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陆璐 《中国比较医学杂志》2014,24(4):23-27
目的建立一种定量检测小鼠α-突触核蛋白基因(α-syn)内含子1甲基化水平的方法,分析不同脑区该区域甲基化水平的差异。方法使用MSPPrimer确定小鼠α-syn内含子1的CpG岛区域。使用PyroMark assay design 2.0针对该CpG岛设计焦磷酸扩增及测序引物。采用焦磷酸测序法分析成年小鼠海马、皮质、纹状体及中脑四个脑区该区域甲基化水平。结果小鼠α-syn内含子1存在CpG岛。成功优化定量该CpG岛甲基化水平的焦磷酸测序方法。焦磷酸测序表明各脑区该区域甲基化均低于2%。结论建立了定量检测小鼠α-syn基因内含子1CpG岛甲基化水平的方法。该CpG岛甲基化对于成年小鼠各脑区中α-syn的表达不起主要调控作用。 相似文献
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目的 制备靶向铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)III型分泌系统组件蛋白PcrV的scFv-Fc形式的单克隆抗体MFa,并研究其体外对铜绿假单胞菌生物膜形成及细胞黏附和侵入的影响。方法 将编码MFa的DNA序列合成后,插入到真核表达载体中,获得重组质粒,再采用聚乙烯亚胺(PEI)将质粒转染HEK293E细胞并获得瞬时表达;表达的产物通过HiTrap MabSelect SuRe柱进行纯化,所得到的抗体采用SDS-PAGE分析纯度,采用BCA法测定蛋白浓度。为了检测MFa抗体与PcrV抗原的亲和力,对PcrV抗原进行表达纯化,方法是将PcrV目的序列插入到pET28a表达载体中,转化E. coli BL21(DE3)获得宿主菌,在0.5mmol/L IPTG 15℃的条件下诱导过夜,并通过His-Tag标签进行亲和纯化。对于纯化的MFa抗体与PcrV抗原通过Western blot、ELISA、SPR(表面等离子共振)研究抗体与抗原的亲和力,并研究抗体体外对生物膜形成的影响,对铜绿假单胞菌黏附与侵入HeLa细胞的影响。结果 MFa抗体在HEK293瞬转系统成功获得表达与纯化,且对PcrV蛋白具有较好的亲和活性,KD值为492.2nmol/L。功能实验证实,MFa抗体能够降低铜绿假单胞菌生物膜的形成,降低铜绿假单胞菌对HeLa细胞黏附与侵入作用。结论 靶向PcrV的scFv-Fc抗体MFa具有对铜绿假单胞菌引起的感染的潜在效用,具有进一步开发为抗铜绿假单胞菌治疗药物的价值。 相似文献
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雌性小鼠颌上腺NGFmRNA的原位杂交检测 总被引:1,自引:0,他引:1
应用地高辛标记的人β神经生长因子DNA探针原位要交组化技术,研究雌性ICR小鼠颌下腺的神经生长因子基因表达。颌下腺经4%多聚甲醛固定,常规冰冻切片,并以同种雄性小鼠颌下腺作阳性对照。实验结果显示,雌性小鼠颌下腺的NGFmRNA分布与雄性小鼠相同,主要存在于纹状管和颗粒曲管上皮细胞中,但杂交信号明显弱于雄性小鼠; 相似文献
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应用地高辛标记的人β神经生长因子DNA探针原位杂交组化技术,研究雌性ICR小鼠颌下腺的神经生长因子(NGF)基因表达。颌下腺经4%多聚甲醛固定,常规冰冻切片,并以同种雄性小鼠颌下腺作阳性对照。实验结果显示,雌性小鼠颌下腺的NGFmRNA分布与雄性小鼠相同,主要存在于纹状管和颗粒曲管上皮细胞中,但杂交信号明显弱于雄性小鼠;在原位杂交反应阳性的纹状管或颗粒曲管上皮细胞之间常可见到几个阴性细胞,阳性管道的密度亦显著低于雄性小鼠。研究表明,小鼠颌下腺NGF基因的表达受到雄激素的调节,这种调节作用可能发生于转录水平。NGF基因转录少,纹状管或颗粒曲管部分上皮细胞NGF基因不开放以及颗粒曲管不发达是雌性小鼠颌下腺NGF含量明显低于雄性小鼠的主要原因。 相似文献
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McKhann GM Knopman DS Chertkow H Hyman BT Jack CR Jr Kawas CH Klunk WE Koroshetz WJ Manly JJ Mayeux R Mohs RC Morris JC Rossor MN Scheltens P Carrillo MC Thies B Weintraub S Phelps CH 贾建平 陆璐 张逸驰 黄丽 韩阅 《中华神经科杂志》2012,45(5)
由美国国立老化研究所(NIA)和阿尔茨海默病(AD)协会组织了一个工作组,负责修订1984年版AD痴呆的诊断标准.旨在确保修订后的标准具有足够的灵活性,既可供缺乏神经心理学测验、先进的影像技术和脑脊液检查措施的普通医务人员使用,也可供具备上述措施的科研、临床试验的专业研究者使用.新的标准广泛适用于各种原因的痴呆以及专门针对AD痴呆的标准,保留了1984年版标准中的“很可能的AD痴呆”的总体框架.在过去27年的经验基础上,工作组对临床诊断标准做了一些修改,保留了“可能的AD痴呆”的术语,但对其进行了更有针对性的重新定义.在科研用的“很可能的和可能的AD痴呆”的诊断标准中纳入了生物标志物证据.AD痴呆的核心临床标准仍将是临床实践中诊断的基础,但用生物标志物证据来提高AD痴呆诊断的病理生理学特异性也被人们寄予厚望.要实现AD痴呆的生物标志物诊断,还有许多工作摆在面前. 相似文献
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慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)是临床中常见的一种消化系统疾病,属于胃癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC).现代医学研究证实,脑肠肽如胃促生长素、胃泌素、生长抑素和胃动素等,在CAG以及PLGC的发病机制中起重要作用.通过对脑肠肽水平的测定,可以辅助判断CAG的中医证型,评估其疾病进展和治疗效果.基于传统中医理论和脑肠互动学说,探讨中药干预CAG的脑肠肽调节机制,希冀为中医药防治CAG提供客观化的理论依据. 相似文献
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目的:探讨中医综合护理对痛风患者临床疗效、疼痛程度及生活质量的影响。方法:选取2018年1月—2019年5月中山市小榄人民医院内分泌、中医科收治的105例痛风患者为研究对象。根据随机数表法将其分为观察组(n=55)和对照组(n=50)。两组均给予对症治疗,对照组给予常规护理,观察组在对照组基础上给予中医综合护理。比较两组临床疗效及相关指标,护理前及护理后10 d、30 d、60 d血尿酸水平,护理前后疼痛程度、生活质量。结果:观察组总有效率为89.09%,高于对照组的66.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。护理后30 d、60 d,观察组血尿酸水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。护理后,两组视觉模拟评分法(VAS)评分较护理前均明显降低,观察组VAS评分显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组疼痛缓解时间、血尿酸水平恢复正常时间、住院时间显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。护理后,两组心理功能、躯体功能、社会功能及物质生活状态评分较护理前明显提高,观察组心理功能、躯体功能、社会功能及物质生活状态评分均显著高... 相似文献