米非司酮抑制人卵巢癌3AO细胞裸鼠移植瘤生长的研究

目的 :研究抗孕激素米非司酮 (mifepristone ,MIF)对人卵巢癌 3AO细胞株裸鼠移植瘤生长的抑制作用并探讨其作用机制。方法 :随机将 14只人卵巢癌细胞 3AO移植瘤荷瘤裸鼠分为两组 ,MIF组皮下注射MIF 0 .2mg/d ,对照组注射等量溶剂。观察治疗前后移植瘤的体积和重量。应用末端转移酶介导的生物素标记脱氧尿苷三磷酸缺口标记法 (TUNEL)和流式细胞术 (FCM)检测细胞凋亡率和肿瘤细胞周期时相的变化 ;免疫组织化学染色法检测移植瘤组织增殖细胞核抗原 (PCNA)和孕激素受体 (PR)的表达。光镜和电镜观察移植瘤细胞凋亡的超微结构变化。结果 :治疗 4周后 ,MIF组和对照组裸鼠移植瘤体积和重量分别为 1186 .14± 4 96 .14mm3和 1.30± 0 .4 3g ,2 199.85± 5 41.4 9mm3和 2 .30± 0 .31g(P <0 .0 1)。TUNEL测定显示 ,MIF组细胞凋亡率为 (11.33± 1.5 3) % ,对照组为(2 .6 7± 0 .5 8) % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。FCM测定 ,MIF组凋亡率为 (15 .6 2±3.87) % ,也明显高于对照组的 (7.5 9± 1.4 7) % (P <0 .0 5 ) ,肿瘤细胞出现典型的细胞凋亡形态变化 ,并阻滞于G0 ～G1期 ,S期细胞显著减少 (P <0 .0 5 )。MIF组肿瘤细胞PCNA及PR表达率分别为 2 0 .5 %和 8.0 % ,明显低于对照组的 4 8.0 %和 2 2 .0 % (P <0 .0 5 )     

米非司酮对子宫内膜癌细胞系E-钙粘素和核因子kappa B表达的影响

目的:探讨米非司酮(Mifepristone,MIF)对子宫内膜癌细胞中核因子kappaB(nuclear factor kappa B,NF-κB)与E-钙粘素表达的影响,及NF-κB与E-钙粘素之间的关系。方法:体外培养子宫内膜癌细胞系HHUA,以不同浓度MIF(0、0.1×10-6、0.1×10-5、1×10-5、5×10-5、1×10-4mol/L)分别作用细胞24h、48h和72h,用免疫组化法检测NF-κB p65与E-钙粘素的蛋白表达水平。结果:MIF显著抑制HHUA细胞生长。MIF显著降调NF-κB p65的蛋白表达水平(P<0.05),增加E-钙粘素的蛋白表达水平(P<0.05)。NF-κB p65表达与E-钙粘素表达呈显著负相关(r=-0.94)。结论:MIF可抑制子宫内膜癌细胞系HHUA的生长,其机制可能通过抑制NF-κB的表达,进而增加其靶基因E-钙粘素的表达,来达到抑制子宫内膜癌细胞生长的作用。     

米非司酮对子宫内膜癌细胞株HHUA裸鼠移植瘤生长及survivin、caspase-3的影响

目的:研究米非司酮(mifeprisitone,MIF)对子宫内膜癌细胞系HHUA裸鼠移植瘤生长的抑制作用及对survivin、caspase-3的影响。方法:体外培养子宫内膜癌HHUA细胞接种裸鼠皮下建立裸鼠移植瘤动物模型,随机将20只移植瘤荷瘤裸鼠分为两组,分别用MIF、精制花生油治疗6周。观察治疗前后移植瘤体积的变化。HE染色观察肿瘤组织的病理变化。免疫组织化学染色法检测移植瘤组织survivin表达,Image-proplus 4．1．00软件分析系统进行染色结果半定量分析,应用RT-PCR方法检测肿瘤组织survivin、caspase-3的mRNA表达,并用Alphalmager 2200系统进行分析。结果:MIF组移植瘤体积115．25±10．97mm~3,对照组移植瘤体积313．25±43．92mm~3,二者差异有统计学意义(P＜0．01);HE染色示MIF组移植瘤坏死面积较对照组显著增加;MIF组survivin HSCOREs为85．9±11．2,对照组207．6±39．6,两者差异有统计学意义(P＜0．01);MIF组survivin mRNA光密度比值为1．65±0．17,对照组2．75±0．23,两者差异有统计学意义(P＜0．01);MIF组caspase-3的mRNA光密度比值为3．98±0．32,对照组2．12±0．25,两者差异有统计学意义(P＜0．01)。结论:MIF具有抑制子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的作用;其机制可能与下调survivin、上调caspase-3表达有关。     

TGF-β1和Smad4基因转染对子宫内膜癌细胞HHUA体外增殖和凋亡的研究

目的:探讨TGF-β1和Smad4基因转染对子宫内膜癌细胞HHUA体外增殖、细胞周期、凋亡及Smad7、PAI-1的影响。方法:电穿孔法将Smad4基因转染入HHUA细胞。观察未转染和转染Smad4基因的HHUA细胞在不同浓度TGF-β1(0,2.5,5,10ng/ml)培养液中其Bcl-2、Bax、Smad7、PAI-1的表达、肿瘤细胞增殖活性和凋亡活性变化及Smad7、PAI-1和TGF-β1 mRNA水平。结果:TGF-β1以时间依赖方式明显抑制HHUA生长(P<0.05),各浓度组间无显著差异;转染Smad4后TGF-β1仍明显抑制HHUA生长(P<0.01)。转染Smad4前后,TGF-β1均阻滞细胞停滞于G1期;转染后作用增强,差异有统计学意义(P<0.01)。TGF-β1明显降调Bcl-2,升调Bax、Smad7和PAI-1表达,促进细胞凋亡;转染Smad4后作用增强(P<0.05)。TGF-β1、Smad7和PAI-1 mRNA水平在TGF-β1作用和(或)Smad4转染前后都明显升高。结论:TGF-β1以时间依赖方式抑制HHUA体外增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡;转染Smad4明显增强了TGF-β1的抗肿瘤作用。     

急性脑梗死患者血同型半胱氨酸及胱氨酸蛋白酶抑制剂C水平变化及意义

目的 探讨血浆同型半胱氨酸（Hcy）、血清胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cys C）与急性脑梗死的关系。方法 测定40例急性脑梗死患者和40例同龄健康人血中Hcy、Cys C水平。结果 急性脑梗死患者血中Hcy、Cys C水平显著高于健康对照,Pearson相关分析显示急性脑梗死组（CI）与健康对照（Con）组血中Hcy、Cys C水平均无显著相关（P〉0.05）。结论 急性脑梗死患者血Hcy、Cyc C水平显著升高,可能均为脑梗死发生发展的独立危险因素。     

CEACAM6在卵巢癌中的表达及临床意义

目的：研究CEACAM6在卵巢癌中的表达及意义。方法：用免疫组化S-P法研究CEACAM6在20例卵巢癌手术切除标本及10例卵巢上皮良性肿瘤中的表达。结果：CEACAM6在卵巢癌中的表达率与在卵巢上皮良性肿瘤中的表达率有显著性差异（P〈0．05）;CEACAM6在卵巢癌高、中、低分化组中都有阳性表达,组间比较无显著性差异（P〉0．05）：CEACAM6在浆液性和黏液性囊腺癌中均有阳性表达,二者比较有显著性差异（P〈0．05）;并在转移淋巴结中有阳性表达。结论：CEACAM6在卵巢癌及其转移淋巴结中有阳性表达,其表达率与卵巢癌的分化程度无显著相关,其在卵巢黏液性囊腺癌中的表达比浆液性囊腺癌中表达更强。     

miR1290在子宫内膜癌发生发展中的作用及其机制

目的探讨miR1290在子宫内膜癌组织中的表达情况及其与子宫内膜癌病理分级的关系, miR1290对子宫内膜癌细胞生物学特性的影响及其机制。方法收集2020年5月至2020年10月于山东大学附属省立医院手术切除的38例子宫内膜样腺癌组织、10例癌旁组织和23例正常子宫内膜组织, 采用逆转录聚合酶链反应检测其miR1290的表达。通过慢病毒转染敲低子宫内膜癌细胞KLE和Ishikawa中miR1290的表达, 细胞计数试剂盒8(CCK-8)法和集落形成实验检测细胞的增殖能力, 划痕实验和Transwell实验检测细胞的侵袭、迁移能力, Western blot法检测上皮-间充质转化(EMT)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt和Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达。结果子宫内膜癌组织中miR1290的相对表达量为5.40±3.20, 为正常子宫内膜组织的1.55倍(P<0.01), 为癌旁组织的1.75倍(P<0.01)。17例增生期和6例分泌期子宫正常内膜组织中miR1290的相对表达量分别为3.00±1.08和4.97±0.58, 差异有统计学意义(P<0.01)。在KLE细胞和Ishikawa细胞中, 相对于Sh-NC组, Sh-miR1290组细胞的miR1290表达降低, CCK-8法检测的吸光度、集落形成实验检测的集落形成率升高, Transwell实验检测的穿膜细胞数、划痕实验检测的划痕愈合率降低(均P<0.05)。敲低miR1290, 可导致KLE细胞中EMT相关蛋白N-cadherin、Vimentin、Snail和Slug表达降低(均P<0.05), PI3K和P-Akt/Akt的表达降低(均P<0.05), Wnt和β-catenin的表达未见明显变化(均P>0.05);而Ishikawa细胞中EMT相关蛋白N-cadherin、Snail和Slug表达降低, E-cadherin表达升高(均P<0.05), Wnt和β-catenin的表达降低(均P<0.05), 而PI3K和P-Akt/Akt的表达未见明显变化(均P>0.05)。结论子宫内膜癌组织中miR1290的表达高于癌旁组织和正常子宫内膜组织。敲低miR1290的表达可以促进子宫内膜癌细胞增殖, 但抑制细胞的侵袭、迁移及EMT能力, 可能通过PI3K/Akt和Wnt/β-catenin通路发挥作用。     

利用肾脏病饮食改良（MDRD）简化公式估算住院患者的肾功能状况

目的：探讨利用血清肌酐（SCr）、年龄、性别估算成年住院患者肾小球滤过率（GFR）在肾功能评价中的价值。方法：收集2006年8月～11月间在中日友好医院住院患者的临床检验结果和人口学数据．包括SCr、年龄、性别。利用2005年修订的肾脏病饮食改良研究简化公式，估算成年住院患者的GFR．并根据美国国家肾脏基金会推荐的慢性肾脏病分期标准统计这些患者的肾功能状况。结果：2006年8月～11月．共7750例成年住院患者在院期间完成了至少1次的SCr测定，39.4％的患者存在肾功能不全情况（GFR〈90ml／min），男性和女性情况类似。31．7％的患者存在隐匿性肾功能不全（SCr≤106μmol／L，GFR〈90ml／min）。结论：住院患者存在慢性肾功能不全和隐匿性肾功能不全的情况很普遍，检验科在测定SCr的同时报告GFR估算值．有利于医生评价患者的肾功能状况。检验科应充分利用医院信息系统，尽早实施这一附加服务。     

人子宫颈高分化鳞癌裸鼠移植瘤株的建立及其生物学特征的研究

目的：建立人子宫颈癌裸鼠移植瘤株，为开展宫颈癌的实验研究奠定基础。方法：将子宫颈高分化鳞癌手术标本移植于裸鼠皮下，生长后，于鼠间连续传代，并检测移植瘤的相关生物学特征；进行光镜、电镜观察和染色体分析；用免疫组化技术检测ＥＲ、ＰＲ、Ｋｅｒａｔｉｎ、ＣＥＡ、ＰＣＮＡ，Ｐ５３、ｎｍ２３、ＨＥＲ－２；用多聚酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测ｈＰＶ１６、１８、ＨＳＶ－Ⅱ、ＣＭＶ；用流式细胞术检测ＤＮＡ含量；进行铂类抗癌药物敏感试验以及癌细胞的体外培养等。结果：历时１７个月，传了２６代，建成人子宫颈高分化鳞癌裸鼠移植瘤株，命名为ｈＣＣ－９４Ｖ。瘤株生长稳定，潜伏期１６～２０ｄ，移植成功率９２．９％，浸润转移率１１．１％。光镜、电镜下形态学与患者肿瘤结构特征一致。染色体多为异倍体，总数为９～１２０条。免疫组化检测肿瘤标记物（ＴＭ）呈高表达，癌基因蛋白呈低表达。ＰＣＲ检测ｈＰＶ１６（＋），对铂类抗癌药物敏感。用移植瘤建成体外培养细胞系ｈＣＣ－９４Ｖ及其亚株。结论：ｈＣＣ－９４为进一步进行子宫颈癌的实验研究提供了理想的动物模型和瘤源