高产谷胱甘肽酵母菌的诱变选育以及发酵条件的初步研究

谷胱甘肽是生物体内重要的活性3肽.对野生酵母菌进行紫外结合激光诱变筛选,得到一株Sac-charomyces cerevisiae2-2-2谷胱甘肽高产酵母菌.同时对加入前体氨基酸发酵条件进行了优化,使得谷胱甘肽产量提高了68.7%.     

两性霉素B的新型制剂及其作用机制

1 前言真菌感染是临床上较顽固的一类疾病,常见的皮肤病如体股癣、手足癣等就是真菌感染体表造成的.一般情况下,真菌不侵入机体组织,但长期大剂量广谱抗生素、激素、免疫抑制剂和抗癌抗生素的广泛使用,由此而引起的条件致病的内脏真菌感染更趋严重,特别是当机体免疫力下降时(如罹患艾滋病),真菌就能侵人体内组织引起严重疾病,尤其是新型隐球菌(Cryptoccus neoformans)和念珠菌(Candida)的感染,是艾滋病等免疫缺陷患者死亡的重要原因之一.目前艾滋病患者的增多,使这一问题更加激化,人们急切需要高效低毒的抗真菌药.与治疗细菌病的抗生素比较,抗真菌的化学治疗药还非常缺乏.迄今对内脏真菌病有效的,即能全身投用的抗真菌抗生素只有两性霉素B(am-Photericin B,AmB),它由结节链霉菌产生,是唯一可作静脉滴注的多烯类抗生素,对念珠菌、隐球菌、毛霉、曲霉、组织胞浆菌、芽生菌、球孢子菌等有强烈的抗菌作用.     

金属β-内酰胺酶TMB-1三维结构模建及活性位点的分析

目的：模拟金属D-内酰胺酶TMB-1三维结构,分析其结构特点与水解活性之间的关系。方法：运用DS2．5版软件搜索模板、序列比对和构建模型,用Ramanchandran图和3DProfile程序验证模型,经分子动力学优化与水解后氨苄西林Libdock对接,再经动力学优化后与NDM-1重叠分析模型活性位点关键残基。结果：经Ra—manchandran图和3DProfile分析,表明TMB-1蛋白模建结构较为合理;重叠分析显示其空间结构为与其他金属D-内酰胺酶类似的αββα折叠,其锌配位残基具有高度的序列和结构保守性。结论：TMB-1相比NDM-1活性位点Loop3和Loopl0上氨基酸残基自由度的降低可能是造成特异水解活性重要原因之一。     

VIM型金属β-内酰胺酶及抑制剂研究进展

VIM金属β-内酰胺酶是1种能水解几乎所有(除氨曲南等单环外)的β-内酰胺类抗生素,也是已报道蛋白质中与新德里金属β-内酰胺酶(NDM-1)序列相似性最高的一类获得性金属β-内酰胺酶。VIM-1与NDM-1相似,前者基因易于在细菌间传播和扩散,迄今还未发现临床有效的抑制剂,所以研发新型有效的抑制剂迫在眉睫。综述了近年来VIM序列、结构特点、耐药机制及相关抑制剂的最新研究进展,为设计、筛选、开发新型VIM-1抑制剂奠定基础,亦可为深入了解NDM-1设计开发其抑制剂提供帮助。     

金属β-内酰胺酶的研究进展

金属β-内酰胺类酶是一类需要金属离子协助才能发挥催化活性的一类广谱β-内酰胺酶,它能水解包括碳青霉烯在内的几乎所有的β-内酰胺类抗生素,且不被临床所用的β-内酰胺类抗生素所抑制。由于该酶位于质粒（整合子）上,极易在细菌中扩散,近期发现的携带NDM-1金属β-内酰胺酶超级细菌证实了这一担忧。因此,本文从分类、结构、催化机制以及进化等方面对金属β-内酰胺酶的研究进展进行了综述,希望对抗菌治疗的研究提供帮助。     

“超级细菌”NDM-1的发现及研究进展

近日,“超级细菌”掀起了即甲型H1N1流感后全球的又一新“浪潮”,引起人们的一阵恐慌.“超级细菌”是具有多重耐药性细菌的总称,NDM-1是细菌携带的一种抗性基因,具有极强的耐药性,能水解几乎所有的β-内酰胺类抗生素,该细菌属一种新型的“超级细菌”.目前临床治疗受到极大的威胁,新型抗生素的研发迫在眉睫.本文就其发现、特点...     

金属β-内酰胺酶催化机制的研究进展

金属β-内酰胺酶（MBLs）属于B型β-内酰胺酶,携带该酶基因的细菌表现出对多种抗生素的耐药性。由于目前临床上还没有有效的抑制剂出现,所以在面对细菌对抗生素的耐药作用时,人们显得束手无策。金属β-内酰胺酶催化水解包括青霉素、头孢菌素、碳青霉烯类和头霉素类抗生素时,都需要有锌离子的参与。金属酶在金属离子结合位点都拥有不同数量的锌离子配体,但是金属离子的确切作用仍然是有争议的。本文结合近几年国内外文献,简述了金属β-内酰胺酶催化机制的研究进展。     

酵母发酵生产谷胱甘肽的培养基优化

目的应用Plackett-Burman设计和球面对称设计实验,对酵母发酵生产谷胱甘肽的培养基进行优化。方法首先通过Plackett-Burman设计方法从10个因素中选择出对发酵产量影响较大的因素,即葡萄糖、酵母膏和半胱氨酸含量,然后用球面对称设计对这3个因素各取5个水平进行优化。结果最佳培养基组成为:葡萄糖23.64g/L,酵母膏29.07g/L,半胱氨酸1g/L,(NH4)2SO42g/L,蛋白胨5g/L,KH2PO41g/L,MgSO41g/L,NaCl2g/L。在优化条件下,发酵液中谷胱甘肽积累量可达162.3mg/L,比优化前产量提高约56.2%。结论证明用Plackett-Burman设计和球面对称设计寻求菌体积累谷胱甘肽的最佳培养基组分是可行的。     

灰绿葡萄孢发酵液中天然型脱落酸的分离纯化

对脱落酸产生菌灰绿葡萄孢(Botrytis cinerea)发酵生产脱落酸的分离纯化工艺进行了初步探索。发酵液经过滤、浓缩、去杂、乙酸乙酯萃取、NaHCO3反萃取、硅胶柱层析、结晶等步骤进行分离纯化可得脱落酸，测定总收率可达39.7％。产品经光谱测定、旋光测定证实为天然型脱落酸，纯度在98%以上。