宫颈腺癌和鳞癌活检组织中的HPV18和HPV16—一项对比研究

５０例活检宫颈癌组织，内含２０例宫颈腺癌和２０例宫颈鳞癌，运用ＤｄｅＩ限制性内切酶，分析Ｌ１区共引物ＰＣＲ扩增的产物。结果表明，鳞状细胞癌中ＨＰＶ１６的检出率远比腺癌高（８０％，１５％，Ｐ＜０．００１）；相反，腺癌中ＨＰＶ１８的检出率比鳞癌高（４５％，５％，Ｐ＜０．００１）。此差异可能反映了不同的病毒受体存在于具有不同形态潜能的宫颈细胞中，表明特异ＨＰＶ感染在直接致癌中发挥着作用。     

儿童急性下呼吸道感染病原菌的检查与分析

我们对山西省儿童医院、大同市三医院收治的98例急性下呼吸道感染(ALRI)患儿进行细菌学测定,并用反向血凝法对检出的流感嗜血杆菌分型,再用PCR法对98例痰病菌中的Hib进行鉴定。现分析如下。     

不明原因复发性流产小鼠模型CD4~+CD25~+ Treg的比例及Foxp3表达的变化

目的分析比较小鼠正常妊娠模型和流产模型中CD4+CD25+调节性T细胞CD4+CD25+Treg的比例、Foxp3蛋白表达水平及胎盘吸收率,探讨CD4+CD25+Treg与不明原因复发性流产的关系。方法以雌性CBA/J×雄性Balb/c为对照组,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为流产组,各10对,于妊娠第14天采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析CD4+CD25+Treg在CD4+细胞中所占比例,Western blot检测并比较2组CD4+T细胞中Foxp3的表达,并观察2组小鼠的胎盘吸收情况。结果流产组CD4+CD25+Treg所占比例为(10.1±0.59)%低于对照组(15.5±0.78)%(P<0.05)。流产组胚胎吸收率为(25.6±3.5)%,明显高于对照组(2.4±1.6)%(P<0.01)。流产组Foxp3谱带密度相对值为0.30±0.018,低于正常组的0.68±0.025(P<0.05)。结论小鼠的自然流产模型建立成功,流产组孕鼠CD4+CD25+Treg的比例和Foxp3蛋白表达水平明显低于正常妊娠组,提示流产组高流产率可能与CD4+CD25+Treg数量和Foxp3的表达减少有关,CD4+CD25+Treg细胞的数量减少和功能缺陷可能是不明原因复发性流产的发生机制之一。     

N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖诱导的小鼠感染性早产的影响

目的:初步探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)预防感染性早产的作用机制。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法检测脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的感染性早产小鼠模型(模型组)胎盘NF-κBp65、TNF-αmRNA和蛋白的表达,以及NAC干预后(NAC预防组和NAC治疗组)早产率、NF-κBp65和TNF-α的表达变化,并以正常孕鼠作对照。结果:对照组孕鼠无早产的发生,而模型组全部早产,组间比较有显著性差异(P<0.01);对照组NF-κBp65、TNF-α有少量表达,模型组则都显著升高(P<0.05);NAC预防组与模型组比,NF-κBp65和TNF-α表达明显减少(P<0.05),且早产率也明显下降(P<0.05);NAC治疗组与模型组相比无统计学差异。结论:NAC可降低感染性早产小鼠胎盘NF-κBp65和TNF-α的表达,对于感染性早产有保护作用。     

α-奈黄酮对人类卵巢癌紫杉醇耐药细胞裸鼠移植瘤CYP1B1基因表达的影响

目的研究黄酮类化合物α-奈黄酮（α-NF）对人类卵巢癌耐药细胞株A2780TS裸鼠移植瘤CYP1B1基因的影响。方法采用A2780TS细胞移植成功的24只裸鼠分为对照组、ANF组、紫杉醇组及联合用药组（α-NF＋紫杉醇）。RT—PCR及Western blotting方法测定CYP1B1 mRNA及蛋白表达水平。结果CYP1B1 mRNA表达水平α-NF组及联合用药组与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）,但CYP1B1蛋白表达水平α-NF组及联合用药组较对照组明显降低（P〈0．01）。结论α-NF在mRNA水平对CYP1B1基因无调节作用,在蛋白水平可下调A2780TS裸鼠移植瘤细胞CYP1B1的表达,发挥逆转A2780TS细胞紫杉醇耐药的作用。     

母血中胎源性RASSF1A基因的检测及其在子痫前期中的临床意义

目的:初步探讨孕妇血浆中胎源性Ras相关区域家族1A(Ras association domain family 1A,RASSF1A)基因的动力学特点及其在子痫前期中的含量变化。方法:应用2种甲基化敏感的限制性内切酶HinP1I和HhaI去除孕妇血浆中非甲基化的RASSF1A序列,保留超甲基化RASSF1A序列。通过含目的基因的质粒标准品绘制标准曲线,结合荧光定量PCR(FQ-PCR)技术测定血浆中酶切后RASSF1A基因的含量,反映游离胎儿DNA水平。同时检测β-actin基因确保酶对非甲基化序列的完全消化。结果:①最早可在妊娠7+3周检测出孕妇血浆中超甲基化的RASSF1A基因;②孕妇血浆中超甲基化RASSF1A基因的含量随妊娠的进程逐渐增加,且在分娩后24 h内消失;③未妊娠组中均未检测到超甲基化的RASSF1A基因;④妊娠晚期子痫前期组超甲基化RASSF1A基因含量为正常同期妊娠组的3.52倍。结论:孕妇血浆中超甲基化的RASSF1A基因可以作为胎儿表观遗传学标志物,其水平的异常变化或能提示子痫前期-子痫的发生。     

CYP1A1和CYP1B1基因多态性与RPL易感性

目的 探讨CYP1A1、CYP1B1基因多态性与复发性流产(RPL)遗传易感性关系,为预防和治疗该病提供新靶点。方法 本研究采用等位基因特异性PCR(As-PCR)和聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)方法,针对CYP1A1基因MspΙ酶切位点和CYP1B1 L432V多态位点,检测81例患有原因不明RPL病例组和98名有生育史健康女性对照组之间差异。结果 RPL组和对照组CYP1A1 MspΙ位点3种基因型m1/m1、m1/m2、m2/m2分布频率差异无统计学意义(χ²=0.335,P>0.05);CYP1B1 L432V多态位点3种基因型C/C、C/G、G/G在病例组和对照组分布差异有统计学意义(χ²=7.467,P<0.05);2组间C、G等位基因分布差异有统计学意义(χ²=9.129,P=0.003);G/G、C/G基因型与C/C基因型比较,RPL危险度分别提高2.620、1.954倍;等位基因G使RPL危险性增加2.038倍。结论 CYP1B1 L432V突变基因型增加RPL发病风险,尚不能认为CYP1A1基因MspI位点多态性与RPL易感性有关。     

促胃泌素释放肽在自然流产小鼠母胎界面作用

自然流产是妇产科常见病,育龄期妇女的发生率约为1%～2%,其中有50%原因不明^[1]。促胃泌素释放肽(gas-trin-releasing peptide,GRP)是一种与两栖类蛙皮素相似的物质,主要分布在哺乳动物胃肠系统、大脑、脑垂体、脊髓、交感神经节、泌尿生殖系统等组织^[2]。