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目的应用人受体活性修饰蛋白-1(hRAMP1)修饰骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗急性心肌梗死(AMI)兔模型,观察基因修饰干细胞移植对AMI后兔新生血管及心功能的影响。方法采用密度梯度离心结合贴壁法培养兔MSCs,取第3~5代MSCs用于实验。应用带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的hRAMP1重组腺病毒载体和空病毒载体转染MSCs,建立AMI兔模型,随机分为hRAMP1转染MSCs移植组(hRAMP1-MSCs组)、空病毒转染MSCs移植组(MSCs组)和等体积的磷酸盐缓冲液(PBS)注射组(对照组),每组12只。模型建立后40 min,经局部注射等体积MSCs悬液或PBS至梗死交界区。MSCs移植后7、14、28 d,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清血管内皮生长因子(VEGF)水平;MSCs移植后28 d,应用超声心动仪检测兔的心脏功能,采用苏木精-伊红(H-E)染色评估心肌病理学改变、2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定心肌梗死面积,采用免疫组织化学染色检测梗死交界区CD31的表达,并计数新生毛细血管密度。结果流式细胞术测定结果显示,CD29阳性率为95.8%,CD90为98.6%,CD45为12.5%。MSCs移植后7、14、28 d,hRAMP1-MSCs组的血清VEGF水平均又显著高于MSCs组和对照组(P值均<0.05),MSCs组又显著高于对照组(P值均<0.05)。MSCs移植后28 d,hRAMP1-MSCs组的心肌纤维化程度、心肌梗死面积均显著小于MSCs组和对照组(P值均<0.05),MSCs组又显著小于对照组(P值均<0.05)。MSCs移植后28 d,3组梗死交界区均有CD31表达,hRAMP1 MSCs组新生毛细血管密度显著高于MSCs组和对照组(P值均<0.05),MSCs组又显著高于对照组(P<0.05)。结论 hRAMP1基因修饰MSCs移植较MSCs移植更能增加梗死交界区心肌新生血管密度,改善梗死后心脏的功能。 相似文献
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原发性高血压患者AT1R基因多态性与血浆AngⅡ和ET的相关性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨原发性高血压患者血管紧张素1型受体(AT1R)基因多态性与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素(ET)的相关性。方法应用PCR-RFLP技术检测64例原发性高血压患者与正常对照组61名健康受试者AT1R基因多态性,同时测定其AngⅡ和ET,并进行对照统计学分析。结果①EH组与正常对照组间血浆AngⅡ、ET水平差异显著(分别为t=5.56,P<0.01和t=5.39,P<0.01);②EH组和正常对照组之间的AT1R基因型频率有显著的差异(χ2=10.32,P<0.01),两组间C等位基因频率亦有显著差异(χ2=8.71,P<0.01);③AngⅡ在AA、AC和CC 3种基因型之间无显著性差异,而ET在3种基因型之间具有显著性差异,ET活性在CC型>AC和AA型。结论AT1R基因1166位点的变异参与高血压的发病,C等位基因可能是易感基因;AT1R基因A1166C位点变异可能部分通过升高ET而参与高血压的发病。 相似文献
55.
目的对瑞舒伐他汀与阿托伐他汀治疗冠心病(CHD)合并高脂血症(HPL)疗效与安全性比较进行Meta分析。
方法检索中国知网、万方数据库、维普数据库、中国生物医学数据库、PubMed自数据库建立至2020年1月的文献,筛选有关瑞舒伐他汀与阿托伐他汀治疗冠心病合并高脂血症的临床研究。试验组为瑞舒伐他汀治疗,对照组阿托伐他汀治疗。对纳入的文献提取资料及质量评价,采用Revman5.3软件进行Meta分析。用比值比(OR)和95%可信区间(95%CI)评价结局指标,连续性变量运用平均差值(MD)。采用漏斗图对发表偏倚进行评估。
结果共纳入14篇符合标准的文献,共1487例患者,其中试验组752例,对照组735例。与对照组相比,试验组可显著改善患者临床症状缓解率(OR=5.88,95%CI:3.31~10.43,P<0.05),降低血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平(MD=-0.28,95%CI:-0.31~-0.24,P<0.05;MD=-0.36,95%CI:-0.39~-0.33,P<0.05;MD=-0.65,95%CI:-0.69~-0.61,P<0.05);同时可抑制HDL-C、NO的下降水平(MD=0.30,95%CI:0.28~0.33,P<0.05;MD=13.19,95%CI:11.70~14.68,P<0.05)。
结论瑞舒伐他汀治疗CHD合并HPL的临床有效率更高,调脂效果更好。 相似文献
56.
BACKGROUND: Inflammatory reaction plays an important role in the incidence of restenosis after percutaneous transluminal coronary intervention. Recent studies found that bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) have strongly characteristics of immunological regulation. However, BMSCs on the inflammatory reaction in vascular injury is rarely reported.
OBJECTIVE: To investigate effects of BMSCs transplantation on expression of nuclear factor κBp65 (NF-κBp65) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) after carotid artery balloon injury of rabbits, and to analyze its correlation with intimal proliferation.
METHODS: Thirty-six rabbits were prepared for carotid artery atherosclerotic stenosis models and were randomly divided into the control group and BMSCs transplantation group. BMSCs pre-labled by DAPI was infused into rabbits by the ear vein in the BMSCs transplantation group, and the same amount of PBS solution was infused in the control group. The plasma tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) levels were detected by ELIAS in prior to model preparation and at 7, 14, 28 days after transplantation. The NF-κBp65 and PCNA expressions in vessels tissues were detected by immunohistochemical analysis at 14 days after transplantation, and vascular morphological changes were determined by hematoxylin-eosin staining at 28 days after transplantation. RESULTS AND CONCLUSION: The expression of NF-κBp65 and PCNA in the BMSCs transplantation group decreased significantly compared with control group at 14 days after transplantation (P < 0.05). At 7, 14, and 28 days after transplantation, the plasma TNF-α and IL-6 levels in the BMSCs transplantation group were significantly lower than those in the control group (P < 0.05). The intimal area, the ratio of the intima/media area and the luminal stenosis ratio were significantly decreased in the BMSCs transplantation group than control group at 28 days after transplantation (P < 0.05). BMSCs is capable to decrease the inflammatory reaction of injured vessels and down-regulate PCNA expression by inhibiting NF-κBp65 in injured vessels, and BMSCs may be good for inhibition of injured vessels intimal proliferation. 相似文献
57.
目的建立一种体外纯化及培养扩增SD大鼠骨髓间充质干细胞(MsCs)的简便有效方法。方法全骨髓法分离培养SD大鼠MSCs,通过体外培养和连续传代达到纯化和扩增MSCs目的。倒置显微镜下观察细胞形态变化情况:利用四唑盐比色(MTT)法测定MSCs的生长曲线:流式细胞仪(FCM)鉴定MSCs膜抗原。结果SD大鼠胫骨全骨髓细胞在分离后与含10%优质胎牛血清DMEM培养基混合,约5-10min后即可见大量有核细胞贴壁,细胞形态为圆形,24-48h后可见贴壁细胞转变为椭圆形、多角形及短梭形,7-12d时细胞呈长梭形并达到90%单层融合。通过传代细胞进一步纯化及扩增。细胞传代后2d内处于潜伏期,3d后进入生长期,5d后进入平台期。FCM检测第4代MSCs膜表面抗原CD45、CD90、CD29阳性率分别为1.50%、99.18%、97.70%。结论SD大鼠全骨髓贴壁法能有效得到分离纯化的MSCs,用此方法培养的SD大鼠MSCs生长稳定,增殖能力活跃,具有MSCs的一般生物学特性,可以为组织工程提供理想的种子细胞。为本实验研究打下基础。 相似文献
58.
基质金属蛋白酶与冠心病研究新进展 总被引:2,自引:0,他引:2
基质金属蛋白酶参与冠心病的发生发展过程,并在术后再狭窄中具有重要作用。现就近年来基质金属蛋白酶和冠心病的研究进展作一综述。 相似文献
59.
目的探讨以si RNA为载体沉默骨髓间充质干细胞(MSC)中核因子E2相关因子2(Nrf2)基因后细胞移植对大鼠心肌梗死后心肌纤维化和心室重构的影响及可能机制。方法建立心肌梗死大鼠模型,随机分为沉默Nrf2基因的MSC移植组(MSCNrf2-/-组)、过表达Nrf2基因的MSC移植组(MSCNrf2+/+组)和生理盐水转染MSC移植组(对照组),每组12只。细胞移植后28天,采用Masson染色检测心肌梗死边缘区胶原沉积含量和纤维化程度,Western blot检测梗死心肌Nrf2和血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达水平,超声心动图评价梗死后心功能。结果 si RNA-Nrf2转染MSC后,Nrf2蛋白表达明显减少。移植后第28天,MSCNrf2-/-组心肌组织纤维化程度较对照组加重,MSCNrf2+/+组心肌组织纤维化程度较对照组减轻(P0.05);MSCNrf2-/-组梗死心肌中Nrf2、HO-1蛋白表达较对照组下降(P0.05),而MSCNrf2+/+组梗死心肌中Nrf2、HO-1蛋白表达较对照组增加(P0.05);超声心动图结果显示,与对照组比较,MSCNrf2-/-组左心室舒张期末内经(LVEDD)和左心室收缩期末内经(LVESD)增大,左心室射血分数(LVEF)下降(P0.05),MSCNrf2+/+组LVEDD和LVESD均减小,LVEF无下降(P0.05)。结论 si RNA-Nrf2可有效干扰MSC中Nrf2蛋白的表达,降低外源性MSC对梗死心脏的修复能力,增加心肌梗死区胶原沉积,进而促进心室重构,降低心功能。由此推测Nrf2信号通路在干细胞移植治疗心肌梗死后心肌重构和纤维化中起了关键作用。 相似文献
60.
目的探讨腺病毒介导人受体活性修饰蛋白1(hRAMP1)基因转染间充质干细胞(MSC)移植对心肌梗死后心肌纤维化和心室重构的影响及可能机制。方法建立心肌梗死再灌注兔模型,随机分为hRAMP1组(高表达hRAMP1基因的MSC移植,n=10)、MSC组(无基因修饰的单纯MSC移植,n=10)和对照组(生理盐水注射,n=10)。Western blot检测心肌梗死后1、3、7和28d心肌梗死局部基质金属蛋白酶9(MMP-9)和hRAMP1蛋白表达水平;同时行2,3,5三苯基氯化四氮唑染色检测心肌梗死面积,心肌组织Masson染色评价心肌梗死后胶原沉积和纤维化程度;超声心动图评价28d时左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)及短轴缩短率(FS)。结果细胞移植后,与对照和MSC组相比,hRAMP1组的LVEF[(57.2±6.3)%比(36.2±2.2)%、(45.3±5.4)%]和FS[(29.2±2.4)%比(13.5±1.4)%、(19.4±2.4)%]均升高(均P<0.05),而LVESD[(7.9±0.8)比(12.7±0.9)、(10.4±0.9)mm]和LVEDD[(12.7±1.2)比(17.3±2.4)、(16.3±1.1)mm]、心肌梗死面积、胶原容积分数均明显降低,胶原沉积减少。免疫印迹结果显示,hRAMP1组MMP-9蛋白表达较对照、MSC组明显增高。结论 hRAMP1移植通过促进梗死区心肌组织MMP-9表达,降低梗死区胶原沉积,抑制心肌纤维化,进而改善心室重构,提高心功能。 相似文献