靶向沉默大鼠星形胶质细胞VEGF表达siRNA的筛选

目的 筛选靶向沉默大鼠星形胶质细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的短链干扰RNA(short interfering RNA,siRNA).方法 建立大鼠星形胶质细胞培养模型,根据siRNA原理设计、构建、合成、纯化和定量4种靶向大鼠VEGF的siRNA(T1,T2,T3,T4),应用琼脂糖凝胶电泳观察其纯度.将合成的4种siRNA转染至星形胶质细胞,应用实时荧光定量RT-PCR检测星形胶质细胞VEGF mRNA含量,应用免疫细胞化学及Western蛋白印迹法半定量星形胶质细胞VEGF的表达.结果 合成的4种siRNA纯度高.转染T1、T2、T3后,培养的星形胶质细胞VEGF mRNA含量、VEGF表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).而转染T4 siRNA的星形胶质细胞其VEGF mRNA、VEGF的表达与对照组相比显著下降(P<0.01).结论 筛选出的T4 siRNA对培养的星形胶质细胞VEGF的表达起特异性抑制作用,其机制与T4 siRNA 使VEGFmRNA的含量减少有关.     

模拟动作电位微电场效应能直接始动髓鞘化

目的：探讨模拟动作电位微电场效应能否直接始动中枢神经轴突髓鞘化。方法：选取2根直径5μm碳纤维（中科院上海生命科学研究院神经科学研究所提供）。将正负极分别与2根碳纤维的导引铜丝相连，刺激频率1Hz，电压40mV，电流10μA，分波宽1&;#215;10^-2s，1&;#215;10^-3s，1&;#215;10^-4s，1&;#215;10^-5s4组。将碳纤维铺于神经元与胶质细胞共培养的培养皿底部，模拟神经轴索。通入1Hz，40mV，10μA的单相方波电流，30min／次，1次／d。连续10d，动态观察胶质细胞生长及包裹碳纤维情况。结果：①相差显微镜观察：波宽1&;#215;10^-3s组，培养第7天，可见细胞团粘附于负极碳纤维，细胞团中生长出细胞膜样物质包绕碳纤维并沿纤维向两端延伸。波宽1&;#215;10^-4s组，培养第12天始，可见小而圆的细胞靠近负极碳纤维。②SP免疫组化染色：波宽1&;#215;10^-4s，1&;#215;10^-3s组，有少突胶质细胞或其前体包裹碳纤维负极。结论：动作电位传导过程中造成的局部负电场能直接始动并参与中枢神经轴突髓鞘化。     

骨髓间质细胞移植对前脑缺血大鼠空间学习记忆能力的影响

目的 研究骨髓间质细胞（MSCs）颅内移植对前脑缺血大鼠学习、记忆能力的影响。方法 体外分离培乔MSCs，用四血管夹闭法制作前脑缺血模型，将60只SD大鼠随机分为空白对照组、冻融MSCs颅内移植组和MSCs颅内移植组3组，用morris水迷宫评定大鼠学习、记忆能力。结果 在定位航行试验中，MSCs颅内移植组评分与冻融MSCs颅内移植组、空白对照组之间有显著差异（P〈0．01），冻融MSCs颅内移植组、空白对照组两组评分无显著差异。空间探索试验中，3组评分没有明显区别。结论 MSCs颅内移植能促进大鼠空间定位学习能力的改善。对空间记忆能力无明显改善作用。     

Changes of somatosensory evoked potentials and sciatic nerve conductivity in chronic renal failure in rats

ＣｈａｎｇｅｓｏｆｓｏｍａｔｏｓｅｎｓｏｒｙｅｖｏｋｅｄｐｏｔｅｎｔｉａｌｓａｎｄｓｃｉａｔｉｃｎｅｒｖｅｃｏｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙｉｎｃｈｒｏｎｉｃｒｅｎａｌｆａｉｌｕｒｅｉｎｒａｔｓＧｕａｎｇＬｉｘｉａ（光丽霞）；ＹｕａｎＦａｈｕａｎ（袁发焕）；Ｌ...     

脑老化过程中的白质损害与P300变化的关系

目的 观察脑白质变化（WML）与事件相关电位P300变化关系，认识P300是否能够反映WML时认知功能改变。方法 观察35例老龄及老龄前期个体的MRI及事件相关电位P300变化，并对WML与P300潜伏期变化进行相关分析。结果 轻度WML11例，中度17例，重度7例，P300潜伏期明显延长，随WML的程度加重而加重，相关分析提示两呈正相关。结论 观察老年性WML主要依靠T2像或质子密度加权像。WML能引起事件相关电位P300延长，其损害程度与P300潜伏期变化呈正相关。     

应用神经网络重建仪治疗22例偏瘫患者的临床观察

对象和方法　住院脑梗塞患者 4 2例 ,均经头颅ＣＴ或ＭＲＩ证实为脑梗塞 ,存在不同程度的偏瘫。治疗组 2 2例 ,男性 15例 ,女性 7例 ,年龄2 2～ 78岁 ,平均为 5 5岁 ,平均肌力Ⅱ张 ,平均病程 3 8天 ;对照组 2 0例 ,男性 13例 ,女性 7例 ,年龄 2 5～ 75岁 ,平均为 5 1岁。平均肌力Ⅱ级 ,平均病程 2 9天。治疗方法 :治疗组药物选用血塞通针 (昆明制药厂生产 ) 0 6静注 ,1/日 ,配合口服药物。用丹麦生产的ＡｕｔｏｍｏｖｅＡＭ 80 0神经网络重建仪 ,行肌电生物反馈疗法。治疗前向患者及家属讲清肌电生物反馈治疗的机理 ,作用和训练方法。患者…     

大鼠慢性脑灌注不足时的运动诱发电位

目的 制备大鼠慢性脑灌注不足模型,观察运动诱发电位(MEP)变化,研究慢性脑低灌注对脑传导功能的影响.方法 采用双侧颈总动脉结扎制作慢性脑灌注不足动物模型,实验分为对照组、缺血半月组、缺血1月组和缺血2月组共4组.使用电刺激诱发,双下肢记录,刺激电极放于皮层运动区,记录电极置于对侧腓肠肌,记录皮层MEP,观察潜伏期和波幅变化.结果 慢性低灌注期MEP潜伏期显著延长(P<0.01),并随低灌注持续时间延长而出现MEP潜伏期延长更为明显.结论 慢性低灌注可以引起脑内传导功能受损,临床上MEP可用来反映慢性脑灌注不足后轴索的功能状态.     

强直性肌营养不良症1例

病例男，15岁，因“双下肢僵硬2年，握拳后放松困难1年”入院。入院前2年患者无明显诱因出现双下肢僵硬、强直，起步行走困难，休息数秒钟后症状消失。1年后出现双手用力握拳后不能立即伸开，上肢伸屈不灵活，需重复活动后才能放松，未引起重视。以后逐渐感四肢无力、僵直、不能持重物。既往体健。家族中无类似病史。查体：面部表情少，颞肌及咀嚼肌轻度萎缩，颧骨突出，似“斧头状”，双侧肱三头肌、双侧股四头肌萎缩，叩击时可诱发肌肉痉挛，出现肌球，双上肢肌力Ⅳ＋级，双下肢肌力正常，四肢肌张力正常，双上肢腱反射未引出，双下肢腱反射减弱，病理征（一）。     

脑老化导致学习记忆损害及其与髓鞘结构改变的关系

目的探讨脑老化时认知功能改变、髓鞘结构和成分变化及其之间关系。方法使用穿梭箱、电镜和免疫组织化学技术,观察了老年大鼠学习、记忆维持功能、髓鞘和轴突的超微结构改变,以及髓鞘碱性蛋白表达变化。结果在训练第1天至第6天,老年大鼠主动逃避反应率(AAR)、总逃避反应(GAR)率较青年组显著减慢(P<0.01),逃避潜伏时(LER)较青年组延长(P<0.01),训练第6天青年组GAR达到(89.0±6.6)%,老年只有(40.5±6.8)%,青年组LER为(3.16±0.47)s,老年组为(6.10±0.71)s。在记忆功能维持上,训练后第5天和第10天,老年组大鼠AAR、GAR很快降低,LER明显升高,较青年组差异有显著性(P<0.01)。老年大鼠髓鞘异常为轴突周围间隙扩大,髓鞘致密层分离,部分板层结构破坏,髓鞘内形成大泡,轴突直径增加,轴突内含有吞噬小泡、致密颗粒和巨大线粒体,少突胶质细胞电子密度增加。老年大鼠髓鞘碱性蛋白(MBP)表达下降。结论老年大鼠学习及记忆维持能力降低,老化可以导致轴突及髓鞘的结构变化,MBP表达降低,髓鞘结构和成分改变可能参与老化时学习和记忆损害。     

去甲肾上腺素对星形胶质细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的:探讨去甲肾上腺素(Noradrenalin, NA)对星形胶质细胞血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,阐明NA促进高原脑水肿形成的机制.方法:建立大鼠胶质细胞培养模型.分为正常对照组、LNA组、MNA组及HNA组,分别在培养液中加入0μM、5μM、10μM、30μM NA(Sigma公司,美国),在常氧培养条件下(5%CO2、95%O2)培养2h(提取总RNA)或20h(提取总蛋白质).应用SYBRGreen Quantitative RT-PCR试剂盒(Sigma公司,美国)在RG-3000仪上进行VEGF-mRNA荧光定量RT-PCR检测;应用蛋白印迹法检测VEGF的表达.结果:与对照组相比,LNA组、MNA组及HNA组星形胶质细胞VEGF-mRNA的表达持续显著增高(分别P＜0.01, P＜0.01,P＜0.001),与NA浓度呈剂量依赖关系.与对照组相比, LNA组星形胶质细胞VEGF表达有一定程度升高,但无差别显著性(P＞0.05),而MNA组及HNA组星形胶质细胞VEGF的表达量显著增高(分别P＜0.01,P＜0.001),与NA浓度呈剂量依赖关系.结论:NA可从分子水平诱导星形胶质细胞表达VEGF,呈剂量依赖关系.