甘草酸二铵抗内毒素体外致肝细胞凋亡的作用

甘草酸二铵为甘草提取制剂，具有较强的保护肝细胞膜及改善肝功能的作用，我们拟用体外培养的HepG2细胞作为模型，观察甘草酸二铵对内毒素(LPS)致肝细胞凋亡的拮抗作用。     

人肝再生增强因子小干扰RNA表达质粒的构建和鉴定

目的 检测人肝癌细胞株HepG2细胞有无人肝再生增强因子(hALR)的表达，构建针对人肝再生增强因子基因编码区的小干扰RNA(siRNA)表达质粒pSIALR-A及其阴性对照质粒pSIALR-B，观察其对人肝再生增强因子表达的影响。方法 用免疫细胞化学法观察HePG2细胞表达hALR的情况。将构建成功的pSIALR-A和pSIALR-B分别转染HepG2细胞，转染后48h，用免疫细胞化学法及逆转录聚合酶链反应法观察人肝再生增强因子蛋白及mRNA的表达。结果 HePG2细胞有人肝再生增强因子的表达。成功构建了针对人肝再生增强因子基因编码区的siRNA表达质粒pSIALR-A，并发现它能明显抑制人肝再生增强因子的表达，而随机序列的siRNA却无此作用。结论 人肝再生增强因子的siRNA具有明显和特异性的抑制人肝再生增强因子的表达作用。     

持续性血液透析治疗慢性肾功能衰竭的疗效观察

目的:探讨与对比不同持续性血液透析治疗慢性肾功能衰竭的疗效。方法:选择80例慢性肾功能衰竭患者,根据随机数字表法分为治疗组与对照组各40例。对照组给予传统低通量持续性血液透析,治疗组给予高通量持续性血液透析。结果:两组治疗后的血清Scr与BUN值与治疗前对比都呈现明显下降的趋势(P<0.05),同时治疗后治疗组的血清Scr与BUN值明显低于对照组(P<0.05)。结论:相对于低通量血液透析,持续性高通量血液透析治疗慢性肾功能衰竭能有效促进肾功能的恢复,值得推广应用。     

回缩性睾丸的临床研究

目的通过评价回缩性睾丸患睾临床转归时间为临床治疗回缩性睾丸提供参考。方法回顾性分析了本院40例2004年3月至2009年9月被诊断为回缩睾丸的患儿,所有的患儿在随访时评价睾丸收缩性、位置、睾丸体积,并根据随访结果分为回缩组、正常组、固定组。结果 40个患儿,21例单侧回缩睾丸(52.5%),19双侧回缩睾丸(47.5%)。他们的平均年龄为(3±2.7)岁,评价随访时间为(4.1±1.6)年。59例回缩睾丸,27例(45.7%)成功降入阴囊,23例(39.0%)保持回缩,9例患者(15.3%)为睾丸未降或睾丸体积变小行睾丸固定术。40例患者中平均随访(4.4±1.7)年。正常组平均随访时间为(4.1±1.3)年,回缩组平均随访时间为(5.2±1.7)年,固定组平均随访时间为(3.7±1.6)年。正常组平均诊断年龄为(4.3±3.2)年,回缩组平均诊断年龄为(2.3±1.6)年,固定组平均诊断年龄(1.3±0.8)年。固定组与正常组相比较,固定组平均诊断年龄小于正常组的平均诊断年龄(P0.05)。结论回缩性睾丸有需行外科睾丸固定术的干预的风险,且年龄越小被诊断为回缩性睾丸的患者有需行外科睾丸固定术干预的风险越高。     

白细胞介素-18与糖尿病及其并发症的关系

近年来的研究表明,白细胞介素-18(IL-18)作为一种前炎症细胞因子,通过促发炎症因子生成,导致Th1/Th2细胞因子失平衡及胰岛β细胞凋亡而与糖尿病的发生、发展相联系,并且通过多种机制影响糖尿病的大血管病变和微血管病变(主要为糖尿病肾病和糖尿病视网膜病)的发生.同时,IL-18的基因多态性也是糖尿病研究领域中一个倍受关注的焦点.     

乙型肝炎病毒转染及脂多糖刺激对HepG2细胞Toll样受体2和4表达的影响

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)转染对HepG2细胞表面Toll样受体(TLR)表达的影响及脂多糖(LPS)加重HBV转染致肝细胞损伤是否存在直接作用,进一步探讨乙型肝炎发病及重型化的发生机制。方法以不同浓度的LPS刺激HepG2细胞、HepG2．2．15细胞(转染HBV全基因组的HepG2细胞),并以免疫细胞化学方法检测HepG2细胞及HepG2．2．15细胞表面TLR 2、4蛋白质表达情况,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR2、4 mRNA表达情况,用Abbot试剂检测HepG2．2．15细胞HgsAg和HgeAg表达情况,用流式细胞仪观察细胞生长周期及细胞凋亡情况。结果HepG2、HepG2．2．15细胞膜上均有TLR2、4蛋白质表达,免疫细胞化学染色在未加LPS及各浓度LPS刺激细胞均可见细胞膜有棕褐色着色,且随着LPS浓度增加,其着色强度增加;对0mg/L及10mg/L LPS诱导HepG2、HepG2．2．15细胞RNA进行RT-PCR扩增,其产物行10g/L琼脂糖凝胶电泳均可见特异性条带,且10mg/L LPS诱导细胞TLR2和TLR4与分子量标准品的吸光度值比值明显高于0mg/L LPS诱导细胞扩增产物,分别为306．63±6．18对519．84±9．15和700．54±13．56对1116．62±37．67,F值分别为740．58和426．07,P值分别为0．01和0．02;流式细胞仪检测细胞周期发现HepG2绌胞及未经LPS诱导的HepG2．2．15未发生凋亡,各浓度LPS诱导的HepG2．2．15细胞均有细胞凋亡发生,且细胞凋亡率随着LPS浓度增加上升。结论LPS可能通过其与肝细胞膜上的TLR结合,而参与HBV转染后肝细胞损害及肝脏炎症重型化的发病机制。     

符合中国三类标准的心脏死亡器官捐赠四例经验总结

目的 总结符合“中国心脏死亡器官捐献分类标准”中国三类(C-Ⅲ)标准的器官捐赠及移植的经验.方法 2011-2012年间,符合C-Ⅲ标准的心脏死亡器官捐赠(DCD)者4例,在手术室进行可控性心跳及呼吸终止后,进行了器官捐赠.获取器官的热缺血时间为7～15 min.结果 除1例捐赠的肝脏进行快速病理学检查外,其他器官均质地良好.捐赠器官用于肝移植3例,肾移植8例,手术顺利,仅1例受者出现移植肾功能恢复延迟,受者均未发生排斥反应和外科并发症.出院后,移植物功能良好.结论 使用符合C-Ⅲ标准的捐赠器官可获得满意的移植效果.     

输注脾细胞建立输血相关的移植物抗宿主模型

目的探讨输注同种脾细胞建立小鼠输血相关的移植物抗宿主(TA-GVHD)模型及其特点。方法分离C57BL/6(H-2b)脾细胞,分别经静脉输注给Balb/c(H-2d)裸鼠与F1代(C57BL/6×Balb/c H-2b/d),建立输血相关的移植物抗宿主模型。活体染料羧基荧光素乙酰乙酸(5,6-carboxyfluorescein diacetate succini midyl ester,CFSE)标记供者脾细胞,通过流式细胞仪分析供者细胞在受者体内的增殖;免疫组化分析供者脾细胞survivin的表达;检测Balb/c裸鼠体内抗供者抗体及IL-10浓度;分析皮肤、小肠、肝脏的病理变化。结果输注同种脾细胞成功建立急性TA-GVHD模型。受者脾脏及外周可以检测到标记后增殖的供者细胞。小鼠的病理改变主要出现在肝脏,浸润细胞早期表达survivin。小肠及皮肤未见明显的病理改变。TA-GVHD裸鼠第7天IL-10、抗-Balb/c显著升高。结论输注同种脾细胞可以建立TA-GVHD模型,并具有简单、快速、稳定的特性,为诊断、治疗GVHD提供了良好的模型。     

脑卒中后癫(癎)86例分析

目的:探讨脑卒中后癫癎的发生率、发病机制及临床特点。方法:对1052例脑卒中患者的临床资料进行回顾性分析。结果:本组患者脑卒中后继发性癫癎的发生率为8.17%。卒中后癫癎的发作类型以单纯部分性发作多见(55.81%)。蛛网膜下腔出血最易合并继发性癫癎(19.35%)。本组患者中病灶位于皮层者继发性癫癎的发生率为12.18%,皮层下病灶者继发性癫癎的发生率为1.62%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脑卒中是中老年人癫癎的常见病因。癫癎的发生率与卒中部位密切相关。     

Adefovir抗乙型肝炎病毒的体外实验研究

目的在体外细胞培养研究中,观察Adefovir抗HBV的作用.方法以乙型肝炎病毒(HBV)DNA转染的细胞株2.2.15细胞为靶细胞,给药后通过检测细胞培养液中HBsAg、HBeAg和HBV DNA,对Adefovir抗HBV效果进行评价.在2.2.15细胞培养基中分别加入不同浓度的药物,培养数天后检测上清液中HBsAg和HBeAg滴度,细胞DNA抽提液检测HBV DNA;用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法检测药物对细胞的毒性.结果 Adefovir加入细胞培养12d,最大无毒浓度为20μg/ml,对HBsAg抑制率为52.44%,对HBeAg抑制率为54.87%,对HBV DNA抑制率为45.68%,并有剂量依赖效应.结论 Adefovir在体外细胞培养的实验中有抗HBV病毒作用.