转化生长因子-?茁1促进骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化

目的：探讨转化生长因子?茁1（transforming growth factor-?茁1,TGF-?茁1）在骨形态发生蛋白9（bone morphogenetic protein 9,BMP9）诱导间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSC）成骨分化过程中的作用。方法：应用鼠MSC C3H10T1/2,以重组腺病毒法将BMP9导入,施加TGF-?茁1处理,建立BMP9联合TGF-β1诱导MSC成骨分化模型。改良SEAP化学发光法检测碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性;茜素红S染色进行钙盐沉积检测;实时荧光定量PCR检测成骨相关基因Ⅰa2型胶原（collagenⅠa2,COLⅠa2）、骨桥素（osteopotin,OPN）、骨钙素（osteocalcin,OCN）的mRNA转录表达水平,免疫细胞化学法检测细胞内OPN、OCN表达变化。荧光素酶报告基因法检测信号通路的Smad水平。结果：TGF-?茁1与BMP9联合处理较BMP9单独处理能更早更多地提高ALP活性和引起钙盐沉积（F处理=18 782.10,P=0.000）,持续处理达17 d后不再显示明显差异,TGF-?茁1单独处理与对照组间无明显差异（F=1.03,P=0.318）。TGF-?茁1与BMP9联合处理较BMP9单独处理可使COLⅠa2、OPN、OCN mRNA转录水平明显增高（COLⅠa2的F处理=250.30,P=0.000;OPN 的F处理=795.64,P=0.000;OCN的F处理=206.55,P=0.000）,COLⅠa2增高发生较早和显著（F=250.30,P=0.000）;细胞内OPN、OCN蛋白阳性表达显著增强。TGF-β1联合BMP9处理能刺激信号通路相应的Smad荧光素报告活性（?字2=32.84,P=0.000）。结论：在BMP9诱导MSC成骨分化中,联合应用TGF-?茁1具有促进成骨作用,BMP9与TGF-?茁1在成骨分化中可能存在互补效应。     

Sky骨扩张器系统在经皮椎体后凸成形术中的初步临床应用

目的:探讨Sky骨扩张器系统在经皮椎体后凸成形术中应用的临床效果及手术操作要点。方法:对22例共29个椎体塌陷病变患者,应用Sky骨扩张器进行经皮穿刺、塌陷椎体扩张后注入骨水泥。随访观察患者疼痛视觉模拟评分(vasual analogue scale,VAS)及并发症情况。结果:29个椎体均单侧经椎弓根基底穿刺成功完成手术,手术时间每例35~85min,骨水泥注射量每个椎体5.3±1.2ml(3.0~7.6ml),分布均超过中线。骨水泥沿针道返流1个椎体,少量椎管内漏1个椎体,但均无临床症状;无其它并发症。所有患者疼痛缓解,VAS术前为9.2±1.8分,术后第3天为3.1±2.8分;随访1~3个月(平均2个月),随访时VAS为2.9±3.3分。5个椎体高度显著恢复。结论:Sky骨扩张器是经皮脊柱后凸成形术的新型器械,具有可控定向扩张特点,初步观察,安全有效。     

Lrtm1基因在成肌分化过程中的功能探索

目的：观察成肌分化过程中C2C12细胞Lrtm1表达;构建小鼠Lrtm1慢病毒过表达载体;筛选稳定表达外源Lrtm1细胞株诱导其分化后观察对成肌分化标志基因Myogenin、Myosin的影响;发现Lrtm1蛋白质表达水平受调控的机制。方法：诱导C2C12细胞分化用Hoechst染色细胞核;将小鼠Lrtm1基因连接到慢病毒载体质粒pLJM1-GFP上并进行慢病毒包装;筛选稳定过表达Lrtm1基因的C2C12细胞系,诱导分化Lrtm1-DDK组、GFP组检测对成肌分化标志基因Myogenin、Myosin表达的影响;MG132处理C2C12-Lrtm1-DDK细胞系后,观察内源性Lrtm1蛋白质表达。结果：诱导分化过程中,肌管形成,Lrmt1、Myosin mRNA水平随分化的进行表达上升;成功构建重组pLJM1-Lrtm1-DDK表达载体;成功筛选稳定表达外源Lrtm1细胞株;诱导稳定细胞系分化后,real-time PCR在144 h时显示Lrtm1-DDK组（272.1±18.22）Myogenin mRNA水平较GFP组（332.41±41.21）减少（P＜0.05）;Lrtm1-DDK组（76.11±10.47）Myogenin mRNA水平较GFP组（145.51±10.02）减少（P＜0.05）;C2C12细胞中Lrtm1蛋白质被蛋白酶体降解。结论：Lrtm1基因在成肌分化过程中高表达;过表达Lrtm1基因部分抑制了Myogenin、Myosin基因的表达;Lrtm1蛋白质表达水平受蛋白酶体降解调控。     

经皮椎体成形术及后凸成形术治疗骨质疏松性多椎体压缩骨折

目的 观察经皮椎体成形术及后凸成形术治疗骨质疏松性多椎体压缩性骨折的临床疗效.方法 根据患者的临床表现、影像学特征,对27例患者进行经皮椎体成形术或球囊扩张椎体后凸成形术.观察术后3 d和随访时的活动能力(MDS)、疼痛强度视觉模拟评分(VAS)较术前的改善情况.结果 27例均成功完成手术,术后疼痛基本消失,72 h后均离床活动,患者的视觉模拟评分(VAS)术后3 d(2.2±0.9),较术前(7.8±1.4)显著下降(P<0.01);随访时VAS为(1.5±1.0),较术后又有所下降.MDS术后3 d(1.0±0.8),较术前(2.4±1.2)显著下降(P<0.01);随访时为(1.0±0.9),与术后相当.术后随访5～12个月,腰痛无复发.结论 对于骨质疏松性多椎体压缩骨折的患者,根据骨折椎体的特征,行经皮椎体成形术结合后凸成形术,为患者降低一定的医疗费用,短期疗效满意,其长期疗效有待于进一步随访验证.     

CT引导下经皮穿刺活检在脊柱病变诊断中的作用

目的：评价CT引导下经皮穿刺活检在脊柱病变中的诊断价值。方法：回顾性分析1999年～2003年收治的各种脊柱病变78例中，52例CT引导下经皮穿刺活检的资料。结果：初次穿刺阳性结果46例，6例阴性，阳性率88、5%，无并发症发生。阴性有4例，第二次穿刺呈阳性，总阳性率为96％，另2例放弃穿刺。结论：CT引导下经皮穿刺脊柱活检是脊柱病变诊断的重要手段，具有阳性率高，创伤性小的优点，值得临床应用。     

骨保护素的克隆及对骨髓问充质干细胞分化的影响

目的：克隆人骨保护素（Osteoprotegerin,OPG）基因并构建其重组腺病毒,观察其对BMSCs分化的影响．方法：RT-PCR方法从人肝克隆OPG基因全长cDNA,利用穿梭质粒将OPG基因重组获得复制缺陷型重组腺病毒AdOPG;分离培养兔骨髓间充质干细胞,使用AdOPG感染兔BMSCs,以RT-PCR及Western Blot的方法鉴定BMSCs对OPG的表达。比色测定和细胞碱性磷酸酶染色法观察AdOPG感染BMSCs后5d时碱性磷酸酶（AIJP）的表达。结果：克隆获得人OPG基因,测序与Genebank一致,构建的重组腺病毒AdOPG滴度达10^9 efu／ml,AdOPG感染BMSCs5d后ALP活性值为（21024&#177;507）IU,AdGFP对照组为（3079&#177;89）IU,空白对照组为（2156&#177;78）IU。结论：骨保护素有利于骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化。     

经皮椎体成形术与后凸成形术的止痛机制

近年来,新出现的经皮椎体成形术(percutaneous vertebroplasty,PV)及在此基础上发展起来的椎体后凸成形术(percutaneous kyphoplasty,PK)为骨质疏松性椎体压缩性骨折(Vertebral compressionfractures VCFs)这一难治性疾患的治疗开辟了一条新的途径[1].     

蛋白激酶C在人骨肉瘤细胞多药耐药中的作用及机制

目的 研究蛋白激酶C(PKC)主要亚型在入骨肉瘤143B细胞中的表达情况及其与143B细胞耐药的关系。方法采用Western blot法检测PKC主要亚型α、β和γ磷酸化形式p-PKCα、p-PKCβ、p-PKCβγ和多药耐药蛋白-1(mutidrug resistance protein-1,MDR-1)在人骨肉瘤1...     

IL-PELD与MED治疗非极外侧型腰5/骶1椎间盘突出症的临床研究

目的 比较经皮椎间孔镜下腰椎间盘髓核摘除术(IL-PELD)与经后路显微内窥镜下腰椎间盘髓核摘除术(MED)治疗非极外侧型腰5/骶1椎间盘突出症的临床疗效.方法 采用随机数字表法,将2016年10月至2018年12月永川医院骨科收治入院的单节段非极外侧型腰5/骶1椎间盘突出症的患者分为IL-PELD组与MED组,比较两...     

多椎体压缩骨折的经皮穿刺椎体成形术治疗

目的 :探讨多椎体压缩骨折行经皮穿刺椎体成形术的方法、疗效及手术注意事项。方法 :采用单纯C型臂X线机监视引导 ,俯卧位或侧卧位 ,多椎体同时穿刺注射方法进行手术。本组 7例 (2 5个椎体 )年龄 6 0～ 79岁 ,男 2例 ,女 5例。每例患者骨折椎体数 3～ 9个 ,PVP手术椎体数 3～ 6个 ,骨折压缩程度 2 5 %～ 80 %。手术前及术后 2天和术后 4月时分别进行活动能力、止痛药使用情况及疼痛强度视觉类比评分 (VAS)。结果 :俯卧位手术 2例 ,侧卧位手术 5例 ,手术时间 2 .0～ 4 .5h ,单侧注射 16个椎体 ,双侧注射 9个椎体 ,单椎体骨水泥注射量 0 .5～ 4 .0ml。 7例止痛药使用评分 ,术后比术前降低 (T =0 ,P<0 .0 1) ,4例术后完全不用止痛药 ,随访时仍保持该水平。活动能力评分在术后 2天比术前增加 (T =0 ,P <0 .0 1) ,术后 4月进一步改善。疼痛强度VAS在术后 2天时比术前下降 2 .1～ 6 .4 ,平均 5 .1,自身前后比较有极显著性差异 (t=7.4 ,P <0 .0 0 0 5 ) ,随访时仍维持术后水平。结论 :多椎体压缩骨折采用PVP治疗有效 ,单纯透视引导下侧卧位多椎体同时穿刺注射是较好方法。