2003～2004年注射用抗菌药应用状况调查

目的：了解我院近两年注射用抗茵药应用状况。方法：统计2003—2004年注射用抗茵药的消耗量、金额，用限定日剂量法分析临床使用情况。结果：按照使用频度（DDDs）排序，阿奇霉素、左氧氟沙星、氟罗沙星是临床最常用的注射用抗菌药，其每日药费均较低；按每日药费排序，头孢孟多酯钠、亚胺培南西司他丁、头孢噻肟钠舒巴坦钠、头孢吡肟和帕尼培南倍他米隆等药日消耗药费较多，其DDDs均较低。结论：我院连续2年注射用抗茵药应用基本稳定、合理。     

汕头地区产CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌分析

目的了解汕头地区产CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌的情况。方法用通用引物blaCTX-M对已确定为产ESBLs的肺炎克雷伯菌进行PCR扩增、脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析，检测其对常见抗菌药物的耐药性。结果本地区CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌检出率为30．1％（25／83），标本来源主要为痰液（24株）；分布的临床科室为新生儿科、呼吸内科、神经外科、神经内科、儿科、外科ICU、心血管内科及普外科。与其它基因型同时存在较普遍。药敏结果表明对头孢噻肟、头孢曲松、头孢吡肟、氨曲南、阿米卡星、环丙沙星的敏感率分别为32．0％、4．0％、56．0％、36．0％、12．0％、48．0％，对头孢他啶、哌拉西林／三唑巴坦耐药率分别达56．0％和44．0％。随机将8株产CTX-M型ESBLs的肺炎克雷伯菌作PFGE分析，结果显示2株为相同的PFGE型，其它为不相关的PFGE型。结论产CTX-M型ESBLs肺炎克雷伯菌广泛分布于临床各科室，绝大多数菌株来自不同克隆株；多种基因型ESBLs的存在提高了它对抗生素的耐药水平。加强对产ESBLs细菌的检测及分子流行病学研究，对控制院内感染的流行十分重要。     

多重耐药肺炎克雷伯菌基因型和整合子的分析

目的 了解多重耐药肺炎克雷伯菌的基因型和整合子存在情况.方法 设计TEM、SHV和CTX-M型及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合酶基凶特异性引物,并将聚合酶链反应(PCR)扩增获得β-内酰胺酶编码基因,分别克隆入pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,分析其基因亚型.结果 该多重耐药株与TEM-1、SHV-12及CTX-M-3型编码基因序列的同源性为100%,Ⅰ类整合酶基因检测阳性,Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因检测阴性.结论 Ⅰ类整合子存在产ESBLs肺炎克雷伯菌中.     

多重耐药肺炎克雷伯菌基因型和整合子的分析

目的 了解多重耐药肺炎克雷伯菌的基因型和整合子存在情况.方法 设计TEM、SHV和CTX-M型及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合酶基凶特异性引物,并将聚合酶链反应(PCR)扩增获得β-内酰胺酶编码基因,分别克隆入pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,分析其基因亚型.结果 该多重耐药株与TEM-1、SHV-12及CTX-M-3型编码基因序列的同源性为100%,Ⅰ类整合酶基因检测阳性,Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因检测阴性.结论 Ⅰ类整合子存在产ESBLs肺炎克雷伯菌中.     

多重耐药肺炎克雷伯菌基因型和整合子的分析

目的 了解多重耐药肺炎克雷伯菌的基因型和整合子存在情况.方法 设计TEM、SHV和CTX-M型及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合酶基凶特异性引物,并将聚合酶链反应(PCR)扩增获得β-内酰胺酶编码基因,分别克隆入pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,分析其基因亚型.结果 该多重耐药株与TEM-1、SHV-12及CTX-M-3型编码基因序列的同源性为100%,Ⅰ类整合酶基因检测阳性,Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因检测阴性.结论 Ⅰ类整合子存在产ESBLs肺炎克雷伯菌中.     

β-内酰胺酶抑制剂抑酶效应的研究

我们利用 3种由革兰阴性菌产生的标准ＴＥＭ型β 内酰胺酶 (ＴＥＭ 1、ＴＥＭ 2、ＴＥＭ 5 )研究 3种 β 内酰胺酶抑制剂(头孢噻肟、舒巴坦和克拉维酸 )的抑酶方式 ,目的是对临床合理使用抗菌素、寻找新的耐酶抗生素和新的酶抑制剂提供实验依据。1　材料与方法1.1　药品与试剂　头孢噻啶 (ｃｅｐｈａｌｏｒｉｄｉｎｅ,ＣＥＲ ,Ｓｉｇｍａ) ;头孢噻肟 (ｃｅｆｏｔａｘｉｍｅ ,ＣＴＸ ,北京第三制药厂生产 ) ;舒巴坦(ｓｕｌｂａｃｔａｍ ,Ｓｕｌ,Ｐｆｉｚｅｒ) ;克拉维酸 (ｃｌａｖｕｌａｎｉｃａｃｉｄ ,ＣＬＡ ,中国药品生物制品检定所 )。…     

SHV型β—内酰胺酶的动力学研究

采用分光光度法研究革兰氏阴性菌产生的4种SHV型β－内酰胺酶的动力学。以L－B作图法求取Km和Vmax。除SHV－1对第三代头孢菌素头孢肟没有水解作用外,SHV型β－内酰胺酶对青霉素类、第一代、第二代、第三代头孢菌素均有不同程度水解作用。头孢噻肟对SHV－2、SHV－4、SHV－5有较高的亲和力（低Km),但Vmax均不超过15％,SHV型酶的最适pH值为6．6－7．4;最适反应温度是34－40℃。     

一种测定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a的蛋白印迹技术

目的蛋白印迹技术(Western blot)检测临床MRSA分离株所产的PBP2a蛋白。方法用超声破碎法提取细菌总蛋白,利用PBP2'胶乳凝集试剂盒内的PBP2'抗体胶乳试剂,以Western blot技术检测3株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)分离株所产的特异性青霉素结合蛋白PBP2a(PBP2')的表达情况。结果3株MRSA的总蛋白样品在分子量约80kd的位置可见PBP2a的特异性条带。MRSA-2菌株的PBP2a表达量最大,而MRSA-4的PBP2a表达量最小。质控菌ATCC25923的菌蛋白未见PBP2a条带。结论本实验采用的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a的蛋白印迹测定方法,不但可对MRSA表达的PBP2a蛋白进行定性检测,还可进行半定量检测,因此该方法不但能用于PBP2a蛋白克隆表达的检测,还可测定不同情况下MRSA的PBP2a的表达情况,是一种值得推荐的PBP2a蛋白定性及半定量方法。     

AmpC酶的分类、检测与抑制策略

在细菌耐药机制中,AmpC酶引起的耐药日益增多,其导致的耐药问题已成为临床抗感染治疗成败的关键,因而越来越受到人们的关注。AmpC酶分为诱导型、结构型和质粒型等3种类型,可以由染色体介导,也可以由质粒介导。现介绍它们的研究进展、检测方法、耐药性及防治。     

临床分离革兰阴性菌整合子研究

目的 了解临床分离革兰阴性菌整合子的产生情况及整合子在细菌耐药中的作用.方法 E实验测定细菌对11种抗生奈及抗生素复合制剂的最低抑菌浓度,PCR扩增三种整合酶基因及Ⅰ型整合子的可变区,并对可变区的扩增产物进行克隆、测序.结果 16株革兰阴性菌中,6株含Ⅰ型整合子,所含基因盒主要是妒dfr/dhf及aadA基因盒.结论 整合子在不同革兰阴性菌中广泛存在,与细菌的多重耐药尤其是对氨基糖苷类抗生素的耐药密切相关.