脂多糖诱导大鼠肝脏中两类磷脂酶A_2激活及基因表达

目的 :观察脂多糖 (L PS)在大鼠肝脏中诱导磷脂酶 A2 (PL A2 )亚型的激活和基因表达情况。方法 :大鼠腹腔注射脂多糖 (L PS,2 mg/ kg)后不同时间取血 ,分别测定分泌型 PL A2 (s PL A2 )活性和前列腺素 E2(PGE2 )含量 ,用 Western blot检测肝脏中胞浆型 PL A2 (c PL A2 )蛋白的表达和时间进程 ;采用免疫组化法检测s PL A2 和 c PL A2 蛋白在肝脏中的表达 ;用 m RNA斑点杂交法检测 s PL A2 、c PL A2 m RNA在脏器中的转录水平。结果 :L PS可以时间依赖方式升高大鼠血清 s PL A2 活性、PGE2 含量以及肝脏中 c PL A2 蛋白表达 ;免疫组化显示肝细胞可表达两类 PL A2 ,且 L PS可加强其表达 ;肝脏及其它脏器中均有两类 PL A2 m RNA转录 ,受 L PS刺激后反应各不相同 ,而在肝脏中均有加强。结论 :L PS可明显增强大鼠肝脏中两类 PL A2 的基因转录和蛋白表达 ,同时可引起血中 PL A2 活性增高和花生四烯酸代谢产物明显增高 ;肝脏可能是炎性反应中外周血 PL A2活性及脂类介质的主要来源 ,L PS对肝脏中两类 PL A2 的诱导可能成为促进全身性过度炎性反应的启动因素     

脂多糖诱导大鼠肝脏中两类磷脂酶A2激活及基因表达

目的：观察脂多糖（ＬＰＳ）在大鼠肝脏中诱导磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）亚型的激活和基因表达情况。方法：大鼠腹腔注射脂多糖（ＬＰＳ．２ｍｇ／ｋｇ）后不同时间取血,分别测定分泌型ＰＬＡ２（ｓＰＬＡ２）活笥和前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）含量,用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测肝脏中胞浆型ＰＬＡ２（ｃＰＬＡ２）蛋白的表达和时间进程;采用免疫组化法检测ｓＰＬＡ２和ｃＰＬＡ２蛋白在肝脏中的表达;用ｍＲＮＡ斑点杂交法检测ｓＰ     

甘氨脱氧胆酸诱导大鼠肝细胞钙离子内流和内贮钙释放

甘氨脱氧胆酸(Glycodeoxycholic Acid,GDCA)引起肝细胞损伤多见报道,但其机理研究甚少。为了解GDCA对肝细胞损伤的机制,本文拟观察GDCA诱导大鼠肝细胞内游离Ca2 浓度([Ca2 ]i)的变化,探讨GDCA是否通过Ca2 而导致肝细胞损伤。1 材料与方法1.1 材料：Wister雄性大鼠,体重200～300g,由重庆医科大学动物中心提供。Fura-2/AM,牛血清白蛋白(BSA)为Boehriger Mannhein公司产品,GDCA、胶原酶(Ⅳ型)、胰蛋白酶抑制剂(Trypsin inhibitor),WME人工培养基,HEPES均为Sigma公司产品。其余试剂为国内生产,均为分析纯。岛津RF-…     

糖尿病肾病大鼠肾脏磷脂酶A2活性变化及Ⅱ型磷脂酶A2 mRNA的表达

糖尿病肾病 (ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ ,ＤＮ)的发病原因较复杂 ,花生四烯酸及其代谢产物前列腺素、血小板活化因子等参与了ＤＮ的发生、发展过程 ,而有关这些物质的合成前体磷脂酶Ａ2 (ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ2 ,ＰＬＡ2 )与ＤＮ关系的研究报道较少 ,尤其是参与ＤＮ病理过程的ＰＬＡ2 类型还不清楚。本文初步探讨了肾脏ＰＬＡ2 活性及Ⅱ型ＰＬＡ2 ｍＲＮＡ表达在ＤＮ时的改变 ,及其在ＤＮ发生机制中的可能作用 ,以进一步了解ＤＮ发生的病理机制。1　材料和方法1.1　实验动物模型　雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,体重 150～2 …     

甘氨脱氧胆酸激活大鼠肝细胞磷脂酶A2和对血清磷脂酶蛋白及mRNA水平的表达

实验证实甘氨脱氧胆酸（ｇｌｙｃｏｄｅｏｘ－ｙｃｈｏｌｌｃａｃｉｄ,ＧＤＣ）≥２５０μｍｏｌ／Ｌ可导致大鼠肝细胞坏死,细胞膜流动性降低［１］。磷脂酶Ａ２（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２,ＰＬＡ２）过量释放和／或激活在多系统器官衰竭的发展中起着关键作用。用ＧＤＣ处理原代培养大鼠肝细胞,以探讨ＧＤＣ对ｓＰＬＡ２酶活性的激活,酶蛋白和基因表达的影响。一、材料与方法１．主要试剂：ｓＰＬＡ２单克隆抗体由美国Ｌｉｓａ．Ａ．Ｍ教授惠赠。ＲＮＡ提取试剂购自德国宝灵曼公司。ｍａｒｋｅｒ：ｐＢＲ３２２ＤＮＡ／ＢＳｔＮ…     

葡萄糖和胰岛素对大鼠血管平滑肌细胞磷脂酶A2活性的影响

为观察葡萄糖和胰岛素对血管平滑肌细胞磷脂酶活性的影响,在培养基中分别加入一定浓度的葡萄糖或(和)胰岛素与大鼠血管平滑肌细胞共同孵育72 h后,分别测定培养上清液中磷脂酶A2活性和Na+-K+依赖式ATP酶活性,磷脂酶A2活性检测采用[3 H]-油酸标记法, Na+-K+依赖式ATP酶活性检测采用以ATP.2Na为底物的比色法.结果发现大鼠血管平滑肌细胞暴露于高糖或(和)高胰岛素环境中,上清液中磷脂酶A2活性增加,而Na+-K+依赖式ATP酶活性下降,并在一定浓度范围内呈剂量依赖性.葡萄糖浓度由5.6 mmol/L增加到33.0 mmol/L,上清液中磷脂酶A2活性由(4.2±0.2)×1012/(min.L)增加到(9.2±0.2)×1012/(min.L);而Na+-K+依赖式ATP酶活性由4.8±1.02 μmol/(g.min)下降到2.06±0.99 μmol/(g.min).胰岛素浓度由5.0 Mu/L增加到1 000 Mu/L,上清液中磷脂酶A2活性由(3.8±0.4)×1012/(min.L)增加到(11.8±0.6)×1012/(min.L);而Na+-K+依赖式ATP酶活性由4.0±1.68 μmol/(g.min)下降到2.19±1.02 μmol/(g.min),且进一步发现这一效应在作用24 h后才显著,高糖和高胰岛素有协同作用.结果提示磷脂酶A2活性增高与糖尿病时动脉粥样硬化形成有关,合理应用磷脂酶A2抑制剂有助于防止或延缓糖尿病并发动脉粥样硬化的发展.     

腹腔镜脾切除术在血液病患者的应用

自2002年7月至2003年9月我们对11例原发性血小板减少性紫癜患者、1例自身免疫性溶血性贫血患者、1例Evans综合征患者进行了经腹腔镜脾切除术,现报道如下。     

呼吸道合胞病毒感染对慢性鼻窦炎伴鼻息肉上皮屏障功能的影响

目的 为探索呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）感染对慢性鼻窦炎伴鼻息肉（CRSwNP）和对照黏膜来源的人鼻黏膜上皮细胞（human nasal epithelial cells,hNECs）物理屏障关键分子的影响。方法 不同感染复数（multiplicity of infection,MOI）(0.1和0.3)的RSV分别感染鼻息肉（n=21）和对照黏膜（n=9）的hNECs 24 h和48 h后,提取总RNA,逆转录成cDNA后,采用实时荧光定量PCR检测ZO-1、ZO-2、Claudin-1、Claudin-4、Occludin、E-cadherin和N-cadherin的基因表达变化。结果 RSV感染hNECs后,ZO-1、ZO-2、Claudin-1、Claudin-4、Occludin、E-cadherin和N-cadherin的基因表达水平均下降,但只在鼻息肉来源的hNECs中存在统计学差异（P<0.05）。RSV感染嗜酸性粒细胞型CRSwNP(eosinophilic CRSwNP,ECRSwNP)与非嗜酸性粒细胞型CR...     

具核梭杆菌定植对胃癌细胞上皮间质转化的影响

为研究具核梭杆菌(F.nucleatum)在胃癌细胞(AGS细胞)和正常胃黏膜上皮细胞(GES-1细胞)的定植机制及其对细胞上皮间质转化(EMT)的影响, 将F.nucleatum与AGS和GES-1细胞共培养, 以不同浓度N-乙酰-D-半乳糖胺(GalNAc)干预, 流式细胞术检测F.nucleatum定植率, Transwell实验检测细胞迁移和侵袭数目, 蛋白质印迹法检测EMT标志物相对表达量。结果发现F.nucleatum定植使AGS和GES-1细胞迁移和侵袭能力增强, 同时促进细胞EMT;GalNAc干预后, F.nucleatum定植率下降, AGS和GES-1细胞迁移和侵袭能力及EMT较无GalNAc干预时均减弱, 表明F.nucleatum通过D-半乳糖-β(1-3)-N-乙酰-D-半乳糖胺在AGS和GES-1细胞定植, 促进细胞EMT。     

经颅直流电刺激参数的相关研究进展

经颅直流电刺激（tDCS）作为一种非侵入性脑刺激技术,近年来在临床中的应用日趋广泛。许多研究发现tDCS在治疗精神疾病及神经系统疾病方面具有巨大潜力。但由于tDCS的作用机制尚未明确,其治疗参数设定及个体化治疗方案制订缺乏统一标准,导致tDCS的临床应用与普及仍受到诸多制约。本文主要综述涉及tDCS治疗参数的相关研究进展,并探讨不同参数tDCS的作用机制及疗效差异,旨在为tDCS技术的临床应用提供科学依据及指导。