结核分枝杆菌Rv1246c和Rv1247c假想蛋白间的相互作用

目的 观察结核分枝杆菌Rv1246c和Rv1247c假想蛋白间的相互作用.方法 采用PCR技术克隆结核分枝杆菌Rv1246c和Rv1247c假想蛋白基因, 构建酵母双杂交载体质粒pGBKT7-Rv1247c和pGADT7-Rv1246c, 经酶切分析和DNA测序证实重组质粒构建成功后, 采用醋酸锂法顺序转染酵母菌AH109,检测β半乳糖苷酶活性.结果 共转染GBKT7-Rv1247c和pGADT7-Rv1246c的酵母菌AH109可以在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp营养缺陷培养基上生长,β半乳糖苷酶活性实验阳性.结论 利用酵母双杂交系统证实结核分枝杆菌Rv1246c与Rv1247c假想蛋白可以相互作用.     

小鼠巨噬细胞转染Rv0901基因后活性的改变

目的 将重组结核分枝杆菌Rv0901基因的重组质粒pcDNA3.1-Rv0901转染小鼠腹腔巨噬细胞,研究结核分枝杆菌Rv0901基因在结核分枝杆菌感染巨噬细胞的过程中所起的作用.方法 制备小鼠腹腔巨噬细胞,分别将pcDNA3.1、pcDNA3.1-Rv0901质粒DNA与绿色荧光蛋白(GFP)的质粒DNA混合,以脂质体转染的方式共转染小鼠腹腔巨噬细胞.转染后72 h,分别收集细胞用流式细胞仪检测GFP的表达和细胞凋亡的发生情况,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测质粒的转染情况.收集转染72 h后的细胞培养液上清,检测细胞NO、IFN-γ的释放水平.结果 pcDNA3.1和pcDNA3.1-Rv0901转染的巨噬细胞中均检测到了GFP的表达,转染后的巨噬细胞RT-PCR能扩增出Rv0901的目的 片段,pcDNA3.1-Rv0901转染巨噬细胞后细胞的凋亡率高于空载体对照组[(56.4±2.0)% vs (19.9±1.5)%,P＜0.05], pcDNA3.1-Rv0901转染巨噬细胞后细胞培养液上清中NO和IFN-γ的释放量高于空载体对照组[NO:(40.4±3.0) μmol/L vs (27.5±3.2) μmol/L, IFN-γ:(2.11±0.031) ng/mL vs (0.62±0.025) ng/mL,P均＜0.05].结论 pcDNA3.1-Rv0901转染小鼠巨噬细胞后使巨噬细胞的凋亡增加,NO和IFN-γ的释放量增加,提示结核分枝杆菌Rv0901基因可能导致巨噬细胞的活性增强,与结核分枝杆菌感染巨噬细胞的机理有关.     

问号钩端螺旋体毒力基因mviN的表达及细胞毒性作用研究

目的克隆表达问号钩端螺旋体毒力基因mviN并观察表达产物对血管内皮细胞ECV304及肺上皮细胞A549的毒性作用。方法将mviN基因插入原核表达载体pET32a(+),构建重组质粒pET-mviN,转化大肠杆菌BL21(DH3)以高效表达携带组氨酸标签的Trx-MviN融合蛋白,并作亲和层析纯化。以XTT法检测毒力蛋白Trx-MviN对ECV304及A549细胞增殖的抑制作用,同时以流式细胞术检测其作用于ECV304及A549后的细胞凋亡率。结果成功构建了重组质粒pET-mviN并高效表达出Trx-MviN融合蛋白;毒力蛋白Trx-MviN作用于ECV304及A549后,与对照组相比较,其细胞增殖被显著抑制(P<0.05),而细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论重组质粒pET-mviN高效表达出Trx-MviN融合蛋白,纯化后的融合蛋白Trx-MviN对ECV304及A549具有细胞毒性作用。     

阿魏酸钠对尘肺病肺纤维化患者TGF-β/Smad信号通路的调节作用研究

目的 探究阿魏酸钠对尘肺病肺纤维化患者转化生长因子-β(TGF-β)/Smad信号通路的调节作用.方法 选取2017年8月至2020年9月本院收治的86例尘肺病肺纤维化患者作为研究对象,采用随机数字表法分为常规治疗组和阿魏酸钠组,各43例.常规治疗组给予常规治疗+喷雾吸入4％克矽平治疗,阿魏酸钠组在常规治疗组基础上给予...     

泻阴补阳针刺法联合针刺“五泉穴”治疗卒中后痉挛性瘫痪的疗效及对血清TGF-β1和NSE水平影响

摘要：目的：探讨泻阴补阳针刺法联合针刺“五泉穴”治疗卒中后痉挛性瘫痪的疗效及对血清TGF-β1和NSE水平影响。方法：选取我院收治的卒中后痉挛性瘫痪患者86例,随机分为两组各43例。对照组给予针刺“五泉穴”,治疗组在对照组基础上给予泻阴补阳针刺法,对比两组治疗前后的临床疗效、上肢和下肢Ashworth评分、Barthel 评分、CSI 评分、FIM评分和FMA评分及血清TGF-β1和NSE水平。结果：经过治疗后,治疗组总有效率较高(P<0.05);两组患者上肢和下肢Ashworth评分明显降低(P ＜0.05);并且治疗组降低较多(P ＜0.05);两组患者Barthel 评分、FIM评分和FMA评分水平显著升高,CSI 评分明显降低(P ＜0.05);并且治疗组改善较多(P ＜0.05);两组患者NSE水平显著降低,TGF-β1水平显著升高(P ＜0.05);并且治疗组改善程度较大(P ＜0.05)。结论：采用泻阴补阳针刺法联合针刺“五泉穴”治疗卒中后痉挛性瘫痪具有较好的治疗效果,能够改善血清TGF-β1和NSE水平,安全性较好,值得在临床上推广应用。     

晚发型阿尔茨海默病和血管性痴呆老年患者血清同型半胱氨酸、尿酸以及氧化应激水平分析

目的 调查晚发型阿尔茨海默病（late onset Alzheimer''s disease, LOAD）和血管性痴呆（vascular dementia, VAD）老年患者血清同型半胱氨酸、尿酸、氢过氧化物、硫醇、氧化蛋白产物以及抗氧化水平,探讨其临床意义。方法 选取LOAD患者89例、VAD患者54例和正常对照48例,测定受试者血清同型半胱氨酸、尿酸、氢过氧化物、硫醇、氧化蛋白产物、总抗氧化以及残留抗氧化水平。结果 与对照组比较,LOAD组和VAD组患者血清中同型半胱氨酸、尿酸、氢过氧化物显著升高（P<0.05）,残留的抗氧化能力显著降低（P<0.05）;同时,LOAD组和VAD组患者氢过氧化物水平比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 测定血浆同型半胱氨酸、尿酸、氢过氧化物以及残留抗氧化水平,对诊断LOAD和VAD可提供一定的帮助;氢过氧化物水平可作为区分LOAD和VAD患者的诊断指标之一。     

结核分枝杆菌毒力基因研究进展

结核病是目前全球重点控制的传染病之一，结核分枝杆菌(简称结核杆菌)具有强大的致病性和传染力，而要彻底了解和控制结核杆菌，对其毒力基因的认识就显得非常重要。近年来世界各国投入了很大的人力物力研究结核杆菌的毒力基因。对毒力基因的认识将促进结核的疫苗研制、临床诊断与控制，具有十分重要的抗结核战略意义。     

急性脑梗死患者Hcy ox-LDL D-二聚体的表达水平及意义

目的 分析急性脑梗死（ACI）患者同型半胱氨酸（Hcy）、氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）、D-二聚体（D-D）等指标的水平变化及其临床意义。方法 选取2016年6月至2018年6月黄浦区中心医院神经内科收治的53例ACI患者作为研究组，依据病情的严重程度将患者分为重度组、中度组、轻度组，依据梗死灶的大小将患者分为大梗死灶组、中梗死灶组、小梗死灶组；同时选取同期体检人员42例作为对照组，比较不同组别急性脑梗死患者与对照组人群的血清Hcy、ox-LDL、D-D水平差异。结果 研究组患者血清Hcy、ox-LDL、D-D水平均高于对照组（P<0.05）。随着NIHSS评分和梗死灶面积的增加，研究组患者血清Hcy、ox-LDL、D-D水平均增高（P<0.05）。完全型和进展型脑卒中患者血清Hcy、ox-LDL、D-D水平均高于对照组（P<0.05）。进展型患者血清Hcy、ox-LDL、D-D水平均高于完全型（P<0.05）。结论 血清Hcy、ox-LDL、D-D水平与ACI密切相关，三者均可用于ACI的诊断及病情严重程度的评估。     

颅骨成形术修补材料的研究进展

颅骨缺损是神经外科常见并发症,多数是由于各种颅内手术行去骨瓣减压后造成,一般在首次术后3~6个月进行颅骨成形术.Grant和Norcmss[1]制定了颅骨成形术的适应证:①具有严重头痛和其它trephined综合征的颅骨缺损;②导致癫痫的缺损;③存在受伤危险的缺损;④影响外观的缺损;⑤强烈搏动或有疼痛感的颅骨缺损.     

60例老年2型糖尿病患者心率变异性及血压变异性分析

目的 本研究旨在探索老年男性2型糖尿病患者心率变异性及血压变异性的变化.方法 入选人群均为老年男性,共100例,其中对照组（A组）40例,2型糖尿病组（B组）60例.进行24小时动态心电图及24小时动态血压监测.收集其HRV时域指标、BP及BPV长时变异性指标,之后进行对比分析,了解老年男性2型糖尿病患者心率变异性及血压变异性的变化.结果 与对照组相比,2型糖尿病组HRV时域指标减少（P＜0.05）;与对照组相比,2型糖尿病组BPV增大（dSBPSD、dSBPCV等,P〈0.05）.结论 老年2型糖尿病患者组HRV时域指标减少及BPV增大,提示其心脏自主神经功能受损.这对患者病情的严重程度、治疗、预后进行判断、指导和评估是具有重要价值的.