17种抗生素对β-内酰胺酶的稳定性比较

目的 研究１７种抗生素对１６种标准β－内酰胺酶的稳定性。方法 采用紫外分光光度法,结果 第三代头孢菌素和氨曲南（除头孢哌酮外）均对β－内胺酰稳定,其中头孢三嗪的酶稳定性最好,相对水解率均不超过３０％,结论 第二代头孢菌素头孢呋新的相对水解率为６％～６５％,第一代头孢菌素对酶的稳定性不如第二代头孢菌素,其中头孢硫脒对酰的稳定性尤差,ＯＸＡ－２、ＳＨＶ－４、Ｄ３１对它的相对水解率分别高达５２３％、９１     

汕头地区36株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药情况分析

目的：了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA,36株）的耐药情况。方法：用聚合酶链反应扩增MRSA携带的mecA基因,并结合PBP2′胶乳凝集试验对临床分离的MRSA进行鉴定。微量肉汤稀释法测定16种抗菌药物对MRSA的最低抑菌浓度。结果：36株MRSA对β-内酰胺类抗生素,庆大霉素及氟喹诺酮类抗生素的耐药率均在80.0%以上,而对利福平的耐药率则较低（41.7%）。MRSA对半合成的四环素耐药率较低,对多西环素和米诺环素的耐药率分别为5.6%和0.0%,未检出万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌。结论：汕头地区分离的MRSA耐药情况严重。     

小檗碱对MRSA自溶酶系统作用的研究

目的探讨小檗碱与β内酰胺类抗生素对耐甲氧西林金葡菌(MRSA)的协同抗菌作用机制。方法采用蛋白印迹试验(Western-blot)测定小檗碱对MRSA的青霉素结合蛋白(PBP)2a表达的影响,TritonX-100诱导的自溶试验及自溶酶谱分析测定小檗碱对MRSA自溶酶系统的影响。结果小檗碱对MRSA所产PBP2a的表达无影响,但能显著诱导MRSA的自溶酶系统。结论小檗碱对自溶酶系统的激活作用可能是小檗碱增强β内酰胺类抗生素对MRSA抗菌作用的机制之一。本研究为今后小檗碱用于临床抗MRSA治疗提供了科学的理论基础。     

阴沟杆菌外膜通透性改变与其耐药性关系的研究

用头孢噻肟梯度平板法多步诱导一株阴沟杆菌达稳定耐药，经药敏测定表明其对氟喹诺酮类，头孢菌素类，青霉素类交叉耐药，对耐药株外膜蛋白行SDS－PAGE电泳，结果发现36，39，40kD等外膜蛋白带含量下降，与文献报告一致，用扫描透射电镜分别观察了阴沟杆菌的敏感株与药株，结果诱导耐药菌菌体变短，外膜皱褶明显，间隙加宽，胞内空泡减少，提示外膜屏障功能加强，细菌代谢不活跃，进一步以HPLC测定细菌耐药前后对环丙沙星的摄取量，耐药菌与敏感菌摄取曲线峰浓度比1：1．28且耐药株中环丙沙星浓度低于临界耐药浓度1mg/L，这和药敏试验结果一致，本实验结果提示阴沟杆菌外膜通透性的下降可导致菌株对各类抗生素的交叉耐药，耐药菌结构变化与功能性变化是一致的     

L1型金属β-内酰胺酶的原核表达及特性研究

目的：对临床分离的嗜麦芽窄食单胞菌所产L1型金属β-内酰胺酶基因进行原核表迭，并检测多种β-内酰胺类抗生素对重组L1酶的稳定性。方法：PER扩增L1酶的编码基因，将其亚克隆入pUCm—T载体，测序后将L1基因克隆至表达栽体pET-41a（＋）后在大肠埃希菌BL21（DE3）中表达，分光光度计测定多种β-内酰胺类抗生素对L1型金属β-内酰胺酶的稳定性。结果：本实验中的L1酶与国外同类酶的氨基酸同源性为92．44％。重组L1酶水解青霉素及碳青霉烯类抗生素的能力接近，氨曲南及头孢他啶对L1酶高度稳定。结论：对L1型金属B内酰胺酶的克隆测序及成功表达为进一步研究该酶的分子生物学特性奠定了基础。抗生素对L1酶的稳定性研究为指导临床合理应用抗生素提供了科学的理论依据。     

进口头孢他美酯片剂健康人体药代动力学研究

目的:本文报道瑞士产头孢他美酯片剂在我国健康志愿者人体药代动力学研究结果。方法:采用反相高效液相色谱法测定名志愿者口服盐酸头孢他美酯片剂后的血药浓度,椐程序计算有关药动学参数。12 3P87 结果:该制剂的 t、 (Ke) Tpeak、Cmax和分别为、、、·,药时曲线符合一室开放模型。AUC2.3h2.79h2.17mg/L18.69(mg/L)h结论:口服头孢他美500mg酯后的血药浓度高于大多数常见致病菌的,其消除半衰期较长,一日两次给药即可。MIC12     

环丙沙星的定量药物脑电研究

对 1 1例健康志愿者静滴乳酸环丙沙星的血药浓度与脑电图 (EEG)的变化进行了定量分析和动态观察 ,结果显示 ,静滴乳酸环丙沙星 2 0 0mg可引起自发脑电活动、脑电功率谱及频率分配的变化 ,主要表现为θ和 β1 频段所占百分比增高 ,频谱右移。血药浓度与功率谱中β1 的改变有密切相关 (r=0 90 1 8)。提示乳酸环丙沙星对中枢神经系统有较强的刺激作用     

SHV-71型β-内酰胺酶的酶动力学研究

目的对临床分离的鲍曼不动杆菌所产SHV-71型β-内酰胺酶的编码基因进行序列分析,研究其对多种β-内酰胺类抗生素的酶动力学参数,并观察pH、温度、底物浓度及酶抑制剂对酶活性的影响。方法PCR扩增SHV型酶的编码基因。将SHV的PCR产物与pMD18-T载体连接,测定它们的核苷酸序列,并将SHV-71型酶基因克隆至表达载体pET-41b(+),转化至宿主菌大肠埃希菌BL21(DE3)中。以IPTG诱导其表达并纯化,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测表达情况。用分光光度计测定SHV-71型酶对多种β-内酰胺类抗生素的动力学参数,以及pH、温度、底物浓度及酶抑制剂对酶活性的影响。结果SHV-71型酶对第一、二、三代头孢菌素类抗生素的相对最大水解速度及相对水解效率均较高,而对青霉素类和碳青霉烯类抗生素的相对最大水解速度及相对水解效率均较低。该酶在pH7.4、37℃的活性最高;底物浓度低于120μmol/L时,反应初速度随底物浓度增加而呈线性增加,底物浓度大于120μmol/L时,酶活性反而受抑;克拉维酸和三唑巴坦对SHV-71型酶有抑制作用。结论根据SHV-71型酶的酶学特点,我们推测SHV-71型酶为超广谱β-内酰胺酶。     

阿洛西林在狗的药物动力学参数的反相高效液相色谱法测定

本文用反相高效液相法测定犬静注和肌注阿洛西林20mg/kg后的血中药物浓度,并据此计算有关药物动力学参数。ODS-C_(18)为固定相,甲醇/67mmol/L磷酸缓冲液(1:1,vol/vo1)为流动相,紫外(uv)检测。以对硝基丙酰苯胺为内标物对血清中阿洛西林进行定量测定。根据F值,r 2/1值和AIC(Akaike's Information Criterion)值判断静注和肌注药物后在体内的转运过程分别符合开放型二室和一室模型。静注后即刻血药浓度为218±13μg/mL,T_(1/2α)为0.13h。肌注后T_(max)和T_(1/2ka)分别为0.75和0.24h,C_(max)为16±6μg/mL,但im后AUC仅为iv相同剂量后的38％。该药iv和im后的T_(1/2)分别为1.5和1.7h,V_d分别为0.35和0.43L/kg。本实验结果与微生物法测定结果间无显著差异。     

单剂和多剂口服乙酰螺旋霉素后的人体药动学

乙酰螺旋霉素(ASP)是螺旋霉素的乙酰化衍生物,为半合成的大环内酯类抗生素,主要对革兰氏阳性细菌有抗菌活性,对脑膜炎球菌等革兰氏阴性细菌也高度敏感。ASP在临床上主要用于革兰氏阳性细菌的肺部感染、骨髓炎、中耳炎等。体外试验中,本品的抗菌作用较螺旋霉素、红霉素弱。但在体内实验,由于本品耐酸耐热、组织浓度高,维持时间长而抗菌效能较优。该药在临床已应用较长时间,但其药动学特征及抗菌活性在国内尚未见报道。我们研究了单剂和多剂口服ASP后的药动学,并测定了ASP对革兰氏阳性细菌的体外抗菌活性,现将结果报道如下。