两种回流灌肠法治疗先天性巨结肠的对比研究

目的:评价先天性巨结肠(Hirschsprung disease,HD)患儿术前采用全自动灌肠机回流灌肠的安全性、有效性及舒适性,并与传统的回流灌肠法相比较,为该法广泛应用于儿科临床提供理论依据.方法:将56例先天性巨结肠(常见型)患儿随机分为试验组(全自动灌肠机行回流灌肠)和对照组(传统回流灌肠法);检测首末次灌肠后患儿血电解质、血渗透压、体重及血浆蛋白变化,收集灌肠液计数大便菌落,大年龄患儿评价灌肠舒适度,术中评价灌肠效果,统计灌肠时间、术后排便时间、住院天数及并发症发生率.结果:(1)实验组灌肠后,患儿体重及血浆白蛋白显著增加(P<0.05),灌肠液中大便菌落数显著下降(P<0.05);(2)实验组灌肠前后,患儿血电解质及渗透压无显著改变(P>0.05);(3)两组患儿在术前灌肠时间、术后自主排便时间及术后并发症发生率等方面没有显著差异(P>0.05);但实验组患儿的灌肠舒适度及术中灌肠效果明显提高,住院时间明显缩短(P<0.05 ).结论:采用全自动灌肠机行先天性巨结肠术前回流灌肠,不但操作简便,省时省力,而且舒适,安全性高,灌肠效果好,可替代传统回流灌肠法并广泛应用于儿科临床.     

肛管内超声及肛直肠测压在肛门闭锁术后肛门功能评估的意义

目的：通过肛管内超声（EUS）和肛直肠测压检查对肛门闭锁术后肛门功能做客观评价,并指导进一步治疗。方法对34例肛门闭锁术后患儿分别采用 EUS、肛直肠测压测量肛管中位肛门水平内括约肌（IAS）厚度、肛门外括约肌（EAS）厚度、肛周肌肉血供及弹性、肛门括约肌松弛反射情况,并结合临床评分评价术后肛门功能。根据手术方式不同分为：行后矢状入路骶会阴肛门成形术（Pea 组）及经会阴肛门成形术（经会阴组）,根据病理类型不同分为：高位组、中间位组、低位组,4例无肛门直肠疾病及手术史儿童为对照组,对Pea 组、经会阴组及对照组肛管中位水平IAS、FAS 厚度行组间独立样本t 检验。结果（1）EUS 测得肛门闭锁术后患儿肛管中位水平IAS、EAS 厚度优良率为100％,肛直肠测压括约肌松弛反射引出的优良率为91．2％,均高于肛门功能临床评分优组的70．6％,客观指标的恢复先于主观指标,可以通过参照客观指标,对主观指标恢复不满意的患儿有针对性的行个体化功能锻炼。（2）Pea 组测得肛门闭锁术后患儿肛管中位水平IAS、EAS 分别为：（1．42±0．22）mm 及（3．21±0．25）mm,经会阴组为（1．33±0．22）mm 及（3．10±0．33）mm,对照组肛管中位水平IAS、EAS 分别为（1．21±0．17）mm 及（3．00±0．18）mm,组间两两比较差异均无统计学意义（P ＞0．05）。（3）20例Pea 术后行EUS 检查,6例检测到骶尾部肛周肌肉缺损。结论 EUS 可客观评价肛门闭锁术后括约肌重建的解剖机构,EUS 结合肛直肠测压可以作为术后肛门功能恢复的客观指标。     

肺耐药相关蛋白与肿瘤的多药耐药性

肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是造成化疗失败的主要原因.耐药性产生原因是多方面的,其中以肿瘤多药耐药(multidrug resistance,MDR)最为常见.     

Bcl-2、钙视网膜蛋白在发育异常肠壁神经节细胞中的表达

目的探讨Bcl-2和钙视网膜蛋白(calretinin,CR)在不同发育程度肠壁神经节细胞中的表达及意义。方法采用免疫组织化学染色观察Bcl-2、CR在40例先天性巨结肠病(hirschsprung disease,HD)、10例先天性巨结肠类缘病(hirschsprung’s allied disease,HAD)和对照组肠壁神经节细胞的表达情况。结果Bcl-2表达于发育较差的神经节细胞,在发育成熟的神经节细胞不表达。CR表达于发育成熟的神经节细胞,在发育较差的神经节细胞不表达或弱表达。结论Bcl-2和CR在肠神经节细胞的特异性表达,有助于判断神经节细胞的成熟程度。Bcl-2在发育异常肠壁神经节细胞的功能维持和恢复上可能起到了重要作用。     

5种耐药基因在成人常见恶性肿瘤中的表达特点

目的:通过对成人肝癌、肺癌、胃癌、肠癌、乳腺癌、卵巢癌5种耐药基因蛋白的检测,了解常见恶性肿瘤组织耐药基因表达的一般规律和特点.方法:应用SP免疫组织化学法检测120例成人常见肿瘤标本P-gp、MRP、LRP、GST-π、Topo-Ⅱ的表达.结果:1.在6种常见肿瘤中P-gp、MRP、LRP、GST-π相对高表达,而Topo-Ⅱ相对低表达.2.肝癌的5种耐药基因蛋白表达均偏高.3.2种和2种以上耐药基因的共表达率达95.83%,其中5种耐药基因共表达率达21.67%.结论:P-gp、MRP、LRP、GST-π、Topo-Ⅱ均不同程度的参与了肿瘤耐药机制,临床上可作为指导用药的综合指标,实现个体化化疗.     

人多药耐药基因1(mdr1)的克隆及重组腺病毒制备

目的:构建表达多药耐药基因1(MDR1)的重组腺病毒表达系统.方法:用基因工程技术将多药耐药基因1的cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,然后在细菌内与pAdEasy同源重组,经脂质体转染293细胞包装、扩增腺病毒颗粒.将重组腺病毒Ad5-mdr1感染小鼠单个核细胞,通过荧光显微镜及流式细胞仪进行检测.结果:酶切鉴定及PCR结果证明多药耐药基因重组腺病毒载体构建成功,构建的人多药耐药基因1(mdr1)重组腺病毒载体的效价达到8.3×1011 pfu/ml.对小鼠单个核细胞的感染效率可达10%～15%,转染小鼠单个核细胞细胞48h后,可检测到mdr1基因的表达.结论:成功构建了表达多药耐药基因1的重组腺病毒载体,为后续对mdr1的相关研究创造了条件.     

小儿恶性实体肿瘤治疗进展

恶性肿瘤是严重威胁人民生命健康的常见病,我国每年新增恶性肿瘤患者约160万.随着我国经济发展和健康水平提高,传染病疾病、感染性疾病得到有效控制,在我国经济发达地区及大城市,恶性肿瘤已成为儿童疾病死亡首位原因.根据上海1990年统计资料,小儿恶性肿瘤发病率为98.8/100万人口,同期北美和欧州小儿恶性肿瘤发病率分别为122/100万人口及120/100万人口.儿童恶性肿瘤中白血病发病率最高约占总数32%,小儿恶性实体瘤以颅内肿瘤、恶性淋巴瘤、神经母细胞瘤、肾母细胞瘤、软组织肉瘤、骨肉瘤、肝母细胞瘤等较为常见.早期诊断、早期治疗、综合治疗是儿童肿瘤诊治的基本原则.综合治疗包括：手术治疗、化疗、放疗、免疫治疗、造血干细胞移植及基因治疗等.     

小儿先天性胆总管囊肿

临床资料 1974～1990年17年中我科收治先天性胆总管囊肿140例,年龄最小2月,最大14岁,男41例,女90例。手术治疗79例。诊断主要方法有①临床表现(腹痛、黄疸及腹块)。②上消化道钡餐,主要表现为十二指肠受压,推移及十二指肠圈扩大。③静脉胆道造影,梭形及较小囊肿效果较好。④经皮肝穿胆道造影(PTC)。⑤B超,具有无损伤、简单、准确等优点,为最主要诊断方法。治疗诊断一经确立原则上应行根治手术。本组采用以下手术方法。①单纯外引流术(5例)。②十二指肠或空肠囊肿侧侧吻合术(13例),因不符合生理,并发症多目前已极少采用。③空肠囊肿Roux-Y吻合术(31例),提向囊肿的空肠在距属氏韧带20cm处切断,引流胆汁空肠的长度在15cm     

实验性巨结肠大鼠模型的建立及其生物学特性

目的:建立一种适合骨髓间充质干细胞移植的实验性巨结肠大鼠模型并观察其生物学特性.方法:8～9周龄SD大鼠90只,随机分为两组.氯胺酮麻醉下开腹,实验组用0.1%苯扎氯铵(BAC)处理大鼠降结肠浆膜40min,温盐水冲洗后关腹,对照组用生理盐水代替BAC.分别于术后1、2、3、4、8周进行大体观察、钡灌肠,结肠测压、取处理段结肠行病理学检查,循环水浴药理学测定平滑肌收缩功能变化,RT-PCR检测AchE、nestin、Chrm3的表达.结果:BAC处理后1周,实验组大鼠出现腹胀,处理段结肠狭窄,反射性收缩消失,对乙酰胆碱敏感性增强,近端结肠扩张有大便堆积,且随着时间延长症状加重.病理学检查发现BAC处理后1周结肠神经节细胞明显减少、空泡变,3周后完全消失.结论:采用0.1?C处理降结肠浆膜成功建立了实验性巨结肠模型,此模型与先天性巨结肠动物模型相似,为进一步结肠内骨髓间充质干细胞移植移植分化为神经细胞的研究奠定了基础.     

结缔组织生长因子的克隆及其真核表达载体的构建

目的结缔组织生长因子(CTGF)在肿瘤发生,胚胎发育、骨折愈合、细胞增殖和分化、血管形成等众多领域都有着重要的作用,对结缔组织生长因子进行克隆及构建其真核表达载体,对其在功能上的进一步研究及应用有积极意义.方法以含有鼠CTGF基因序列的EST克隆为模板,通过PCR的方法克隆出目的基因CTGF,再以分子克隆学的方法将CTGF克隆入真核表达载体pAdTrack-CMV,进一步以PCR、酶切、DNA测序的方法筛选出正确的真核表达质粒.并通过Western-Blotting的方法对质粒的表达功能进行研究.结果 PCR、酶切、DNA测序的方法均证实已经成功克隆获得序列正确的目的基因CTGF,并将CTGF克隆入真核表达载体pAdTrack-CMV.Western-Blotting的结果表明构建的表达CTGF的真核表达载体高表达CTGF蛋白质.结论成功克隆目的基因CTGF并构建其真核表达质粒,证实在蛋白质水平获得了表达.