中西医结合治疗宫内节育器致月经过多临床观察

目的:观察化瘀清热固冲汤合肾上腺色腙片治疗放置宫内节育器致月经过多的临床疗效。方法:将68例患者按随机数字表分为3组:中西药组26例,用化瘀清热固冲汤合肾上腺色腙片治疗;中药组22例,用化瘀清热固冲汤治疗;西药组20例,用肾上腺色腙片治疗。分别用药3个月经周期,停药后随访观察3个月经周期。结果:总有效率中西药组为96%,中药组为68%,西药组为60%,中西药组与中药组及西药组比较差异均有显著性(P<0.05);中医证候总积分,中西药组与中药组、西药组比较,差异均有显著性(P<0.05);月经量积分,中西药组与中药组、西药组比较,差异具有显著性(P<0.05)。结论:中西药联合治疗宫内节育器致月经过多,能显著减少月经量,改善心烦、口渴、大便干结、小便短黄、经行腹痛等瘀热证候,具有疗效优势。     

聚合酶链反应在眼科感染性疾病中应用

聚合酶链反应对诊断多种疾病具有重要价值,在基础和临床医学各个领域得到了广泛的应用.此文就该技术的原理、类型,以及在眼科感染性疾病的应用做了综述.     

卷烟全烟气的Ames试验

目的： 研究卷烟全烟气暴露进行Ames试验的方法,为卷烟烟气的遗传毒性评价提供依据。方法：采用VITROCELL VC10吸烟机、烟气稀释装置和Ames暴露仓,通过调节洁净空气流速、稀释烟气流速、卷烟数等参数,对TA98和TA100进行全烟气暴露的Ames试验。结果：采用5 mL/min的稀释烟气和4支卷烟抽吸进行Ames试验时最佳,同时采用30%的S9混合液和无顶层培养基时,卷烟烟气的遗传毒性表现的更为明显。结论：可采用卷烟全烟气暴露的方法进行Ames试验研究,提示其他气体或气溶胶也可采用此方法进行。     

黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎大鼠免疫相关细胞因子的影响

目的:研究黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝型骨关节炎大鼠CD4~+/CD8`+及相关细胞因子的作用。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、塞来昔布组、黄芪桂枝五物汤7 d组和黄芪桂枝五物汤14 d组,每组10只。除正常组外,各组大鼠均予冷固法复合外界环境刺激的方法复制阳虚寒凝型骨关节炎模型,共6周。造模结束前,各给药组分别灌胃给药,黄芪桂枝五物汤7 d组或14 d组分别给药7 d或14 d(30 g·kg-1),塞来昔布组给药7 d(20.82 mg·kg-1),正常组及模型组予生理盐水灌胃7 d,至造模结束。造模结束后,免疫组化法检测各组大鼠膝关节软骨诱导型一氧化氮合酶(i NOS),Ⅱ型胶原及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达,取大鼠血液流式细胞法检测CD4~+/CD8~+,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血液中白细胞介素-4(IL-4),C-反应蛋白(CRP)及胰岛素生长因子(IGF),低氧诱导因子1α(HIF-1α)含量。结果:与正常组比较,模型组CD4~+及CD4~+/CD8~+降低(P0.05),各用药组与模型组比较,黄芪桂枝五物汤14 d组和塞来昔布组CD4+及CD4+/CD8+升高(P0.05)。与正常组比较,模型组IL-4,CRP,HIF-1α及i NOS表达升高(P0.05),Ⅱ型胶原及TGF-β表达降低(P0.05);与模型组比较,各用药组Ⅱ型胶原及TGF-β表达升高(P0.05),IL-4水平降低(P0.05),黄芪桂枝五物汤14 d组CRP,i NOS及HIF-1α表达降低(P0.05),塞来昔布组CRP及i NOS(P0.05);各用药组之间,与塞来昔布组比较,黄芪桂枝五物汤7 d组和14 d组Ⅱ型胶原表达降低(P0.05),黄芪桂枝五物汤7 d组i NOS表达升高(P0.05)。IGF水平在各组无显著性差别。结论:黄芪桂枝五物可以调节机体免疫低下状态,并通过调节细胞因子IL-4及下游细胞因子i NOS,HIF-1α,TGF-β1等细胞因子水平的变化,对骨关节炎软骨细胞起正向修复作用。     

2型糖尿病伴干眼症病人血清和泪液分泌型卷曲相关蛋白 5、脂肪酸结合蛋白 4水平与病情严重程度的相关性

目的 分析分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP-5)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)在2型糖尿病（T2DM）伴干眼症病人血清和泪液中的表达及其与病情严重程度的相关性。方法 选取2020年12月至2021年12月唐山市眼科医院收治的T2DM病人145例,其中单纯T2DM病人84例168眼（T2DM组）,伴干眼症病人61例122眼（T2DM伴干眼症组）,另选取同期该院体检健康者50例100眼作为对照组。T2DM伴干眼症病人又分为轻度组（29例）、中度组（17例）、重度组（15例）。利用酶联免疫吸附法测定所有受试者血清和泪液中SFRP-5、FABP4水平;相关性分析采用Pearson法或Spearman法;logistic回归分析影响T2DM病人干眼症发生的因素。结果 T2DM伴干眼症组、T2DM组血清和泪液SFRP-5水平均低于对照组（106.09±8.37、135.72±9.26比158.34±9.45,28.85±5.13、58.27±6.14比45.18±5.92）,T2DM伴干眼症组低于T2DM组（P<0.05）;T2DM伴干眼症组、T2DM组血清和泪液FABP4水平均高于对照组（...     

独行菜磷酸甲羟戊酸激酶LaPMK基因克隆、生物信息学分析及原核表达

目的从独行菜Lepidium apetalum中克隆萜类合成途径关键酶磷酸甲羟戊酸激酶(phosphomevalonate kinase,PMK)基因,进行序列分析和原核表达。方法根据独行菜转录组数据中La PMK基因序列设计特异性引物,克隆得到La PMK基因的开放阅读框(open reading frame,ORF),构建p ET32a-La PMK原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达La PMK融合蛋白。结果 La PMK基因ORF全长为1 518 bp(Genbank注册号KT004541),编码505个氨基酸。生物信息学分析结果显示La PMK蛋白没有跨膜区,不含信号肽,位于细胞质中,含有GHMP激酶家族特异的N末端和C末端的保守结构域。系统进化树结果显示La PMK蛋白与芜菁的PMK蛋白具有92%的序列相似性,亲缘关系较近。构建p ET32a-La PMK原核表达载体,在大肠杆菌中成功表达La PMK融合蛋白。结论克隆了La PMK基因,建立其稳定的原核表达体系,为La PMK蛋白纯化、抗体的制备,进一步研究La PMK基因在独行菜萜类合成途径中的作用奠定了基础。     

脑震宁对脑震荡后综合征模型大鼠海马线粒体功能的影响

目的 基于线粒体功能,探究脑震宁对脑震荡后综合征模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元损伤的作用机制。方法 SPF级Wistar大鼠,采用自由落体撞击法制备三重脑震荡后综合征模型（MCC）,将造模成功的大鼠按随机数字表法分成5组,模型组、吡拉西坦组、脑震宁低、中、高剂量组,另设正常组,每组10只。吡拉西坦组及脑震宁低、中、高剂量组分别以0.43、5.4、10.8、21.6 g·kg^-1的剂量灌胃给药,正常组和模型组大鼠分别灌服等体积蒸馏水,连续给药14 d进行相关指标检测。采用Morris水迷宫实验观察各组大鼠逃避潜伏期、原象限停留时间及穿越平台次数等学习记忆改变情况;苏木素-伊红（HE）染色、尼氏染色观察海马CA1区病理形态学改变;透射电子显微镜（TEM）观察线粒体超微结构;比色法检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性;荧光探针法测定腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）含量;酶联荧光免疫技术法检测线粒体膜电位（MMP）。结果 与正常组比较,模型组大鼠逃避潜伏期时间明显延长,目标象限停留时间及穿越平台次数明显减少,海马CA1区神经元和尼氏小体数量减少,神经元形态及线粒体结构遭受破坏,线粒体膜电位、ATP和呼吸链复合体Ⅰ含量明显减少（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,脑震宁各剂量组大鼠逃避潜伏期明显缩短,目标象限停留时间及穿越平台次数明显增加,海马CA1区神经元及尼氏小体数量显著增加,神经元形态及线粒体结构损伤有所改善,线粒体膜电位、ATP和呼吸链复合体Ⅰ含量明显增加（P<0.05,P<0.01）,脑震宁低剂量组大鼠穿越平台次数及线粒体呼吸链复合体Ⅰ差异无统计学意义。结论 脑震宁可以改善MCC大鼠学习记忆能力,其机制可能与改善线粒体结构与功能,减轻海马神经元损伤有关。     

地黄内生真菌GG22侵染下miR160家族成员及靶基因的鉴定分析北大核心CSCD

为明确地黄miR160家族成员在响应内生真菌尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum GG22侵染中的作用,该研究从高通量测序技术获得的小RNA数据库中筛选出地黄miR160家族成员,利用RNAfold分析其前体结构,DNAMAN和MEGA对前体序列和成熟序列进行保守性和进化性分析;对地黄miR160家族成员的靶基因进行预测功能注释以及互作关系分析;结合降解组数据对靶基因进行鉴定分析。结果发现miR160前体具有完整的茎环结构;序列比对显示在前体、成熟序列上都具有较高的保守性,成熟序列中5′端第3~16位碱基高度保守;系统进化树说明了地黄与拟南芥、水稻、丹参及芝麻之间的亲缘关系;预测出22个miR160的靶基因中生长素响应因子(ARF)居多;GO功能分析主要富集到生物学过程、细胞组分以及分子功能;降解组测序获得miR160的4个靶基因注释到ARF18和ARF22;表达特性分析表明,地黄经过内生真菌侵染后,通过改变miR160和靶基因的表达来调控植物生长;对差异表达的rgl-miR160a和rgl-miR160a-3p进行qRT-PCR验证,结果显示与测序结果一致。该研究结果进一步明确了地黄在响应GG22胁迫的分子机制,为地黄今后育种改良以及相关研究提供理论依据。     

气门芯橡皮筋结扎脐带与一次性脐带夹结扎脐带在新生儿脐带处理中的临床效果比较

脐带是由一根脐静脉和两根脐动脉以及周围的胶质样的胚胎结缔组织(华通氏胶)而构成[1].在正常情况下,婴儿出生后,脐带被切断,几小时后脐带的残端变成棕色,逐渐自然干瘪、发黑,至3~7 d从脐根部自然脱落,10~15 d以后自行愈合[2].新生儿脐带临床护理关键步骤主要分两部分,结扎与消毒.结扎位置、脐带保留长度、结扎材料的选择、消毒方式与消毒材料的选择对脐带脱落时间的影响也存在着差异.本研究对100例新生儿,分别进行气门芯橡皮筋结扎脐带与一次性脐带夹结扎脐带,并对2组新生儿的脐带结扎操作情况、治疗后脐带脱落时间和脐窝干燥时间、脐带预后情况进行比较.现将结果报告如下.     

金属镉促进甲状腺未分化癌FRO细胞增殖的作用及机制

目的 探讨金属镉对甲状腺未分化癌FRO细胞增殖的影响及其作用机制.方法 Western blot法检测FRO、MCF-7和MAD-MB-231细胞中G蛋白偶联受体1(G protein-coupled estrogen receptor,GPER1)表达水平.不同浓度(0、0.25、0.50、0.75、1.00 mmol/L)镉(CdC12)处理FRO、MCF-7及MAD-MB-231细胞48 h后,MTF法检测细胞增殖率.0.5 mmol/L镉分别处理FRO细胞0、5、10、15、30 min,Western blot法检测ERK1/2和Akt的磷酸化水平.GPER1抑制剂G15处理FRO细胞后,设计合成针对GPER1的小干扰RNA(GPER-siRNA)并转染FRO细胞,采用Western blot再次检测ERK1/2和Akt磷酸化水平.分别用GPER1抑制剂G15、ERK1/2抑制剂(PD98059)和PI3 K-Akt抑制剂(LY294002)、GPER-siRNA处理FRO细胞,MTT法检测细胞增殖率.结果 GPER1在MAD-MB-231细胞中表达水平明显低于MCF-7、FRO细胞.不同浓度CdC12处理FRO、MCF-7及MAD-MB-231细胞48 h后,低浓度CdCl2促进FRO、MCF-7细胞增殖,对MAD-MB-231细胞增殖无显著影响;高浓度CdC12对细胞均具有抑制作用.0.5 mmol/L CdC12处理FRO细胞不同时间后,ERK1/2与Akt的磷酸化水平在15 min达最大值.GPER1抑制剂G15处理FRO细胞,ERK1/2与Akt的磷酸化水平显著降低(P＜0.05).GPER1的小干扰RNA干扰后,ERK1/2与Akt的磷酸化水平明显降低(P＜0.05).G15、PD、LY和GPER-siRNA处理FRO细胞,细胞增殖率均显著下降.结论 金属镉通过GPER1-ERK/Akt信号通路促进FRO细胞的增殖.