抑制Caspase-8基因表达对减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用

目的 观察抑制半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶8(Caspase-8)基因的表达对减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用.方法 构建针对大鼠Caspase-8基因的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体.将Lewis大鼠随机分为3组,每组8只.(1)假手术组:麻醉后,取腹部正中切口,缝合关腹;(2)磷酸盐缓冲液(PBS液)组:阻断肝门血流前48 h经门静脉注射PBS液1 ml,然后行肝脏缺血再灌注;(3)shRNA组:阻断肝门血流前48 h经门静脉注射Caspase-8 shRNA 50 μg(总体积为1 ml),然后行肝脏缺血再灌注.肝脏缺血再灌注的方法为阻断大鼠70%入肝血流40min.于再灌注6 h、12 h、24 h、3 d、5 d、7 d时检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平;检测肝组织中Caspase-8 mRNA的表达、细胞凋亡情况、丙二醛(MDA)以及超氧化物岐化酶(SOD)的含量.结果 与PBS液组比较,shRNA组再灌注6、12、24 h,血清中ALT和AST水平显著降低(P<0.05);肝组织中Caspase-8 mRNA水平、肝细胞凋亡指数(shRNA组和PBS液组分别为22.33%±4.28%和35.24%±2.33%)以及肝组织中MDA含量[shRNA组和PBS液组分别为(94.5±11.2)nmol/mg和(133.5±12.4)nmol/mg]均显著降低(P<0.05),而肝组织中SOD活性显著升高[shRNA组和PBS液组分别为(21.6±3.7)U/mg和(12.2±3.1)U/mg,P<0.05].结论 通过RNA干扰Caspase-8基因的表达可以抑制肝细胞凋亡的发生,减轻肝脏缺血再灌注损伤.     

儿童肾移植术后急性排斥反应相关影响因素的单中心队列研究

目的总结单中心儿童肾移植后急性排斥反应(acute rejection, AR)发生情况和对移植物及受者存活的影响及AR发生的相关因素。方法回顾性分析华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所2014年5月1日至2022年5月20日行儿童肾移植155例的临床资料, 排除12例术后1周内发生移植肾血栓受者后, 最终纳入143例。根据是否发生AR分为AR组(29例)和无AR组(114例), 比较两组供受者的基本资料和移植肾/受者存活率, 采用逻辑回归分析AR的相关影响因素。结果 143例儿童肾移植中, 130例(90.9%)来自尸体供肾, 其中儿童供肾120例(83.9%)。27例(18.9%)为婴幼儿受者(年龄<3岁)。中位随访时间为33.0(14.0, 58.6)个月, 29例(20.3%)出现34次AR。AR组的再次移植、儿童供肾和兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白(rabbit anti-human thymocyte globulin, rATG)诱导比率分别为27.6%(8/29)、96.5%(28/29)和79.3%(23/29), 均显著高于无AR组的7.9%(9/114...     

重组人抗HBsAg-Fab阻断肝移植后HBV再感染的体外研究

目的:研究重组合成抗乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原（HBsAg）的小分子抗体Fab阻断肝移植后乙肝病毒再感染的作用效应。方法:通过体外抗原黏附实验，补体毒实验和病毒感染实验，计算抗原黏附率、细胞死亡率和细胞感染率,进行统计分析，研究抗体Fab的功能效应。结果:在有、无重组抗体存在时，组间的抗原黏附率、细胞死亡率及细胞感染率对比，差异均有显著性（均为P<0.05）,实验数据在统计学上有显著差异。结论:重组合成抗体Fab能阻断抗原对靶细胞的黏附，能介导补体毒杀伤靶细胞，降低HBV对人原代肝细胞的感染率。基因重组的小分子抗体Fab的体外效应实验为其在体内临床应用打下基础。     

肾移植术后发生淋巴细胞增生性疾病一例

肾移植受者长期应用免疫抑制剂，可导致其恶性肿瘤的发生率增加。据统计，我国1977年至2003年共施行肾移植13969例，术后发生恶性肿瘤210例，发生率为1．5％，其中淋巴瘤12例，占5．7％。2006年4月，我院收治了1例肾移植术后经病理检查确诊为淋巴细胞增生性疾病（PTLD）的受者，报道如下。     

NOD小鼠未成熟树突状细胞体外诱导淋巴细胞生成并扩增调节性T细胞的研究

目的 探索非肥胖糖尿病(non-obese diabetic,NOD)小鼠未成熟树突状细胞(immature dendritic cell,imDC)诱导并扩增调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的优化方案.方法 分离、培养NOD小鼠骨髓来源的imDC和淋巴细胞,并进行混合淋巴细胞培养,分别加...     

输注供者抗原特异性调节性T淋巴细胞延长小鼠胰岛移植物的存活时间

目的 研究体外扩增获得的供者抗原特异性调节性T淋巴细胞(Treg细胞)对小鼠同种胰岛移植物存活时间的影响.方法 建立从Balb/c小鼠到C57小鼠的胰岛移植模型,通过观察移植后小鼠血糖情况来判断移植胰岛的存活时间.受鼠制成糖尿病模型后分为3组.对照组:不给予任何处理,只观察血糖变化;单纯胰岛移植组:移植胰岛,但不输注Treg细胞;实验组:术前1 d静脉给予1×106个供者特异性Treg细胞,然后行胰岛移植.结果胰岛移植后,对照组小鼠血糖持续高于16.7 mmol/L;单纯胰岛移植组小鼠血糖于术后1～2 d全部降至正常,到7～11 d时陆续开始升高,并维持在术前水平,存活时间为(8.50±1.6)d;实验组小鼠血糖于术后2 d内降至正常,之后维持在较低水平,至第21天开始有小鼠血糖升高超过16.7 mmol/L,存活时间为(26.2±3.9)d,明显长于单纯胰岛移植组(P＜0.05).结论 输注供者抗原特异性Treg细胞可以明显延长移植胰岛的存活时间,在胰岛移植耐受中有积极的作用.

Abstract：

Objective To investigate the effects of donor-specific regulatory T cells (Treg) transfusion on islet allograft survival. Methods Allogeneic fresh islets from Balb/c mice were transplanted to streptozotocin-induced diabetic C57 mice. The survival of islet allografts was observed. The experiment was divided into 3 groups: control group, nothing had been done to the recipients; simple islet transplantation group, the recipients received the islet transplantation only; experimental group, the recipients were given 1 ×106 Treg, then received islet transplantation. Results Blood glucose (BG) was above 16. 7 mmol/L after islet transplantation in control group; In simple islet transplantation group,BG level returned to normal level 1 to 2 days after transplantation, and hyperglycemia appeared 7 to 11 days after transplantation and maintained as the same as that before transplantation; In experimental group, BG level returned to normal level 2 days after transplantation and maintained at a low level,and at the 21st day after transplantation BG level was over 16. 7mmol/L in some recipients. Islet allograft survival in experimental group was significantly prolonged as compared with simple islet transplantation group. Conclusion Donor-specific Treg transfusion could prolong the islet allograft survival,and maybe have positive effect on tolerance induction of islet transplantation.     

大鼠供肾转染反义ERK2基因减缓肾移植后慢性移植肾肾病的作用及机制

目的 研究腺病毒介导的反义ERK2(A-dant-ERl(2)基因转染供肾对减缓肾移植后发生慢性移植肾肾病(CAN)的作用及机制.方法 建立大鼠间肾移植模型.按供肾移植前处理方式的不同分为对照组、空载病毒组和基因转染组,每组6只.对照组供肾灌注无菌HTK液0.5 ml,空载病毒组供肾灌注含5x109>pfu LaeZ基因腺病毒(Ad-LacZ)的HTK液0.5 ml,基因转染组供肾灌注含5x 109>pfu Adanti-ERK2的HTK液0.5 ml.肾移植术后24周行移植肾的病理学观察,免疫组织化学法观察肾小管上皮细胞表面标志蛋白E-Cadherin、Vimentin、TβRⅠ的表达以及CD4+、CD8+T淋巴细胞和ED-1+细胞的浸润情况;酶联免疫法检测受者血清中转化生长因子β1>(TGF-β1>)的含量.结果 肾移植术后24周,对照组和空载病毒组移植肾呈CAN表现;肾小球硬化,肾小管萎缩明显,伴严重间质纤维化以及明显的CD4+、CD8+T淋巴细胞和ED-1+细胞浸润;病变区肾小管上皮细胞E-Cadherin表达减少,Vimentin、TβRⅠ表达显著增多.基因转染组移植肾间质内仅有少量CD4+、CD8+T淋巴细胞和ED-1+细胞浸润;肾小管上皮细胞E-Cadherin表达正常.对照组和空载病毒组血清中TGF-β1>,含量明显高于基因转染组.结论 Adanti-ERK2基因转染移植肾可减缓CAN的发生,对移植肾具有保护作用.这种保护机制可能与减少炎症细胞的浸润、下调TGF-β1>,等致纤维化因子的表达以及抑制肾小管上皮细胞向间充质细胞的转化有关.     

器官移植病理学临床技术操作规范(2019版)—心脏移植

为了进一步规范器官移植病理学临床技术操作,中华医学会器官移植学分会组织器官移植专家和移植病理学专家,从移植心脏心内膜心肌活组织检查的临床操作规范、移植心脏排斥反应的病理学诊断临床技术操作规范、移植心脏的心肌缺血损伤的病理学诊断临床技术操作规范、移植心脏血管病的病理学诊断临床技术操作规范、移植后淋巴组织增生性疾病的病理学诊断临床技术操作规范、移植心脏心内膜心肌活组织检查病理报告的基本内容规范、移植心脏心内膜心肌活组织检查病理学诊断的难点与局限性、移植心脏病理学相关的其它临床技术操作规范等方面,制定器官移植病理学临床技术操作规范(2019版)之移植心脏病理学临床技术操作规范。     

FTY720,40-氧-(2-羟乙基)-雷帕霉素和环孢素A延长小鼠心脏移植物存活时间的对比研究

目的 FTY720和40-氧-(2-羟乙基)-雷帕霉素(RAD)是两种新型免疫抑制剂。为评估这两种药物的效果,我们以小鼠心脏移植为模型,对比观察了这两种药物和环孢素A(CsA)对移植物存活时间的影响。方法 供体为BALB/C小鼠,受体为C57BL/6小鼠,受鼠随机分为4组,每组6只:A组空白对照;B组每日管饲CsA 10 mg/kg体重;C组每日管饲RAD 3 mg/kg体重;D组每日管饲FTY 3 mg/kg体重。各服药组均由移植当日开始喂药,至移植心停跳或术后14 d停药。结果 各组的存活天数分别为:A组6、7、8、8、9、9;B组9、9、10、11、12;C组10、12、13、13、14;D组10、12、16、16、17、18。B、C组各有1例带心死亡。所有移植心都出现程度不同的急性排斥反应征象。结论 单独使用RAD或FTY可显著延长小鼠心脏移植物的存活时间。在各所选剂量上,CsA和RAD差异无显著性(P>0.05),FTY的效果明显优于CsA和RAD。FTY和RAD是较有前途的新型免疫抑制剂。     

持续性血液透析治疗慢性肾功能衰竭的疗效观察

目的:探讨与对比不同持续性血液透析治疗慢性肾功能衰竭的疗效。方法:选择80例慢性肾功能衰竭患者,根据随机数字表法分为治疗组与对照组各40例。对照组给予传统低通量持续性血液透析,治疗组给予高通量持续性血液透析。结果:两组治疗后的血清Scr与BUN值与治疗前对比都呈现明显下降的趋势(P<0.05),同时治疗后治疗组的血清Scr与BUN值明显低于对照组(P<0.05)。结论:相对于低通量血液透析,持续性高通量血液透析治疗慢性肾功能衰竭能有效促进肾功能的恢复,值得推广应用。