达基因、Wnt诱导分泌蛋白(Wnt-induced secreted protein,     

信息动态

1960年美国科学家Maimon成功研制世界上第一台红宝石激光器,开启了激光治疗的新时代.之后各种激光器相继问世,并逐渐开始应用于医学各个领域.经支气管镜激光治疗呼吸道病变始于20世纪70年代,Laforet等[1]在1976年首先发表了应用CO2激光治疗气道内恶性肿瘤的报道.之后多种激光如氩离子激光、Nd:YAG激光、钬激光等纷纷应用于呼吸系统疾病的治疗.目前临床上主要应用Nd:YAG激光及钬激光治疗呼吸道阻塞性疾病,能迅速缓解呼吸困难症状,改善患者生命质量.     

SCASS对建立医疗安全无惩罚自愿报告机制的借鉴

现行医疗安全管理制度要求对已发生的医疗安全事件进行上报和处理,对潜在的医疗安全隐患和漏洞,没有明确的报告要求。建立院内医疗安全无惩罚自愿报告制度,可事前有效地发现与处理这些隐患和薄弱环节,减低严重医疗事件和医疗事故的发生率,并可为医院的安全管理提供决策支持。我国的医院目前尚无类似制度,我国航空业的SCASS可以作为建立院内医疗安全无惩罚自愿报告机制的借鉴。     

孟鲁司特与甲泼尼龙缓解支气管哮喘炎症机制的对比实验研究

目的 探讨孟鲁司特(MK)和甲泼尼龙(MP)对白三烯代谢的作用机制.方法 选取BN大鼠在第1、8天用OVA致敏,建立哮喘模型并分组:A组致敏鼠+ NS注射;B组致敏鼠+OVA雾化;C组致敏鼠+OVA雾化+雾化前MK胃管注入;D组致敏鼠+ OVA雾化+雾化前MP肌内注射.检测气道反应曲线、肺泡灌洗液(BALF)白细胞总数和分类,ELISA法检测总白三烯量,HE染色观察炎症状况.另取致敏鼠肺组织制成碎片匀浆并分组:无OVA雾化肺碎片+NS(Ⅰ)、或MK(Ⅱ)或MP(Ⅲ)孵化,Ⅳ肺碎片(OVA雾化+NS注射)+OVA+ NS孵化,V肺碎片(OVA雾化+MK灌胃)+OVA+ MK孵化,Ⅵ肺碎片(OVA雾化+ MP注射)+OVA+ MP孵化.ELISA法检测上清白三烯量.结果 A组气道阻力无变化,B～D组气道阻力增高,MP对气道反应抑制强度大于MK(P =0.045).MK或MP干预后,C、D组白细胞计数均降低,程度相似(P =0.064).MK或MP干预后,C、D组白三烯量均降低,MP抑制作用强于MK(P =0.041).C、D两组白细胞计数和白三烯量间有相关性,r为0.735和0.796.CD组支气管黏膜下嗜酸性粒细胞、中性粒细胞浸润情况较AB组减轻.体外孵化分析:Ⅰ组与Ⅱ组总白三烯量差异有意义(P=0.035),Ⅰ组与Ⅲ组差异无意义(P =0.164).同Ⅳ组比较,Ⅴ、Ⅵ组白三烯量均明显下降.结论 MK可直接抑制白三烯合成;MP不能直接抑制,但可通过抑制气道炎性细胞浸润等间接途径减少其分泌.