脓毒症休克猪下腔静脉管径及呼吸变异指数与血流动力学的关系

目的 探讨脓毒症休克时下腔静脉管径及呼吸变异指数与脉搏指示连续心排出量(PiCCO)血流动力学指标的关系.方法 取8只幼年猪,颈内静脉推注大肠杆菌内毒素(LPS,100tμg/kg)制作脓毒症休克模型,出模后予生理盐水进行液体复苏.分别在动物模型制作前、休克时、液体复苏1h及6h时点超声探测下腔静脉最大径(IVCmax)、最小径(IVCmin)并计算呼吸变异指数(IVCrvi),同时记录PiCCO血流动力学指标,包括:胸廓内血容量(ITBV)、全心舒张末容积(GEDV)、每搏输出量变异指数(SVV)和心脏指数(CI).采LSD-t检验比较液体复苏前后IVCmax、IVCmin、IVCrvi及PiCCO血流动力学指标的变化;采用Pearson相关性分析了解IVCmax、IVCmin及IVCrvi与PiCCO血流动力学指标的相关性.结果 液体复苏1 h IVCmax、IVC min、GEDV、ITBV及CI均显著大于休克时(P＜0.01),SVV及IVCrvi均显著小于休克时(P＜0.01);液体复苏6 h IVCmax、IWCmin、GEDV、ITBV及CI均显著大于休克时(P＜0.01)及液体复苏1h(P＜0.01),SVV及IVCrvi均显著小于休克时(P＜0.01)及液体复苏1 h(P＜0.01).IVCmax与SVV有相关性(P =0.024),与GEDV、ITBV及CI无相关性;IVCmin与SVV、GEDV、ITBV及CI均有相关性(分别P=0.009、P=0.003、P=0.001和P=0.015);IVCrvi与SVV、GEDV、ITBV及CI均有相关性(分别P=0.007、P＜0.01、P＜0.01和P＜0.01).结论 下腔静脉管径及呼吸变异指数与PiCC0血流动力学指标具有相关性,可以为临床医师快速评估血容量提供依据.     

兔骨膜细胞分离培养的方法改进

BACKGROUND:Periosteum is considered as a source of seed cells for cell therapy due to its biological features. OBJECTIVE:To seek the optimal way to isolate and culture rabbit periosteal cells and identify their biological features. METHODS: Rabbit periosteum on facies medialis tibiae was taken out under aseptic conditions. Periosteal cells isolated through the digestion of type II collagenase with the explants culture method were cultured in DMEM/F12 complete medium. Cell ultrastructure was observed under an inverted microscope. Periosteal cell proliferation was determined by cell counting kit-8 assay. Cell surface antigens CD90 and CD105 were determined using flow cytometry. Osteogenic and lipogenic induction mediums were applied to induce periosteal cells to differentiate into osteocytes and adipocytes, respectively. After 2 weeks of induction, cells were harvested for alizarin red staining and oil red O staining to assay the calcium nodules and lipid droplet. RESULTS AND CONCLUSION:The digestion of type II collagenase with the explants culture method shortened the period of primary cells culture and enhanced the survival rate, which caused higher purity and stronger reproductive activity of harvested periosteal cells. Primary cultured periosteal cells grew in form of spindle spiral or parallel. Alizarin red and Oil red O staining verified the multi-directional differentiation potentiality of periosteal cells. These findings suggest that the periosteal cells with high purity, strong reproductive activity, and multi-directional differentiation potentiality can be harvested in short time using digestion of type II collagenase with the explants culture method.     

人参皂苷Rg1调控TLR4/NF-κB信号通路抗重症肺炎大鼠心肌组织损伤的机制探讨

目的　探讨人参皂苷Rg1对重症肺炎大鼠心肌组织损伤的影响及其机制。方法　将40只大鼠以气管注入肺炎克雷伯菌液法构建重症肺炎模型后,将其均分为模型组和低、中、高剂量药物组;另取10只未处理大鼠作为对照组。低、中、高剂量药物组大鼠以2.5、5和10 mg/kg人参皂苷Rg1灌胃,模型组和对照组大鼠以等量生理盐水灌胃,每日1次,持续14 d。苏木精-伊红染色法观察大鼠心肌组织病理形态并行积分统计;采用心脏彩超检测大鼠心功能指标,包括左室舒张压（LVDP）、左室舒张末压（LVEDP）、左室最大舒张速率（-dP/dtmax）和左室最大收缩速率（+dP/dtmax）值;酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清中B型钠尿肽（BNP）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）含量;实时荧光定量PCR（qPCR）法检测心肌组织中白细胞介素（IL）-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心肌组织中凋亡相关蛋白活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶3（cleaved caspase-3）和非活性态（procaspase-3）、Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）、核因子-κB（NF-κB）p65和磷酸化（p）-NF-κB p65蛋白表达水平。结果　对照组大鼠心肌组织结构正常,模型组大鼠心肌组织中心肌细胞排列紊乱且肿胀变形,肌纤维部分断裂且伴随有炎性细胞浸润;相对模型组,低、中、高剂量药物组大鼠心肌组织中上述细胞形态变化明显改善。与对照组比较,模型组大鼠心肌组织病理积分,LVEDP水平,BNP、cTnI、CK-MB含量和IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA水平,cleaved caspase-3/procaspase-3和Bax/Bcl-2比值以及TLR4、MyD88、p-NF-κB p65蛋白表达水平均明显升高,而LVDP、-dP/dtmax和+dP/dtmax水平明显降低（P＜0.05）;以人参皂苷Rg1灌胃干预后可呈剂量依赖性逆转建模引起的上述变化（P＜0.05）。结论　人参皂苷Rg1可通过减轻炎症反应和心肌细胞凋亡保护重症肺炎大鼠心肌组织,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路活化有关。     

血糖控制情况对糖尿病周围神经病变(DPN)患者下肢神经减压术疗效的影响

目的 探讨糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)患者的血糖控制情况对周围神经减压手术疗效的影响。方法 2014年12月至2016年6月在复旦大学附属中山医院接受单侧下肢神经减压术的DPN患者共计40例,以HbA1c=8%为标准分为血糖控制尚可组和血糖控制不佳组。在术前1天和术后6个月,测量视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、两点辨别觉(two point discrimination,TPD)和10 g单丝测验,比较两组患者的手术疗效。结果 所有患者术后VAS、TPD和10 g单丝测验结果均较术前均明显改善。血糖控制尚可的患者术后VAS、TPD和10 g单丝测验结果均优于血糖控制不佳的患者。结论 良好的血糖控制对DPN患者下肢神经减压术后疼痛的缓解和肢体感觉的恢复具有积极作用,血糖控制尚可的患者手术疗效明显优于血糖控制不佳的患者。     

以 SvO2为导向的早期目标导向液体治疗对感染性 休克猪血流动力学和氧动力学的影响

目的 评价以混合静脉血氧饱和度（SvO2）为导向的早期目标导向液体治疗（EGDT）对感染性休克猪血流 动力学和氧动力学的影响。方法 雄性巴马小型猪 12 只,采用随机数字表法均分为传统方法（C）组和目标导向（G） 组。采用静脉输注内毒素方法制造感染性休克模型后,C 组休克后维持平均动脉压（MAP）≥65 mmHg,中心静脉压 （CVP）8~12 mmHg,尿量≥0.5 mL/ （kg·h）,G 组除以上指标外,维持 SvO2≥0.65。治疗持续 6 h。分别在内毒素开始输 注 0、60、120、180、240、300、360、420 及 480 min（T0~T8）记录中心体温、血流和氧动力学指标及使用的液体和血管活 性药物使用情况。结果 与 C 组相比,在血流动力学方面 2 组各时点 MAP、心率（HR）、全身血管阻力指数（SVRI）差 异无统计学意义（P＞0.05）,G 组在 T4~T8 时点心输出量指数（CI）和 CVP 升高（P＜0.05）,在 T8 时点平均肺动脉压 （MPAP）和肺血管阻力指数（PVRI）降低（P＜0.05）;在氧动力学方面,G 组在 T3~T8 时点 SvO2升高,氧摄取率（O2ER） 降低（P＜0.05）,在 T4~T8 时点氧供（DO2）升高（P＜0.05）,T5~T8 时点血乳酸（Lac）降低,在 T8 时点动静脉 CO2分压 差［Δp（CO2）］降低（P＜0.05）,2 组动物各时点氧耗（VO2）差异无统计学意义（P＞0.05）。G 组补液量和尿量多,去甲肾上 腺素量较少（P＜0.05）,G 组多巴酚丁胺用量较多,而 C 组均未用。结论 以 SvO2为导向的 EGDT 在感染性休克救治 中可更加有效地稳定血流动力学和氧动力学,表现为心输出量增加、氧供增加、氧摄取率正常、组织灌注较好。     

ABO 血型与卵巢癌患者预后的关系

目的 探讨 ABO 血型及其他相关因素对卵巢癌患者预后的影响。方法 回顾性分析天津医科大学肿瘤 医院 2007 年 12 月—2011 年 7 月采用根治性手术治疗的 153 例卵巢癌患者的临床病理资料和血型分布,其中 A 型 血 45 例（29.4%）、B 型血 43 例（28.1%）、O 型 50 例（32.7%）,AB 型血 15 例（9.8%）。分析不同血型患者临床特征的 差异并对患者进行随访（末次随访时间 2017 年 6 月）。采用 Kaplan-Meier 法绘制生存曲线,Log-rank 法比较不同血 型间总生存率及无病生存率的差异,Cox 回归分析卵巢癌患者预后的影响因素。结果 （1）不同血型的患者年龄、月 经情况、复发和转移、临床分期、CA-125 水平以及辅助治疗等临床特征比较差异均无统计学意义（均 P > 0.05）。（2）O 型和 B 型血患者总生存率和无病生存率明显高于 A 型和 AB 型血患者（Log rank χ2 分别为 9.571、8.213,均 P < 0.05）。Cox 回归分析显示,ABO 血型是卵巢癌患者预后的影响因素,AB 型血的患者预后较差（B 型 vs. AB 型 HR= 0.339,95% CI：0.138~0.830;O 型 vs. AB 型 HR=0.343,95%CI：0.137~0.855）。结论 ABO 血型与卵巢癌患者的生存 状况相关,可用于评价卵巢癌患者的预后。     

补肾养骨汤诱导多发性骨髓瘤细胞株 KM3 的 凋亡及机制探讨

目的 探讨补肾养骨汤对人多发性骨髓瘤细胞株 KM3 细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法 取对数生 长期 KM3 细胞,分别加入 5%、10%、20% 的补肾养骨汤含药血清培养,培养 12、24、48 和 72 h 后,采用 Cell Counting Kit-8（CCK-8）法检测补肾养骨汤对 KM3 细胞增殖的影响;KM3 细胞经过不同浓度含药血清培养 72 h 后,采用流式 细胞术检测补肾养骨汤对 KM3 细胞周期和凋亡作用;RT-qPCR 和 Western blot 检测 B 淋巴细胞瘤-2 基因（Bcl-2）、 Bcl-2 相关蛋白（Bax）和核转录因子（NF）-κB 的表达水平。结果 补肾养骨汤抑制 KM3 细胞株的增殖,诱导 KM3 细胞株呈剂量依赖性凋亡,使 KM3 细胞周期停滞在 G0/G1 期,导致 KM3 细胞株 Bcl-2、NF-κB 表达下调,Bax 表达 上调。结论 补肾养骨汤抑制 KM3 细胞的增殖,影响细胞周期,诱导其凋亡,此作用机制可能与 Bcl-2、Bax 和 NF- κB 表达异常有关。     

miR-301b在调节脂肪细胞分化中的作用

摘要： 目的 研究 miR-301b 在调节间充质干细胞向脂肪细胞分化过程中的作用。方法 对小鼠骨髓基质细胞 ST2 进行脂肪细胞诱导分化, 并利用 qRT-PCR 检测细胞分化过程中成脂分化诱导组相对于阴性对照组的 miR-301b 表达变化。对 ST2 细胞转染 miR-301b mimics 并进行成脂诱导分化, 利用 qRT-PCR 和 Western blot 技术检测 miR- 301b mimics 转染组和阴性对照片段 （NC） 转染组细胞的脂肪特异性基因和蛋白表达水平的变化。结果 成脂分化诱导组 miR-301b 相对表达水平 （0.219±0.021） 较对照组 （1.000±0.425） 减少 （P＜0.05）。miR-301b mimics 转染组的脂肪细胞特异性转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体 （PPARγ）、 CCAAT 增强子结合蛋白 （C/EBPα） 和脂肪型脂肪酸结合蛋白 （aP2） 的相对表达量均较 NC 转染组降低 （P＜0.05）。miR-310b mimics 转染组与 NC 转染组相比, 标志基因aP2、 转录因子PPARγ 和C/EBPα 蛋白的表达量均减少 （P＜0.05）。结论 miR-301b可抑制脂肪细胞分化。     

265 例神经内分泌肿瘤的临床病理特征及预后分析

目的 探讨神经内分泌肿瘤（NETs）的发病特点、临床表现、诊断和治疗方法及预后。方法 回顾性分析 2006 年 1 月—2015 年 8 月天津市人民医院 265 例 NETs 患者的临床资料,包括性别、年龄、入院临床症状、原发部 位、病理诊断、治疗情况和预后随访情况。结果 265 例 NETs 患者中男 160 例,女 105 例,平均发病年龄（55.8±2.7） 岁,发病高峰 55~65 岁。发病部位主要位于结直肠 127 例（47.9%）,肺部 59 例（22.3%）,胃 21 例（7.8%）,阑尾 15 例 （5.7%）,小肠（特别是十二指肠及胰腺）10 例（3.8%）,乳腺 11 例（4.2%）,颈部 10 例（3.8%）,其他部位 12 例（4.5%）。 各个不同部位患者的就诊症状各不相同。结直肠患者主要是排便习惯改变,如腹泻、便秘、便血等。肺原发患者多 表现为咳嗽或痰中带血。胃、阑尾或小肠原发患者多表现为腹痛、腹胀等不适。病理诊断 G1 期 186 例（70.2%）,G2 期 54 例（20.4%）,G3 期 25 例（9.4%）。免疫组化显示突触素（Syn）阳性 228 例（86.4%）,嗜铬粒蛋白 A（CgA）阳性 102 例（38.5%）,CD56 阳性 74 例（27.9%）。232 例患者进行了手术治疗（87.5%）,28 例患者接受了放疗或化疗治疗 （10.6%）,5 例患者未行治疗。198 例患者完成至少 1 次随访,随访率 74.7%,中位随访时间为 38 个月,G1 期随访患 者中无肿瘤相关性死亡;G2 期有 6 例肿瘤相关性死亡;G3 期中有 19 例肿瘤相关性死亡。所有肿瘤相关性死亡患者 中 23 例发生了转移。神经内分泌瘤（G1+G2）的生存率明显高于神经内分泌癌（G3）（Log rank χ2=13.774,P＜0.01）。 结论 NETs 患者男性多于女性,不同部位的患者发病临床表现各不相同,消化道特别是结直肠是高发部位;病理分 期越晚的患者预后越差。