2003～2004年注射用抗菌药应用状况调查

目的：了解我院近两年注射用抗茵药应用状况。方法：统计2003—2004年注射用抗茵药的消耗量、金额，用限定日剂量法分析临床使用情况。结果：按照使用频度（DDDs）排序，阿奇霉素、左氧氟沙星、氟罗沙星是临床最常用的注射用抗菌药，其每日药费均较低；按每日药费排序，头孢孟多酯钠、亚胺培南西司他丁、头孢噻肟钠舒巴坦钠、头孢吡肟和帕尼培南倍他米隆等药日消耗药费较多，其DDDs均较低。结论：我院连续2年注射用抗茵药应用基本稳定、合理。     

汕头地区产CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌分析

目的了解汕头地区产CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌的情况。方法用通用引物blaCTX-M对已确定为产ESBLs的肺炎克雷伯菌进行PCR扩增、脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析，检测其对常见抗菌药物的耐药性。结果本地区CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌检出率为30．1％（25／83），标本来源主要为痰液（24株）；分布的临床科室为新生儿科、呼吸内科、神经外科、神经内科、儿科、外科ICU、心血管内科及普外科。与其它基因型同时存在较普遍。药敏结果表明对头孢噻肟、头孢曲松、头孢吡肟、氨曲南、阿米卡星、环丙沙星的敏感率分别为32．0％、4．0％、56．0％、36．0％、12．0％、48．0％，对头孢他啶、哌拉西林／三唑巴坦耐药率分别达56．0％和44．0％。随机将8株产CTX-M型ESBLs的肺炎克雷伯菌作PFGE分析，结果显示2株为相同的PFGE型，其它为不相关的PFGE型。结论产CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌广泛分布于临床各科室，绝大多数菌株来自不同克隆株；多种基因型ESBLs的存在提高了它对抗生素的耐药水平。加强对产ESBLs细菌的检测及分子流行病学研究，对控制院内感染的流行十分重要。     

多重耐药肺炎克雷伯菌基因型和整合子的分析

目的 了解多重耐药肺炎克雷伯菌的基因型和整合子存在情况.方法 设计TEM、SHV和CTX-M型及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合酶基凶特异性引物,并将聚合酶链反应(PCR)扩增获得β-内酰胺酶编码基因,分别克隆入pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,分析其基因亚型.结果 该多重耐药株与TEM-1、SHV-12及CTX-M-3型编码基因序列的同源性为100%,Ⅰ类整合酶基因检测阳性,Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因检测阴性.结论 Ⅰ类整合子存在产ESBLs肺炎克雷伯菌中.     

多重耐药肺炎克雷伯菌基因型和整合子的分析

目的 了解多重耐药肺炎克雷伯菌的基因型和整合子存在情况.方法 设计TEM、SHV和CTX-M型及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合酶基凶特异性引物,并将聚合酶链反应(PCR)扩增获得β-内酰胺酶编码基因,分别克隆入pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,分析其基因亚型.结果 该多重耐药株与TEM-1、SHV-12及CTX-M-3型编码基因序列的同源性为100%,Ⅰ类整合酶基因检测阳性,Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因检测阴性.结论 Ⅰ类整合子存在产ESBLs肺炎克雷伯菌中.     

多重耐药肺炎克雷伯菌基因型和整合子的分析

目的 了解多重耐药肺炎克雷伯菌的基因型和整合子存在情况.方法 设计TEM、SHV和CTX-M型及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合酶基凶特异性引物,并将聚合酶链反应(PCR)扩增获得β-内酰胺酶编码基因,分别克隆入pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,分析其基因亚型.结果 该多重耐药株与TEM-1、SHV-12及CTX-M-3型编码基因序列的同源性为100%,Ⅰ类整合酶基因检测阳性,Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因检测阴性.结论 Ⅰ类整合子存在产ESBLs肺炎克雷伯菌中.     

β-内酰胺酶抑制剂抑酶效应的研究

我们利用 3种由革兰阴性菌产生的标准ＴＥＭ型β 内酰胺酶 (ＴＥＭ 1、ＴＥＭ 2、ＴＥＭ 5 )研究 3种 β 内酰胺酶抑制剂(头孢噻肟、舒巴坦和克拉维酸 )的抑酶方式 ,目的是对临床合理使用抗菌素、寻找新的耐酶抗生素和新的酶抑制剂提供实验依据。1　材料与方法1.1　药品与试剂　头孢噻啶 (ｃｅｐｈａｌｏｒｉｄｉｎｅ,ＣＥＲ ,Ｓｉｇｍａ) ;头孢噻肟 (ｃｅｆｏｔａｘｉｍｅ ,ＣＴＸ ,北京第三制药厂生产 ) ;舒巴坦(ｓｕｌｂａｃｔａｍ ,Ｓｕｌ,Ｐｆｉｚｅｒ) ;克拉维酸 (ｃｌａｖｕｌａｎｉｃａｃｉｄ ,ＣＬＡ ,中国药品生物制品检定所 )。…     

SHV型β—内酰胺酶的动力学研究

采用分光光度法研究革兰氏阴性菌产生的4种SHV型β－内酰胺酶的动力学。以L－B作图法求取Km和Vmax。除SHV－1对第三代头孢菌素头孢肟没有水解作用外,SHV型β－内酰胺酶对青霉素类、第一代、第二代、第三代头孢菌素均有不同程度水解作用。头孢噻肟对SHV－2、SHV－4、SHV－5有较高的亲和力（低Km),但Vmax均不超过15％,SHV型酶的最适pH值为6．6－7．4;最适反应温度是34－40℃。     

一种测定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a的蛋白印迹技术

目的蛋白印迹技术(Western blot)检测临床MRSA分离株所产的PBP2a蛋白。方法用超声破碎法提取细菌总蛋白,利用PBP2'胶乳凝集试剂盒内的PBP2'抗体胶乳试剂,以Western blot技术检测3株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)分离株所产的特异性青霉素结合蛋白PBP2a(PBP2')的表达情况。结果3株MRSA的总蛋白样品在分子量约80kd的位置可见PBP2a的特异性条带。MRSA-2菌株的PBP2a表达量最大,而MRSA-4的PBP2a表达量最小。质控菌ATCC25923的菌蛋白未见PBP2a条带。结论本实验采用的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a的蛋白印迹测定方法,不但可对MRSA表达的PBP2a蛋白进行定性检测,还可进行半定量检测,因此该方法不但能用于PBP2a蛋白克隆表达的检测,还可测定不同情况下MRSA的PBP2a的表达情况,是一种值得推荐的PBP2a蛋白定性及半定量方法。     

AmpC酶的分类、检测与抑制策略

在细菌耐药机制中,AmpC酶引起的耐药日益增多,其导致的耐药问题已成为临床抗感染治疗成败的关键,因而越来越受到人们的关注。AmpC酶分为诱导型、结构型和质粒型等3种类型,可以由染色体介导,也可以由质粒介导。现介绍它们的研究进展、检测方法、耐药性及防治。     

探索性实验教学的体会与思考

近年来,我院在七年制学生中开展了探索性实验教学,教学过程中学生在实验设计、实验实施、数据分析和论文书写方面还存在不少问题。改进机能学和探索性实验的教学方法,建立合理的考核评价体系,将有助于提高探索性实验课程的教学质量。