PI3K/AKT信号转导途径、NF-KB蛋白及FSH在卵巢癌发展作用中的意义

目的探讨卵泡刺激素(FSH)促进上皮性卵巢癌细胞增殖、侵袭的作用途径,以期从分子水平上进一步了解卵巢癌的发病机制。方法培养正常人卵巢上皮细胞(HOSE细胞)、卵巢浆液性囊腺癌细胞株(SKOV3细胞),粘液性囊腺癌细胞株(3AO细胞),取对数期进行实验,分为3组:对照组、FSH组、LY294002组、FSH+LY294002组。采用四甲基偶氮蓝法(MTT法)检测不同浓度FSH刺激下的HOSE细胞、SKOV3细胞、3AO细胞的增殖情况,并筛选出峰浓度;在FSH峰浓度实验条件下,体外侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力;通过蛋白印迹法(Western-blot)检测各组细胞的卵泡刺激素受体(FSHR)、磷酸化Akt(p-Akt)、NF-KB的表达水平。结果 40U/L浓度下的FSH处理SKOV3细胞、3AO细胞,其细胞增殖率最高。FSH组的细胞侵袭能力显著高于其他各组,即SKOV3细胞、3AO细胞的穿过细胞数较其他各组显著增高,P0.05。与对照组相比,FSH组SKOV3细胞中p-Akt蛋白表达水平和NF/KB蛋白表达水平均显著增高,而FSH+LY294002组p-Akt蛋白表达水平和NF/KB蛋白表达水平较LY294002组的表达也明显升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论在卵巢癌的发生发展中,PI3K/Akt信号被激活、NF/KB活性增加,从而使得卵巢癌细胞的增殖和侵袭能力增强,因此,PI3K/Akt信号通路活化和NF/KB活性增强在卵巢癌的发生中有重要意义。     

基于足细胞的保护作用探讨中医药治疗膜性肾病作用机制的实验研究进展

基于足细胞的保护作用探讨中医药治疗膜性肾病作用机制的实验研究进展。膜性肾病的主要病理特征表现为肾小球足细胞上皮下免疫复合物沉积及肾小球基底膜和足细胞损伤。中医药可通过下调PI3K/AKT/mTOR、TLR4/NF-κB、ERK/cPLA2、TGF-β1/Smad等足细胞相关信号通路表达,上调AMPK/mTOR足细胞相关信号通路表达,提升Nephrin、Podocin等足细胞相关蛋白的含量及调控足细胞相关凋亡基因(Bcl-2和Bax)的表达从而减轻蛋白尿,降低炎症因子和改善肾功能和脂质代谢,提升血清白蛋白含量,减轻肾脏纤维化和足细胞损伤,进而延缓肾脏病的进展。作者就近五年来中医药基于足细胞的保护作用治疗膜性肾病的基础实验研究进展展开综述,以期对临床膜性肾病的治疗提供参考。     

槐杞黄颗粒干预慢性肾脏病的机制与临床研究进展

慢性肾脏病是由于各种因素导致的以肾脏结构损伤及功能障碍（病史>3个月）为主要临床特征的慢性疾病。传统中医将慢性肾脏病归属于“水肿”“癃闭”“虚劳”“关格”等范畴,其病机多归结为“本虚标实”,本虚为肺脾肾三脏亏虚,标实则为湿瘀互结,浊毒内蕴。槐杞黄颗粒是由槐耳菌质、枸杞子、黄精所组成的一类真菌类中成药,具有提升免疫力和保护肾功能等多种药理作用,临床普遍用于癌症、慢性肾脏病及呼吸系统等疾病的治疗。作者通过对既往的文献研究进行发掘整理后发现,槐杞黄颗粒可通过多种方式干预慢性肾脏病的进展,如保护肾小球足细胞、抑制肾小球系膜细胞增殖、抗肾间质纤维化、减轻肾脏炎症反应、抗氧化应激、调控肾脏细胞凋亡及调节免疫系统功能等。临床中槐杞黄颗粒的应用常常建立在西医常规治疗的基础之上,在儿童肾病综合征、糖尿病肾病、过敏性紫癜性肾炎、免疫球蛋白A(IgA)肾病、慢性肾衰竭等多种慢性肾脏病的治疗中均取得了显著疗效。目前,多位学者对槐杞黄颗粒干预慢性肾脏病的机制和临床治疗进行了深入的探索,也取得了不错的成果,但近年来却少有学者对其作详尽的归纳整理,因此笔者基于槐杞黄颗粒干预慢性肾脏病的机制和临床研究两方面对现...     

槐杞黄颗粒干预狼疮性肾炎的物质基础与作用机制：网络药理学和分子对接技术

[目的] 基于网络药理学和分子对接技术探究槐杞黄颗粒干预狼疮性肾炎的物质基础与作用机制。[方法] 通过TCMSP、BATMAN-TCM获取槐杞黄颗粒的主要活性成分及作用靶点;通过GeneCards、OMIM、TTD获取狼疮性肾炎疾病靶点;利用VENNY平台获取药物和疾病的交集靶点;运用Cytoscape软件构建药物-活性成分-交集靶点-疾病网络图;将交集靶点录入STRING平台和Cytoscape软件中构建蛋白互作网络图;利用Metascape平台进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析;利用AutoDock Tools软件进行分子对接操作;最后利用Pymol软件对分子对接结果进行可视化分析。[结果] 共获取到56个槐杞黄颗粒的有效成分和211个成分作用靶点,其中核心活性成分以槲皮素、山柰酚、黄芩素、β-谷甾醇、黄豆黄素等作为代表;获取到狼疮性肾炎的疾病靶点1 822个;得到117个药物与疾病的交集靶点;通过构建蛋白互作网络图获取到核心靶点以血管内皮生长因子A（VEGFA）、c-fos原癌基因蛋白（FOS）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、环氧化酶2（PTGS2）、靶向核因子κB抑制剂α（NFKBIA）等作为代表;GO功能富集分析共获取1 926条结果,KEGG通路富集分析得到195条结果,涉及到的主要通路以糖尿病并发症中的糖基化终末产物（AGE）-糖基化终末产物受体（RAGE）信号通路、肿瘤坏死因子（TNF）信号通路、白细胞介素（IL）-17信号通路、辅助性T 细胞17（Th17）细胞分化信号通路、低氧诱导因子（HIF-1）信号通路、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K） -蛋白激酶B（Akt）信号通路等为主。分子对接的结果显示,β-谷甾醇与MMP-9、VEGFA、FOS,槲皮素与VEGFA、FOS,黄豆黄素与FOS,山奈酚与MMP-9等对接后结合能相对较小,提示这可能是槐杞黄颗粒干预狼疮性肾炎的关键作用途径。[结论] 研究初步揭示了槐杞黄颗粒可通过多成分、多靶点、多通路来干预狼疮性肾炎的进程。     

德尔菲法构建医患纠纷数据库的研究

医疗纠纷是指患者及其家属与医疗机构之间,因对诊疗、护理过程中发生的不良后果及其发生的原因认识不一致而导致的分歧或争议[1]。随着人民群众自我保护意识及对医疗卫生保健的期望值不断提高,各级医疗机构面临着医疗纠纷陡增之势。上海市一项调查显示,近几年的医疗纠纷以每年11%的速度逐年递增[2],给患者和家属带来身心痛苦的同时,扰乱医疗秩序,影响社会和谐。各级医院对自身发生的纠纷进行了总结、分析,制定了部分规章制度提高医疗服务满意度,但没有     

早孕期绒毛细胞培养和染色体制备方法的应用研究

目的 研究早孕期绒毛细胞长期培养及染色体制备方法,评价其在产前诊断中的可行性.方法 回顾性分析2001-01-2005-12北京协和医院77例早孕期绒毛细胞培养和染色体制备用于产前细胞遗传学诊断的病例.结果 平均培养时间为5～7d,一般10d可以发报告,77例病例中有1例培养失败,培养成功率98.7%,培养过程中细菌污染率为0,母体组织污染率为0.发现异常核型5例,胎盘限制性嵌合体2例.结论 绒毛细胞长期培养法和染色体制备方法简单、技术稳定、结果可靠,可应用于产前诊断.     

锌和维生素A对酒精致大鼠睾丸损伤的保护作用

[目的]观察锌和维生素A(VA)对长期摄入酒精致大鼠睾丸损害的保护作用及可能机制.[方法]40只健康雄性成年SD大鼠随机分为对照组、酒精组、酒精+葡萄糖酸锌组、酒精+VA组,各组每日分别灌胃给予酒精0、7.5 g/kg、酒精7.5 g/kg+葡萄糖酸锌7.7mg/kg、酒精7.5 g/kg+VA50μg/kg,连续13周.对各组大鼠的精子计数、精子活动率、精子畸形率、血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)含量进行检测,光、电镜观察睾丸的形态改变.同时测定睾丸线粒体中丙二醛(MDA)的产生量,免疫组织化学法检测睾丸组织中iNOS的表达.[结果]与对照组相比,酒精组大鼠精子计数减少,精子活动率下降,精子畸形率升高(P＜0.05),血清T、LH、FSH水平明显降低(P＜0.05);睾丸生精上皮结构破坏,支持细胞和各级生精细胞均有退化变性;睾丸生精细胞iNOS表达明显增强(P＜0.05);睾九线粒体丙二醛含量明显升高(P＜0.05).与酒精组相比,葡萄糖酸锌组和VA组精子计数、精子活动率有所上升,生精细胞退化变性程度减轻,睾丸生精细胞iNOS表达减弱(P＜0.05),睾丸线粒体MDA减少,但血清T、LH、FSH水平仍低于对照组.[结论]长期摄入酒精不仅抑制精子发生和睾酮合成,还使下丘脑-垂体轴生殖内分泌功能受损.补充锌和VA可以限制酒精引起的睾丸过氧化损伤,保护睾丸的生精功能,但仍有生殖内分泌激素合成障碍.     

复方消经痛胶囊对缩宫素诱发大鼠痛经模型的镇痛作用

目的:探讨复方消经痛胶囊(黄芪、白芍、人参、熟地、川芎)对缩宫素所致大鼠痛经的镇痛作用及作用机制.方法:SD大鼠60只,随机分为空白组、模型组、复方消经痛胶囊高、中、低(2.0、1.0、0.5 g/kg)剂量组和阳性药对照组(田七痛经胶囊2.0 g/kg).除正常对照组外,其余各组大鼠连续皮下注射己烯雌酚10 d,从注射己烯雌酚的第4天开始,除模型组灌胃等体积的蒸馏水,各组灌胃给药,连续7 d.末次给药40 min,每只大鼠腹腔注射缩宫素0.2U,观察大鼠30 min内扭体次数和扭体反应发生率;末次给予催产素1 h后,麻醉大鼠,取血3 mL,制备血清,测定一氧化氮(NO)和MDA含量;超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性;另采血3 mL制备血浆,测定6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)和TXB2的含量;取血后,剥离大鼠子宫,加生理盐水制备子宫匀浆,测定内皮素(ET-1)的含量.结果:与模型组比较,复方消经痛胶囊组在给药30 min内大鼠的扭体次数和扭体发生率显著降低;明显提高血清SOD、GSH-PX的活性,降低MDA含量;提高NO的含量;血浆6-keto-PGF1α含量升高,TXB2含量降低;子宫组织中ET-1的含量降低.结论:复方消经痛胶囊对缩宫素所致大鼠痛经模型具有镇痛作用,其作用机制可能与抗氧化,降低前列腺素和内皮素含量,升高NO和TXA:含量等一系列神经、内分泌的综合性调节有关.     

复方消经痛胶囊对动物子宫活动的影响

目的：观察复方消经痛胶囊对离体大鼠子宫平滑肌及家兔在体子宫活动的影响。方法：离体大鼠子宫平滑肌条置于含有洛氏营养液的麦氏浴槽内,在浴槽内洛氏液中加入终浓度分别为12.48,6.24,3.12 mg·mL^-1的复方消经痛胶囊；采用十二指肠给2.0,1.0,0.5 g·kg^-1的受试药和2.0 g·kg^-1的田七痛经胶囊,分别观察药物对大鼠离体子宫和家兔在体子宫收缩频率、幅度、活动力的影响。结果：复方消经痛胶囊可明显抑制大鼠正常离体子宫的收缩频率、幅度、活动力；能降低由于缩宫素引起的大鼠离体子宫收缩增强作用；能降低在体家兔子宫的收缩频率、幅度、活动力；同时能对抗缩宫素引起的家兔在体子宫收缩增强作用。结论：复方消经痛胶囊可用于治疗子宫平滑肌痉挛所致的痛经。