法罗培南对质粒介导β-内酰胺酶的稳定性及抑酶作用研究

目的研究青霉烯类抗生素法罗培南对14种标准β-内酰胺酶（TEM-1、TEM-2、TEM-3、TEM-5、SHV-1、SHV-2、SHV-4、SHV-5、PSE-1、PSE-2、PSE-3、OXA-1、OXA-2和OXA-3）的稳定性及抑酶作用。方法采用紫外分光光度法，以其它p内酰胺抗生紊（亚胺培南、美罗培南、头孢噻啶、头孢西丁、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢哌酮、氨曲南、克拉维酸、舒巴坦、三唑巴坦）为对照。结果所有抗生紊对超广谱β-内酰胺酶（TEM-3、TEM-5、SHV-2、SHV-4和SHV-5）的IC50低于1．9μmol／L；但对广谱酶TEM-1、TEM-2和SHV-1的IC50超过100μmol／L。法罗培南对OXA-1、OXA-2和OxA-3的IC50低于1．0μmol／L。法罗培南、亚胺培南、美罗培南和头孢西丁对14种标准β-内酰胺酶均稳定。结论法罗培南对14种β-内酰胺酶的抑制作用强于亚胺培南和美罗培南。     

司氟沙星的体外抗菌活性研究

采用试管双倍稀释法检测司氟沙星对临床分离的３７２株致病菌的体外抗菌活性,并与３种同类药物进行比较。结果表明司氟沙星对金葡球菌、表葡球菌和肺炎链球菌等革兰氏阳性菌有较强的抗菌活性,ＭＩＣ５０≤０．０３～０．０６ｍｇ／Ｌ,抑菌率７５％～９３．８％;对革兰氏阴性菌中的伤寒沙门氏菌、痢疾志贺氏菌亦有较强的抗菌作用,ＭＩＣ９００．０６～１．０ｍｇ／Ｌ,抑菌率９２．５％～１００％;除粘质沙雷氏菌和柠檬酸杆菌耐药率较高外,对多数肠杆菌科细菌亦有５３．１％～８５．７％的抑菌率。     

SHV型β-内酰胺酶动力学及抑酶效应的研究

采用分光光度法研究革兰氏阴性菌产生的2种SHV型β-内酰胺酶的动力学。分别以L-B作图法求取Km和V_(max),以Dixon作图法求取Ki。结果表明:除SHV-1对第三代头孢菌素头孢噻肟没有水解作用外,SHV型β-内酰胺酶对青霉素类、第一代、第二代、第三代头孢菌素均有不同程度水解作用。头孢噻肟对SHV-2、有较高的亲和力(低Km),但V_(max)均不超过15％。抑酶实验结果证明头孢噻肟对SHV-2、有抑制作用,β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦对SHV-1,2均有抑制作用。SHV型酶的最适pH值为6.6～7.4;最适反应温度是34℃～40℃。     

多重耐药肺炎克雷伯菌基因型和整合子的分析

目的 了解多重耐药肺炎克雷伯菌的基因型和整合子存在情况.方法 设计TEM、SHV和CTX-M型及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合酶基凶特异性引物,并将聚合酶链反应(PCR)扩增获得β-内酰胺酶编码基因,分别克隆入pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,分析其基因亚型.结果 该多重耐药株与TEM-1、SHV-12及CTX-M-3型编码基因序列的同源性为100%,Ⅰ类整合酶基因检测阳性,Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因检测阴性.结论 Ⅰ类整合子存在产ESBLs肺炎克雷伯菌中.     

多重耐药肺炎克雷伯菌基因型和整合子的分析

目的 了解多重耐药肺炎克雷伯菌的基因型和整合子存在情况.方法 设计TEM、SHV和CTX-M型及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合酶基凶特异性引物,并将聚合酶链反应(PCR)扩增获得β-内酰胺酶编码基因,分别克隆入pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,分析其基因亚型.结果 该多重耐药株与TEM-1、SHV-12及CTX-M-3型编码基因序列的同源性为100%,Ⅰ类整合酶基因检测阳性,Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因检测阴性.结论 Ⅰ类整合子存在产ESBLs肺炎克雷伯菌中.     

抗菌药物的非抗菌作用

抗菌药物的主要作用是各从不同的角度抑制细菌繁殖或杀灭细菌 ,在临床上主要用于感染性疾病的治疗。然而 ,许多抗菌药物 ,除抗菌作用外 ,还有许多有益的非抗菌作用 ,如抗肿瘤作用、免疫调节作用、抗病毒作用等等。全面了解抗菌药物的作用及其机制 ,对合理应用抗菌药物有重要意义     

绿茶对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抗菌作用及机制研究进展

泛耐药的出现,使得耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的治疗成为临床棘手的问题。绿茶提取物对MRSA有一定的抗菌作用。本文就绿茶对MRSA感染的临床试验、与抗生素的协同抗MRSA作用、有效成分的分离分析及作用机制作一综述。     

粘质沙雷菌中SHV型β-内酰胺酶编码基因的克隆及序列分析

目的研究重庆地区临床分离的粘质沙雷菌E121编码超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的基因。方法PCR扩增ESBLs编码基因片段，克隆入pUCm—T载体，双脱氧链终止法测定核苷酸序列并确定亚型，等电聚焦测定β-内酰胺酶的等电点（pI）。结果PCR扩增结果显示粘质沙雷菌E121产生的ESBLs为SHV型，其基因片段含756个核苷酸，GenBank查询其核苷酸序列与SHV-28型ESBLs完全相同。该耐药株至少含有等电点pI约为5．4和8．2的两种β-内酰胺酶。结论重庆地区粘质沙雷菌E121所产ESBLs亚型为SHV-28。     

细菌超广谱β-内酰胺酶的研究进展

超广谱β—内酰胺酶(ESBLs)被越来越多的发现和认识。本文就ESBLs的分类、流行病学特点、检测及其临床意义、脉冲场电泳分型及意义作一综述。     

β-内酰胺酶分子生物学研究进展

β-内酰胺酶是细胞对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因,β-内酰胺酶按照各自的底物和抑制轮廓分为4组,根据各自的氨基酸序列分属于A、B、C、D共4种分子类别。细菌β-内酰胺酶耐药基因突变可引起广泛耐药,以TEM和SHV为代表的A类酶的突变多发生在结构基因上,其单点苛多点突变衍生出大量的新型超广谱酶。结构基因以外区域的突变多数发生于启动基因或调节基因,后者的改变往往造成结构基因的过度表达,使产酶量大增而导致耐药。B类金属β-内酰胺酶可通过启动基因上的多点突变产生耐药。C类酶的基因突变一般发生在调节基因上,通过对产酶量的调控引起细菌耐药。