Fgl2凝血酶原酶在小鼠免疫器官中的表达

目的探讨小鼠免疫器官胸腺、脾脏及淋巴结组织中Fgl2凝血酶原酶基因转录及蛋白表达水平。方法使用RT-PCR分析Fgl2凝血酶原酶基因转录水平;免疫组化检测淋巴器官标本Fgl2凝血酶原酶表达;双色免疫荧光分析Fgl2凝血酶原酶与Foxp3表达的关系。结果RT-PCR结果证实正常的胸腺、脾脏及淋巴结有Fgl2凝血酶原酶基因转录。免疫组化的结果则表明,这些淋巴器官中有大量的Fgl2凝血酶原酶表达。免疫荧光分析结果显示胸腺及脾脏内的Fgl2~+细胞为Foxp3~-细胞。结论免疫器官内Fgl2凝血酶原酶的表达可能参与了T细胞发育及功能。此外,Fgl2不直接参与Foxp3~+调节性T细胞的抑制功能。     

Cad—Ⅱ基因转染的兔骨髓间充质干细胞自体移植术后的表达研究

[目的] 研究Cad-Ⅱ基因转染的骨髓间充质干细胞在骨缺损局部移植后Cad-Ⅱ基因的表达变化.[方法] 20只日本长耳白兔制作双侧髂骨缺损模型,将体外培养扩增的自体骨髓干细胞经脂质体介导转染Cad-Ⅱ基因,再与胶原海绵复合移植于髂骨缺损处,术后4周取材,RT-PCR和免疫组化方法检测Cad-Ⅱ基因的表达.[结果] 术后4周各组骨缺损区已有新骨生成,Cad-Ⅱ基因转染移植组和对照组均检测到Cad-ⅡmRNA的表达,但转染组Cad-Ⅱ mRNA的表达显著高于对照组(P＜0.01).免疫组织化学染色结果显示,与对照组比较转染移植各组Cad-Ⅱ阳性细胞数量也显著增多(P＜0.01).[结论] 转染了 Cad-Ⅱ基因的骨髓间充质干细胞使骨缺损区Cad-Ⅱ基因的表达增高.     

腺病毒介导的TGF-β1基因在兔髓核细胞中的表达

目的检测腺病毒介导的转化生长因子(transforming growth factor β1, TGF-β1)基因在兔髓核细胞中的表达及其对蛋白多糖的调节作用.方法体外分离培养兔髓核细胞,以腺病毒为载体将TGF-β1基因转染至髓核细胞内,RT-PCR和免疫组化方法检测TGF-β1的表达,并检测其对髓核细胞基质中蛋白多糖含量的影响.结果兔髓核细胞贴壁及生长的速度均十分缓慢,Ad-TGF-β1转染的髓核细胞内可检测到TGF-β1基因的表达,并且可持续到8周,Ad-TGF-β1转染后的髓核细胞合成蛋白多糖的量增加.结论腺病毒介导的TGF-β1基因可以在髓核细胞内得到持续的表达,并且产生明显的生物学效应.     

可溶性B7-H3在人脑创伤合并骨折愈合中的表达及意义

目的检测外周血中可溶性B7-H3在脑创伤合并骨折,单纯骨折和单纯脑损伤患者中的表达,并研究其对间充质干细胞分化为成骨细胞的作用。方法 ELISA检测可溶性B7-H3及骨折愈合的标志物Cbfa1在脑创伤合并骨折、单纯骨折,单纯脑创伤和正常志愿者外周血中的表达,茜素红、real-time PCR检测不同浓度重组B7-H3蛋白对间充质干细胞向成骨细胞分化的作用。结果可溶性B7-H3在脑创伤合并骨折及单纯脑创伤患者中的表达明显高于单纯骨折和正常人中的表达;可溶性B7-H3在外周血中的含量与脑创伤严重程度相关;重组B7-H3蛋白可促进间充质干细胞向成骨细胞的分化,并随着质量浓度的升高其促分化能力增强。结论脑创伤导致的外周血中升高的可溶性B7-H3促进了骨折愈合。     

Cad-Ⅱ基因转染的hMSCs在异种骨基质材料上的粘附和增殖研究

目的 探讨经Cad-Ⅱ(OB-Cadherin,成骨细胞特异性钙粘蛋白)基因转染的人骨髓间允质干细胞(humanmarrow mesenchymal stem cells,hMSCs)在骨基质材料上的粘附性和增殖情况.方法 将脂质体介导的Cad-Ⅱ cDNA转染体外分离培养的hMSCs,再将已转染和未转染的hMSCs分为实验组和对照组,分别与异种冻十脱钙骨基质材料复合体外构建组织工程骨,通过相差显微镜、扫描电镜及MTT检测对比观察两组细胞在材料上的黏附和增殖情况.结果 2组细胞均能在骨基质材料上粘附、伸展、增殖,其中增殖情况无明显差异(P>0.05),但Cad-Ⅱ基因转染组的上架细胞数和上架率(84.5%),显著高于未转染组(71.7%),差异显著(P<0.05).结论 Cad-Ⅱ基因转染能提高种子细胞在支架材料上的粘附性,但对细胞增殖无影响.     

股骨近端锁定钢板治疗老年股骨转子间骨折的疗效评价

目的评价股骨近端锁定型钢板（LPFP）治疗老年股骨转子间骨折的疗效及并发症。方法对2009年1月至2011年3月使用股骨近端锁定型钢板治疗的老年股骨转子间骨折患者65例临床资料进行回顾性分析。结果所有65病例患者均获得随访,平均随访时间为11个月。骨折临床愈合时间平均12周。无钢板及螺钉脱出、断裂、内固定物松动、骨折不愈合或延迟愈合、髋内翻畸形等情况发生。治疗后Harris评分：优46例,良14例,可5例,优良率为92．9％。结论LPFP是一种的治疗老年股骨转子间骨折的有效方法,具有内固定牢固、操作方法简便等优点。     

共刺激分子HVEM在类风湿关节炎滑膜组织内的表达及分布研究

目的探讨TNF家族共刺激分子HVEM(herpesvirus entry mediator)在类风湿关节炎(RA)患者滑膜组织内的表达及分布。方法使用免疫组化法检测RA患者滑膜组织HVEM的表达;并使用免疫荧光法检测HVEM的细胞定位及分布。结果免疫组化结果证实,RA患者滑膜组织中有大量的HVEM阳性细胞,形态观察提示这些阳性的细胞主要是毛细血管、滑膜细胞、局部淋巴结T细胞及巨噬细胞;免疫荧光分析进一步表明这些HVEM+细胞主要为CD3+T细胞,CD68+巨噬细胞,少数CD31+内皮细胞也表达HVEM,但其不表达于CK-18+上皮细胞。对比其他B7家族共刺激分子在滑膜组织中的分布,免疫荧光发现HVEM共表达于B7-H3+血管,但不表达于B7-H1+、B7-DC+、B7-H4+及Z39Ig+细胞。结论关节炎滑膜组织内有大量HVEM阳性细胞,提示HVEM有可能参与并调节了关节炎的病理进程。     

抑制脊髓再生的因素

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)常造成肢体功能障碍及截瘫等严重后果,是治疗的难题,是临床医生关注的焦点.对脊髓损伤的再生能力的研究已成为热点.那么脊髓损伤后有无再生能力?如果有再生能力,那又是什么因素影响脊髓再生的?本文对脊髓再生能力及其抑制因素进行总结.     

缓释万古霉素三维支架修复兔感染性骨软骨缺损

背景:大量研究证实组织工程支架几乎可完全修复骨软骨缺损,但当骨软骨缺损合并感染时,即使前期经过彻底的清创,单纯骨软骨组织工程支架的修复效果往往不理想。目的:制备盐酸万古霉素缓释微球丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架,观察其对兔股骨远端感染性骨软骨缺损的修复效果。方法:①采用乳化溶剂挥发法制备盐酸万古霉素缓释微球;将不同质量(7.5,10,12.5 mg)的缓释微球分别与丝素蛋白-壳聚糖-纳米羟基磷灰石溶液混合,利用化学交联法制备盐酸万古霉素缓释微球丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架,表征支架的孔隙率、吸水膨胀率、热水溶失率及体外药物缓释等。②将45只新西兰大白兔随机分为空白组、对照组、实验组,每组15只,均建立右后肢股骨远端骨软骨缺损并感染模型,空白组不作任何处理,对照组缺损处植入丝素蛋白-壳聚糖-纳米羟基磷灰石支架,实验组缺损处植入盐酸万古霉素缓释微球(10 mg)丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架。术后1周,检测血液样本C-反应蛋白、白细胞水平;术后4,8,12周取术区组织,分别进行大体观察与病理学观察。结果与结论:①随着缓释微球含量的增加,支架的孔隙率降低,组间比较差异有显著性意义(P<0.05);3组支架的孔径大小、吸水膨胀率、热水溶失率比较差异均无显著性意义(P>0.05);3组支架体外均可持续释放盐酸万古霉素达30 d以上。②实验组兔血液样本C-反应蛋白、白细胞水平均低于空白组、对照组(P<0.05);实验组兔术后各时间点的大体软骨修复情况明显好于空白组、对照组;苏木精-伊红、Masson、阿利新蓝及Ⅱ型胶原免疫组化染色显示,实验组兔术后各时间点的骨软骨修复效果明显优于空白组、对照组。③结果表明,盐酸万古霉素缓释微球丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架能有效促进开放性骨软骨缺损的修复。     

经横突侧腹入路显露兔腰椎的实验研究

目的探讨一种改进的兔腰椎侧腹入路-经横突入路及其技术路线。方法实验家兔麻醉后，侧卧位，在横突前作纵行切口，分离腹外斜肌，经腹膜外即可显露兔第2腰椎至第6腰椎的椎体及横突部。结果共完成67例手术，切口愈合好，均无腹膜破裂及切口感染等并发症，所有动物均顺利存活。结论经横突侧腹入路显露兔腰椎的方法具有解剖位置恒定、操作简单、并发症少等优点，可用于兔腰椎椎体及横突等部位的手术显露。