腹腔镜治疗腹部创伤28例临床观察

目的:总结腹腔镜技术在腹部创伤中应用的经验。方法:回顾分析2002年1月~2005年8月因腹部创伤选择腹腔镜诊治的28例患者的临床资料。结果:全部病例治愈,其中仅5例中转开腹。结论:腹腔镜诊治腹部创伤具有安全性高、准确性高、并发症少、死亡率低的特点。     

乐清市50岁以上男性感染艾滋病病毒危险因素调查

<正>多年来,我国艾滋病(AIDS)防控对象主要是15~49岁人群,50岁以上中老年人群几乎被忽视。但近几年全国监测数据表明,50岁以上中老年人群感染艾滋病病毒(HIV)的人数正日益增加。为了解我市中老年男性感染HIV的危险因素,探讨制定相应的防控措施,我们对乐清市报告的50岁以上男性HIV感染者进行了随访问卷调查,现将调查结果报道如下。1对象与方法1.1调查对象     

雌激素受体β在乳腺癌他莫昔芬内分泌治疗耐药中的作用

目的：探讨雌激素受体β（estrogen receptor β,ERβ）的表达与乳腺癌他莫昔芬（tamoxifen,TAM）内分泌治疗耐药的相关性及其机制。方法：以前期构建的ERα/ERβ不同表达的人乳腺癌MCF-7细胞株\[M/HK（阴性对照）、M/siα（ERαlow/ERβhigh）、M/siβ（ERαhigh/ERβlow）细胞\]为研究对象,MTT法评估乳腺癌细胞对TAM的耐药性;用半定量RT-PCR法检测细胞中耐药相关基因MDR1、TOPOⅡ、LRP和GST-π的mRNA表达水平,用Western blotting法检测细胞中耐药相关信号通路MAPK、PI3K/Akt的p-ERK、p-Akt蛋白表达水平。结果：与对照组MCF-7细胞相比,MCF-7细胞中的ERβ高表达可促进高浓度TAM（1、5、10 μmol/L）对MCF-7细胞增殖的抑制作用\[（45.788 ± 1.641）% vs （24.288±1.170）%,（57.899±1.583）% vs（31.499±1.978）%,（59.853 ±1.648）% vs（38.039±1.482）%;均P<0.05 ）\],该抑制作用与TAM浓度呈剂量依赖性。ERβ高表达可显著抑制MCF-7细胞耐药基因MDR1、TOPOⅡ、LRP的 mRNA表达水平（0.431±0.032 vs 0.932±0.083,0.234±0.008 vs 0.391±0.002,0.47±0.028 vs 0.586±0.036;均P<0.05);可显著下调Akt和ERK蛋白的磷酸化水平（0224±0.006 vs 0.437±0.007,0.367±0.015 vs 0.756±0.039;均P<0.05)。结论： ERβ表达水平可影响乳腺癌细胞MCF-7对TAM的耐药性,该作用机制可能与耐药基因的表达及PI3K/ AKT、MAPK信号通路激活有关。     

采用体内实验探讨 IL-17A促进卵巢癌腹腔种植瘤顺铂耐药的机制

目的 探讨 IL-17A促进卵巢癌（OVCA）腹腔种植瘤顺铂（DDP）耐药的体内机制。方法 以 C57BL/6遗传背景的野生型（WT）小鼠和 IL-17A-deficient（IL-17A-/-）小鼠,雌性,各 24 只为研究对象,随机分为 WT 对照组、IL-17A-/-对照组、WT治疗组、IL-17A-/-治疗组,每组 6只。腹腔注射相同基因背景来源的小鼠卵巢癌细胞系 ID8细胞,建立腹腔种植瘤动物模型。经 DDP或等量生理盐水给药 4周和 6周后,处死小鼠,打开腹腔观察并统计腹壁、大网膜、肠系膜及主要脏器表面瘤结节形成情况。采用免疫组化染色检测 WT小鼠和 IL-17A-/-小鼠对照组肿瘤组织中 IL-17A、ABCG2、MDR1及 Gli1表达情况,以探讨内源性 IL-17A促进卵巢癌 DDP耐药的分子机制。Western blot检测各组小鼠卵巢癌种植瘤组织中 ABCG2、MDR1 及 Gli1 的表达情况。结果 WT 对照组腹腔内瘤结节数明显高于 IL-17A-/-对照组,其治疗组腹腔内瘤结节数也高于 IL-17A-/-治疗组（P＜0.05）;WT对照组小鼠腹腔肿瘤组织中 ABCG2、MDR1、Gli1蛋白表达水平明显高于 IL-17A-/-对照组,同样地,WT治疗组小鼠腹腔肿瘤组织中 ABCG2、MDR1、Gli1蛋白表达水平也明显高于 IL-17A-/-治疗组（P＜0.05）。结论 内源性 IL-17A通过 Gli1介导的 Hh信号通路上调耐药相关蛋白 ABCG2和 MDR1的表达,进而促进卵巢癌腹腔种植瘤的DDP耐药。     

抗CD44mAb A3D8对腹水源卵巢癌球形体形成细胞凋亡的影响及机制

目的 观察抗CD44单克隆抗体(mAb) A3D8对腹水源卵巢癌球形体形成细胞(A-SFC)凋亡的影响,并探讨其机制.方法 将常规培养的A-SFC随机分为观察组和对照组,观察组加入A3D8至其终浓度为2 mg/L,对照组不加药.培养24h后用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率;用罗丹明123试剂盒测算细胞线粒体膜电位;用Western blot法检测A-SFC细胞中的CDK2、cyclin A、Bcl-2和Caspase-3.结果 观察组细胞凋亡率11.62％±1.01％、线粒体膜电位损失率31.32％±3.47％,对照组分别为6.02％±0.79％、17.65％±2.03％,两组细胞凋亡率和线粒体膜电位损失率相比P均＜0.05.观察组CDK2、cyclinA、Bcl-2、Caspase-3蛋白相对表达量分别为对照组的79％、64％、95％、160％.结论 A3D8可促进A-SFC凋亡,其机制可能与A3D8下调CDK2、cyclin A、Bcl-2表达,上调Caspase-3蛋白表达,促进线粒体膜电位损失有关.     

帕金森病患者T淋巴细胞亚群的检测及意义

目的:研究T淋巴细胞亚群在帕金森病患者(PD)外周血淋巴细胞中的改变,并探讨其在疾病进程中的意义.方法:选取PD患者28例,并依据改良的Hoehn&Yahr分级标准分为PD1(Ⅰ级)、PD2(Ⅱ级)和PD3(Ⅲ级)3个亚组,用流式细胞术检测CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+和调节性T淋巴细胞(CD4+Foxp3+)在-外周血淋巴细胞中的百分率,并与正常对照组18例进行比较.结果:PD3亚组外周血淋巴细胞中CD3+CD8+的百分率高于对照组(P＜0,05).PD2和PD3亚组的CD4+Foxp3+百分率显著低于对照组和PD1亚组(P＜0.05).结论:PD组外周血淋巴细胞中CD3+CD8+和CD4+Foxp3+百分率改变导致细胞免疫失衡,可能参与了帕金森病的病理进程.     

抗CD44 mAb A3D8对卵巢癌球形体形成细胞增殖和凋亡的影响*

摘要 目的：探讨抗CD44单克隆抗体(mAb)A3D8对3种卵巢癌球形体形成细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法：用MTS法检测A3D8对细胞增殖的影响;采用PI染色及流式细胞仪检测A3D8对细胞周期的影响;用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测A3D8在细胞凋亡中的作用;用罗丹明123试剂盒检测A3D8对细胞线粒体膜电位的影响;并采用Western Blotting法检测A3D8作用于3种卵巢癌球形体形成细胞后,CDK2、cyclinA、Bcl-2和caspase-3的改变。结果：A3D8可抑制3种卵巢癌球形体形成细胞的增殖,且此抑制作用呈现剂量和时间依赖性;A3D8可在阻滞S期的同时降低G0/G1期比例;A3D8可促进3种细胞凋亡,与DDP联用,细胞凋亡率较单独使用DDP增高;A3D8的处理可导致3种细胞的线粒体膜电位损失,CDK2、cyclinA、Bcl-2蛋白表达下调,caspase-3表达上调。结论：A3D8可能是通过影响p21/CDK2/cyclinA途径阻滞细胞周期达到抑制3种卵巢癌球形体形成细胞增殖的结果,并且可通过线粒体途径促进细胞凋亡。     

人卵巢癌细胞系干/祖细胞分离及其鉴定

目的:自人卵巢癌细胞系SK-OV-3中分离干/祖细胞并进行鉴定。方法:采用无血清球形体形成法从SKOV-3中分离培养卵巢癌干/祖细胞;采用实时定量PCR和蛋折质印迹法测定球形体细胞干/祖细胞相关标志ABCG2、Oct-4、Nanog基因和蛋白的表达;流式细胞仪检测其耐药性;双层软琼脂检测其克隆形成能力;NOD/SCID小鼠检测其体内致瘤性。结果:球形体细胞表达干/祖细胞相关标志Oct-4、ABCG2、Nanog;对顺铂高耐药;在双层软琼脂上克隆形成率达(13.67±1.48)%;1 000个球形体形成细胞就能在NOD/SCID鼠中成瘤。结论:采用无血清培养基中球形体形成法从SKOV-3细胞系中可以分离出具有干/祖特性的卵巢癌细胞,可为今后研究卵巢癌的发生、发展、复发及其化疗药物筛选提供简便实用的体外模型。     

胆结石的成因及中西药预防的研究进展

胆结石以胆固醇结石最为常见，我国西北地区此病的发病率较其他地区略高［1］。近年来胆结石的发病率伴随着人们生活水平的提高和饮食习惯改变而逐步升高，严重影响了现代人的健康生活，也致使很多患者遭受着很大的困扰，如何预防和治疗胆结石病也逐渐成为了人们深入探究的突出课题，因此很多医务工作者对胆结石病的成因以及此病的预防也有了大量探究，现就胆囊结石成因以及此病中西医预防近5年的研究进展进行以下综述。     

TNFSF15表达下调或缺失对卵巢癌组织中肿瘤新血管形成的影响

目的:探讨肿瘤坏死因子超家族-15(TNFSF15)在人卵巢癌标本中的表达及在小鼠体内TNFSF15对卵巢癌血管生成及卵巢癌生长的影响。方法:应用免疫组化法检测正常组(12例)、卵巢癌组(94例)中TNFSF15的表达情况及微血管密度(MVD);雌性C57BL/6小鼠24只随机分为对照组、重组TNFSF15注射组(实验组)、TNFSF15-shRNA处理组(A组)、shRNA-对照组(B组),每组6只,各组均采用皮下注射ID8细胞制备小鼠荷瘤模型,实验组采用腹腔注射重组TNFSF15蛋白,A、B组采用TNFSF15-shRNA干扰其内源性表达的方法,通过检测小鼠肿瘤组织MVD值并测量肿瘤体积大小,观察其对小鼠卵巢癌细胞系ID8在小鼠C57BL/6体内血管生成及肿瘤生长的影响。结果:与正常卵巢组织相比,卵巢癌组织标本中TNFSF15表达显著降低(P<0.01),且Ⅲ/Ⅳ期TNFSF15阳性表达率较Ⅰ/Ⅱ期降低(P<0.05);实验组较对照组小鼠肿瘤组织中MVD值降低且肿瘤体积减小(P<0.05),而A组较B组MVD值升高且肿瘤体积增大(P<0.05)。结论:卵巢癌微环境中TNFSF15表达下调或缺失是肿瘤新血管形成的前提条件。