蛋白激酶C在远程预处理诱导脊髓缺血耐受中的作用

目的：探讨蛋白激酶C在下肢缺血预处理诱导脊髓缺血耐受效应中的作用.方法：实验于2004-07/12在解放军兰州军区乌鲁木齐总医院临床实验室进行.取28只雄性新西兰大白兔,随机分成4组（n=7）：①对照组：阻断肾下腹主动脉20min,制作兔脊髓缺血模型.②预处理组：用充气式压力止血带阻断双下肢腘窝上1/3,压力200mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）,循环两次,每次10 min,间隔10 min,最后一次处理后30 min同前造摸.③拮抗剂组：静脉给予蛋白激酶C拮抗剂chelerythrine 5mg/kg,1 h后造模.④预处理加拮抗剂组：预处理前30 min静脉注射chelerythrine 5 mg/kg,余同预处理组.再灌注后4,8,12,24和48h分别对动物后肢运动功能评分（Tarlov标准,0～4级,共5级,0级为后肢完全瘫痪,4级为运动功能正常）.再灌注48 h,处死动物取脊髓（L5～7）,计算脊髓前角正常神经元数.结果：经补充后28只动物进入结果分析.①脊髓前角正常神经元数：预处理组显著高于对照组、拮抗剂组和预处理加拮抗剂组（69,12,12,8个,P＜0.01）.②神经功能评分：预处理组在再灌注8 h后各时间点均明显高于对照组（P＜0.01）,预处理加拮抗剂组和拮抗剂组与对照组比较差异无显著性（P＞0.05）.③神经功能评分与脊髓前角正常运动神经细胞数之间有显著相关性（r=0.872,P＜0.01）.结论：蛋白激酶C拮抗剂chelerythrine能完全阻断下肢预处理对随后脊髓缺血的保护效应,提示蛋白激酶C参与了远程预处理诱导脊髓缺血耐受的形成机制.     

我国家庭照顾者的研究现状分析

家庭照顾者，简言之就是在家里为特殊对象提供医疗服务和生活帮助的人，他们也是卫生服务队伍中的重要一员。一方面，我国处于急剧老龄化时期，据联合国预测，至21世纪上半叶，我国一直是世界上老年人口最多的国家，老年人口的增加加大了对卫生服务的需求；另一方面，受我国医疗保障体系及传统文化背景的影响，大部分老年人以及生活不能自理者仍以居家接受家庭成员的照顾为主，家庭成员承担着主要的照顾任务。[第一段]     

PRAME基因在成人急性白血病的表达及其与预后的相关性

本研究探讨黑色素瘤特异性抗原（preferentially expressed antigen of melanoma，PRAME）基因在成人急性白血病中的表达及其与预后的相关性。应用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测73例初发、3例复发成人急性白血病患者、7例特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者和8例正常人骨髓单个核细胞（BMMNC）以及K562和U937二个白血病细胞株PRAME mRNA的表达水平，分析其在成人急性白血病中的表达规律及其在判断疗效及预后、监测微小残留病（MRO）和在特异性免疫治疗中的意义。结果表明：PRAME基因在成人急性白血病中的表达率为36．8％（n=28），急性髓系白血病（AML）为42．9％（n=24），急性淋巴细胞白血病（ALL）为20％（n=4）。AML的表达率显著高于ALL（P〈0．01）。在K562和U937细胞都有PRAME基因表达，它们的表达水平分别为0．57和0．46。在15例对照（正常人、ITP患者）未检出PRAME基因表达。AML各亚型之间（除去病例数为0例的M7，M1及M6各1例）、ALL各亚型（L1，L2）之间PRAME mRNA的表达水平无显著性差异。患者的年龄、初诊或者复发时白细胞计数、血红蛋白、血小板计数、骨髓中原始细胞、幼稚细胞比例以及脾脏厚度对PRAME mRNA的表达无相关性。完全缓解组PRAME mRNA的表达水平与部分缓解组和死亡组有显著性差异，并且随着PRAME mRNA的表达水平升高，治疗效果越好。对1例病人动态监测发现，在复发之前PRAMEmRNA的表达会升高。结论：PRAME基因在成人急性白血病中存在高表达，其表达水平与预后密切相关，并可以作为监测MRD的标志基因。PRAME在白血病特异性免疫治疗中是潜在的靶抗原。     

疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体制备及鉴定

目的制备抗疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体,鉴定其与组织抗原MDIi的反应性。方法以PCR扩增获得MDIi序列构建原核表达载体pET-32a/MDIi,转化大肠杆菌进行表达;对表达产物鉴定后,免疫小鼠制备抗MDIi多克隆抗体;间接ELISA测定抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性,间接ELISA检测抗体与疣鼻栖鸭组织MDIi的反应强度。结果成功构建了pET-32a/MDIi原核表达载体,诱导表达了相对分子质量(Mr)约40 000的包涵体形式的MDIi重组蛋白,免疫小鼠获得效价为1∶128 000的特异性多克隆抗体,抗体与疣鼻栖鸭组织中的MDIi反应滴度为1∶32 000。结论成功制备了高效价的特异性抗MDIi多克隆抗体,抗体与组织抗原有较强的免疫反应性。     

顺铂诱导的自噬在口腔鳞癌Tca83细胞中的作用

目的:探讨顺铂诱导的自噬在口腔鳞癌Tca83细胞中的作用。方法:利用顺铂作用于口腔鳞癌Tca83细胞,不同时间后MTT法检测细胞生存率的变化,激光共聚焦显微镜观察细胞胞浆中自噬体的形成情况,Annexin V-FITC流式细胞术检测细胞凋亡率的变化。结果:顺铂作用于Tca83细胞2h即可出现明显的自噬性变化。细胞凋亡率随顺铂作用时间的延长而逐渐增加。结论:顺铂可以诱导口腔鳞癌Tca83细胞发生自噬,过度激活的自噬作为细胞的一种死亡程序,可以与凋亡一起促进细胞死亡。     

丹参对成骨细胞株MC3T3─E1细胞碱性磷酸酶活性及DNA合成影响的实验研究

选择克隆化成骨细胞株——ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞，采用细胞培养方法，观察细胞内ＤＮＡ合成与碱性磷酸酶（ＡＬＰａｓｅ）活性，了解丹参对体外培养的成骨细胞生长、分化与代谢的影响。研究结果显示，丹参明显增强ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞内ＡＬＰａｓｅ活性，５．０ｍｇ／ｍｌ浓度时，丹参对ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞内碱性磷酸酶活性影响最大，比对照组增强约１３５％。丹参这种促进作用只限于分化晚期的ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞，而对分化早期细胞内碱性磷酸酶活性产生抑制作用。其次，这种作用还与药物作用时间有关。但是，丹参对各生长分化期的ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞内ＤＮＡ合成均无影响。本研究结果表明，丹参有明显增强体外培养分化晚期的ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞内碱性磷酸酶活性的作用，这种作用不是通过促进细胞增殖，而是改善细胞功能实现的，并且受丹参药物浓度与作用时间的影响，说明丹参可能在促进正畸牙齿移动中新生牙槽骨形成方面发挥作用。     

丹参对骨髓培养中破骨细胞生成的影响

目的：研究丹参对体外骨髓细胞培养中破骨细胞生成的作用。方法：采用小鼠长骨骨髓体外培养方法,通过检测抗酒石酸磷酸酶（ＴＲＡＣＰ）阳性细胞生成数,反映破骨细胞的生成情况。结果：１．０ｇ／Ｌ丹参可明显抑制ＴＲＡＣＰ阳性细胞的生成,其生成数仅为对照组的２９．８％;ＰＧＥ２（１０－７ｍｏｌ／Ｌ）及１．２５（ＯＨ）２Ｄ３（１０－８ｍｏｌ／Ｌ）产生明显的促进作用,与对照组比较,ＴＲＡＣＰ阳性细胞生成数分别增加了６．０４和６．６８倍;丹参还可明显抑制ＰＧＥ２和１．２５（ＯＨ）２Ｄ３的作用,混合培养组ＴＲＡＣＰ阳性细胞生成数仅仅是单纯加ＰＧＥ２和１．２５（ＯＨ）２Ｄ３组的３５．２％和３９．３％,特别是多核破骨细胞数大量减少。结论：丹参可抑制骨髓细胞体外培养中破骨样细胞的生成,主要抑制破骨母细胞向成熟破骨细胞的转化,而成骨细胞可能在其中发挥了作用     

健康成人唾液与血浆中巯基化合物浓度增龄性变化初探

目的 分析健康成人唾液与血浆巯基化合物浓度与年龄、性别的关系,探讨唾液与血浆巯基化合物浓度的关联及增龄性变化,为临床检测提供参考.方法 选取2013年12月至2014年6月于解放军总医院健康管理研究院国宾部体检中心体检的健康成年志愿者306名(151名女性,155名男性),分为青年组(106名,20～ 44岁,48名女性,58名男性)、中年组(109名,45～ 59岁,63名女性,46名男性)和老年组(91名,60～ 79岁,40名女性,51名男性),分别检测唾液与血浆巯基化合物浓度.结果 306名健康成人唾液与血浆巯基化合物浓度分别为(123±27)和(427±124) μmol/L.随着年龄的增加,唾液与血浆巯基化合物浓度均显著减少(P＜0.01);老年组唾液和血浆巯基化合物浓度均显著低于青年组和中年组(P＜0.01);唾液巯基化合物浓度的男女总体差异无统计学意义(P=0.451),但血浆巯基化合物浓度的男女总体差异有统计学意义(P=0.006);唾液和血浆巯基化合物浓度显著正相关(r=0.5050,P＜O.01).结论 唾液巯基化合物浓度能大体反映血浆巯基化合物浓度,唾液巯基化合物检测有望代替血浆巯基化合物检测成为衰老的生物学指标.     

血清sRANKL/OPG比值在判断多发性骨髓瘤骨病中的意义

本研究探讨多发性骨髓瘤(MM)患者血清中可溶性核转录因子-κB受体活化因子的配体(sRANKL)和护骨蛋白(OPG)的水平与多发性骨髓瘤骨病(MBD)之间的关系。采用酶联免疫吸附法检测了42例初诊的MM病人(观察组)以及25例健康体检者(对照组)外周血清中sRANKL和OPG的水平以及破骨细胞代谢指标抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRAP-5b)与Ⅰ型胶原蛋白羧基末端交联肽(CTP-Ⅰ)的水平,同时根据全身X光摄片判断MM患者骨损害情况并分析sRANKL/OPG比值与TRAP-5b、CTP-Ⅰ水平和骨损害发生及其程度之间的关系。结果发现:观察组患者血清中sRANKL水平升高(中位水平9.33μg/L),OPG水平下降(中位水平4.93μg/L),sRANKL/OPG比值明显升高(比值2.65),与对照组相比各对应指标之间的差异均具有显著性(p0.05);MM患者血清中sRANKL/OPG比值与TRAP-5b(r=0.512,p0.05)和CTP-Ⅰ(r=0.481,p0.05)水平之间均存在相关性。将观察组患者按有无骨损害分组发现,骨损害组(29例)和无骨损害组(13例)的sRANKL/OPG比值分别为5.13和1.12,有骨损害组的比值明显升高(p0.05);如果按骨损害程度分组还发现,sRANKL/OPG比值与骨损害程度密切相关(r=0.445,p0.05),但不同临床分型和不同临床分期(ISS分期)的MM患者之间,血清sRANKL/OPG比值的差异均无统计学意义(p0.05)。结论:MM患者血清中sRANKL/OPG比值明显升高,不仅与破骨细胞代谢增强有关,还与骨损害的发生及其程度相关,所以sRANKL/OPG比值可作为判断MBD的一个参考指标。     

老年患者颈外静脉行PICC置管术的护理体会

外周中心静脉置管（Peripherally inserted central catheter,PICC）具有操作简单安全、维护方便、并发症少、留置时间长等优点,适用于患者长期静脉治疗,能避免外周静脉反复穿刺损伤、减少患者痛苦和降低护理工作量,该项技术已被广泛应用于临床。2007年12月-2009年6月,我科对26例住院老年患者进行了PICC颈外静脉置管术,用于长期静脉治疗,取得了满意的效果。本文着重介绍2008年8月我科收治的老年患者3例。现将护理体会介绍如下。