从“珠海体外循环管道事件”看我国医疗器械不事件监测与风险管理

通过对＂珠海体外循环管道事件＂进行剖析,阐述我国医疗器械不良事件监测与风险管理的现状,探讨我国实施医疗器械不良事件监测与风险管理的模式和发展方向。     

新型冠状病毒肺炎疫情期间骨科急症处理原则的专家共识

自2019年12月以来,湖北省武汉市部分医院相继收治多个有华南海鲜市场暴露史的不明原因肺炎病例[1]。患者症状多为发热、乏力、干咳并逐渐出现呼吸困难,部分重症患者出现了急性呼吸窘迫综合征或脓毒症休克、甚至病死。2020年1月7日,我国研究人员首次从患者标本中检测出一种新型冠状病毒[2]。2020年1月20日,中华人民共和国国家卫生健康委员会发布2020年1号公告,将新型冠状病毒感染的肺炎纳入乙类传染病,并按照甲类传染病进行防疫、控制[3]。世界卫生组织将新型冠状病毒肺炎命名为"COVID-19"[4]。     

TAP1真核表达载体的构建及其对GES-1细胞HLA-I分子表达的影响

目的:构建抗原加工相关转运蛋白TAP1真核表达载体,并观察其对HLA-I分子表达的影响。方法:采用基因重组技术,构建含人TAP1基因全长的pcDNA3.1/V5-His-TAP1真核表达质粒,并采用细胞转染、RT-PCR、Western blot以及流式细胞术(FCM)观察TAP1转染对胃黏膜上皮(GES-1)细胞HLA-I分子表达的影响。结果:以人外周血单个核细胞总RNA为模板,经RT-PCR反应获得人全长TAP1基因,以pcDNA3.1/V5-HisB为载体,经酶切、连接、转化等基因重组技术,构建了含人TAP1基因全长的pcDNA3.1/V5-His-TAP1质粒,并经测序结果证实。以GES-1作为靶细胞进行转染,经RT-PCR和Westernblot证实,转染后TAP1基因表达明显增加,细胞适于所构建的TAP1质粒的转染。进一步检测了TAP1转染对GES-1细胞HLA-I类分子表达的影响。结果发现,TAP1转染组HLA-A、HLA-B、HLA-C(重链)在mR-NA水平表达明显增加,β2m(轻链)mRNA水平无明显影响。FCM及Western blot检测结果表明,TAP1转染可以上调HLA-I蛋白的表达。结论:成功构建了TAP1真核表达质粒,细胞转染后TAP1表达的增加,可引起细胞表面HLA-I分子表达的相应增加,从而证实了TAP1在HLA-I抗原表达以及抗原递呈途径中的重要作用。     

气管给予黄曲霉毒素G1对大鼠肺组织CC-10表达的影响

目的： 探讨1次性支气管给予黄曲霉毒素G1(AFG1)对大鼠肺组织CC-10表达的影响。方法: 按30 μg/kg剂量经支气管1次性给予雄性SD大鼠AFG1处理。处理1、3、7和14 d后分别处死动物。收集肺泡灌洗液(BALF)，采用生化法检测乳酸脱氢酶(LDH)活力。采用流式细胞术(FCM)和蛋白免疫印迹(Western blotting)方法检测肺组织中CC-10蛋白的表达；采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测CC-10mRNA水平的表达。结果: 给予AFG1作用后肺泡灌洗液中LDH活力升高(P<0.01)，至14 d时恢复到正常水平。FCM和蛋白免疫印迹方法检测CC-10蛋白结果发现AFG1作用3、7和14 d，CC-10蛋白表达明显低于对照组(P<0.01, P<0.01)，蛋白免疫印迹结果同FCM一致。AFG1作用3、7和14 d大鼠肺组织CC-10 mRNA表达明显低于对照组(P<0.01)。结论: 支气管1次性给予AFG1作用对大鼠肺组织具有明显的致损伤作用，降低CC-10蛋白和mRNA的表达水平。     

宝儿康的药理实验研究

潮州市宏兴制药厂新产品宝儿康系由中医古方“千金肥儿方”化裁而成(含太子参、茯苓、白术、甘草、山药、薏苡仁、山楂、陈皮、麦芽、石菖蒲……等14味中药)。具有补气健脾、消积导滞,理气开胃、利水渗湿等功效,用以治疗小儿脾胃虚弱、消化失常、营养不良,形钵消瘦等证候。本实验以现代药理学的研究方法,验证本品的作用,探索其作用机理,为其临床应用提供了药理学依据。现将实验情况报告如下:     

杂色曲霉素对小鼠胸腺和脾脏转录因子Foxp3~+调节性T淋巴细胞的影响

目的探讨杂色曲霉素(ST)对机体免疫调节功能的影响。方法BALB/c小鼠随机分为正常对照组、溶剂对照组、ST3,30,300和3000μg·kg-1组。小鼠ip给药24h后,处死取胸腺和脾脏,采用流式细胞术测定胸腺和脾脏细胞中CD4+和CD8+T淋巴细胞及转录因子Foxp3阳性(Foxp3+)调节性T淋巴细胞的百分率,免疫组织化学法检测胸腺和脾脏组织中Foxp3+调节性T淋巴细胞数量,Western蛋白印迹法和RT-PCR分别测定胸腺和脾脏组织中Foxp3蛋白和mRNA的表达。结果溶剂对照组与正常对照组比较,小鼠胸腺和脾脏CD4+,CD8+和Foxp3+T淋巴细胞百分率均无明显差异。与溶剂对照组比较,ST3μg·kg-1组胸腺CD8+T淋巴细胞百分率降低,ST3和30μg·kg-1组脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞百分率明显升高,ST300和3000μg·kg-1组胸腺和脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞百分率无明显变化。在ST3～3000μg·kg-1内,胸腺和脾脏细胞中Foxp3+调节性T淋巴细胞百分率、胸腺和脾脏组织内Foxp3+调节性T淋巴细胞数量、Foxp3蛋白和mRNA表达均随ST浓度的增高而增加。结论ST可诱导小鼠淋巴器官内Foxp3+调节性T淋巴细胞数量增加,从而影响机体免疫耐受功能。     

腹腔镜胆囊切除术中胆道造影的临床价值研究

目的探讨腹腔镜胆囊切除术中行胆道造影的临床价值。方法回顾性分析武警北京总队医院2008年12月～2011年10月腹腔镜胆囊切除术中经胆囊颈管行胆道造影78例患者资料,将其作为观察组,另外,随机选取同期入院单纯行腹腔镜胆囊切除术患者80例为对照组,观察两组患者术中情况、术后并发症、住院时间及患者满意度,并进行对比分析。结果观察组发现胆道损伤、胆囊管变异、胆总管结石、中转开腹的概率分别为0.00%、1.28%、11.54%、16.67%明显低于对照组（8.75%、7.50%、18.75%、26.25%）,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。两组患者手术均获成功,两组患者住院时间比较差异无统计学意义（P〉0.05）,观察组治愈率为100.00%、术后并发症率为1.28%、患者满意度为97.44%,明显优于对照组（83.75%、6.25%、87.50%）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论腹腔镜胆囊切除术中胆道造影避免了不必要的胆道探查及损伤,其方法简便、安全、可靠,临床值得推广。     

DON 对胃癌细胞HGC-27 细胞周期和凋亡的影响

 目的 探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）对体外培养胃癌细胞HGC-27细胞周期和凋亡的影响。方法 体外培养的胃癌细胞HGC-27经50、100、1000、2000μg／L DON处理12h、24h、48h，应用流式细胞术（FCM）进行细胞周期分析，检测凋亡情况及其量效关系，Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达情况。结果 FCM检测结果表明，较高浓度（1000和2000μg／L）DON处理对细胞周期分布的影响随处理时间不同有明显差异。DON处理12h，可明显降低G0／G1细胞百分率、增加S期细胞百分率。处理时间延长至24h和48h，则表现为G0／G1细胞百分率增加，S期细胞百分率降低（P〈0．05）。DON处理24h和48h，各DON实验组HGC-27细胞凋亡率均高于对照组，在50～2000ug／L浓度范围内，凋亡率随着DON处理浓度的升高而升高。Western blot检测凋亡相关蛋白结果显示，DoN处理12、24和48h，Bax和Caspase-3蛋白表达均明显升高，而Bcl-2蛋白表达降低。结论 DON处理可影响体外培养的胃癌细胞象HGC-27细胞的细胞周期分布，其作用依DON浓度和作用时间的不同而有差异。同时DON可诱导HGC-27细胞凋亡，上调Bax和Caspase-3蛋白表达和下调Bcl-2蛋白表达可能是其诱导细胞凋亡的机制之一。