不同产地忽地笑的叶绿体基因psb A-trn H序列分析

目的通过叶绿体基因psb A-trn H序列分析,探讨我国忽地笑种质资源的系统进化关系及分子鉴定方法。方法分别提取15省(市)52个忽地笑居群的DNA,经PCR扩增叶绿体基因psb A-trn H序列及测序,并用Mega5.0等软件对测序结果进行分析。结果 52条psb A-trn H序列长度为544～656 bp,GC含量为35.8%～37.0%,遗传距离为0.000 00～0.009 47;核苷酸变异(多态性)位点数共33个,其中简约信息位点9个,单一突变位点18个,插入/缺失片段6个;单倍型数量(H)10个,单倍型多态性水平(Hd)0.749,核苷酸多态性(π)0.002 63,收集的忽地笑资源具有较高的遗传多样性。最大简约法(maximum parsimony,MP)系统树中52个居群聚为4类,并且该聚类结果与其地理分布基本一致。结论不同产地忽地笑居群的遗传变异较大,psb A-trn H序列可作为忽地笑种源分子鉴定的依据;我国忽地笑种质资源在进化上具有明显的地域性特征。     

仙台病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立

目的: 建立一种快捷、灵敏的检测方法,即反转录-环介导等温扩增方法(RT-LAMP)用于仙台病毒(SeV)的检测。方法: 根据GenBank 公布的SeV序列,在其保守区域设计了多套LAMP引物,利用LAMP Real Time Turbidimeter LA-320C仪监测反应进程并筛选最佳引物、反应条件,建立对SeV核酸进行特异性扩增的RT-LAMP 检测方法,并可通过加入目测荧光检测试剂肉眼判断结果。对所建立的方法进行了敏感性、特异性评估并对92份样品进行了检测。结果: 该方法在63℃恒温下作用60min,SeV RNA获得了高效率的特异性扩增,与其余常见小鼠病毒无交叉反应;其敏感性高,最低检出量为2.1TCID50SeV,比RT-PCR方法高102倍。在反应结束后加入荧光检测试剂肉眼判断结果,与RealTime Turbidimeter LA-320 仪监测结果一致。通过对92份样品的RT-LAMP,RT-PCR和间接ELISA方法的检测比对,三者符合率为100%。 结论: 本研究建立的SV RT- LAMP 检测方法具有快速、特异、灵敏,操作简单的特点,具有良好的应用前景。     

刘复兴教授治疗银屑病经验举隅

刘复兴教授将银屑病分为5种证型进行辨证论治：血热风燥证、血虚风燥证、气滞血瘀证、湿热蕴毒证、热毒炽盛证。笔者近年来按照刘复兴教授的治疗经验治疗银屑病取得较好的疗效,不良反应较少。刘复兴教授治疗银屑病的方法确实安全有效,值得推广。     

云南省保山市成年居民血脂异常情况及其影响因素分析

目的了解保山市成年居民血脂异常患病现状及其相关影响因素,为血脂异常的预防控制提供科学依据。方法于2012年8-9月采用多阶段分层整群随机抽样方法,选取保山市18岁及以上的常住居民8 500人为调查对象,问卷调查人口学因素、自然地理特征、吸烟、饮酒、身体活动、静态行为和饮食习惯等,采用标准方法测量身高、体重、腰围和血压,并采集空腹静脉血进行实验室测定。采用SPSS 16.0进行χ~2检验、趋势χ~2检验和多因素非条件logistic回归分析。结果保山市成年居民血脂异常患病率为34.9%,男性(36.5%)高于女性(33.4%),差异有统计学意义(P0.01)。随着海拔降低及交通便利程度提升、年龄的增加和文化程度的提升,血脂异常患病率呈上升趋势,均有统计学意义(P0.01)。水果摄入充足者、畜肉类摄入充足和过量者的血脂异常患病率均高于摄入不足者,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。随着身体活动水平的提高,血脂异常患病率逐渐降低,有统计学意义(P0.01)。静态行为时间≥6 h、睡眠时间7 h、高血压、糖尿病和慢性病患病人群的患病率均较高,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。随着BMI水平升高,血脂异常患病率呈上升趋势,有统计学意义(P0.01)。多因素logistic回归分析结果显示,年龄为45~60岁(OR=1.238)、畜肉类摄入充足和过量(OR值分别为1.223、1.248)、超重和肥胖(OR值分别为2.842、3.448)、糖尿病(OR=2.094)和慢性病患病(OR=1.949)是血脂异常患病的危险因素,而居住在半山区和山区(OR值分别为0.828、0.835)、女性(OR=0.824)和中高等水平身体活动(OR值分别为0.797、0.703)是保护因素,均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论保山市成年居民血脂异常患病率处于较高水平,建议重点加强坝区居民、男性、45~60岁、畜肉摄入过量、超重和肥胖、糖尿病和慢性病患病等人群的血脂异常防控工作。     

云南保山市成年居民超重和肥胖流行特征及影响因素分析

目的了解云南省保山市成年居民超重肥胖流行特征及影响因素,为防控超重和肥胖提供参考依据。方法于2012年8-9月采用多阶段分层整群随机抽样法抽取保山市8 304名成年居民作为调查对象,问卷调查人口学因素、自然地理特征、饮酒和饮食习惯等相关因素,采用全球体力活动量表(GPAQ量表)调查居民体力活动,采用标准方法测量身高、体重、腰围和血压,采集空腹静脉血进行生化测定。采用SPSS 16.0软件进行χ~2检验、趋势χ~2检验和多因素非条件logistic回归。结果保山市成年居民超重肥胖率为25.9%;女性超重肥胖率(28.5%)高于男性(23.1%);35~60岁组超重肥胖率(29.6%)最高;高中及以上文化程度者超重肥胖率最高,且超重肥胖率随文化程度增加呈上升趋势;城市居民(35.2%)高于农村居民(24.0%);已婚者超重肥胖率(26.9%)较高;农民超重肥胖率较低(24.7%),差异均有统计学意义(P0.01)。有慢性病史、中心性肥胖、高血压遗传史、糖尿病遗传史、高血压、糖尿病和血脂异常等相应疾病特征者的超重肥胖率(分别为35.5%、72.3%、34.7%、36.8%、37.3%、48.1%和38.3%)均高于无相应病史者(分别为24.0%、10.2%、24.4%、25.6%、22.1%、25.2%和19.3%),差异均有统计学意义(P0.01);静态时间平均≥6 h/d者的超重肥胖率(31.3%)高于6 h/d者(25.6%),差异有统计学意义(P0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,糖尿病(OR=1.485),高血压(OR=1.676),生产运输人员(OR=1.871)、专业技术人员(OR=1.546),高血压遗传史(OR=1.328),中心性肥胖(OR=21.712)和血脂异常(OR=1.650)是超重肥胖的危险因素,而农村(OR=0.749)、高年龄(60~80岁组OR=0.393、≥80岁组OR=0.174)是保护因素,均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论保山市成年居民超重肥胖率较低,但不容忽视,建议对城市居民,35~59岁,生产运输人员、专业技术人员,有糖尿病、高血压、中心性肥胖、血脂异常以及糖尿病高血压遗传史的人群进行重点干预和防控。     

免疫抑制剂干扰联合瘤细胞接种构建肝癌移植瘤小鼠模型

目的：探讨构建肝癌移植瘤动物模型的最佳方法。方法选用BALB/c小鼠160只,随机分为地塞米松组、肝癌细胞注射组、地塞米松加肝癌细胞注射组及空白对照组,每组40只,雌、雄各半。地塞米松组在小鼠腹腔内注射地塞米松;肝癌细胞注射组于不同时间在肝脏直接接种H22肝癌细胞株3次;地塞米松加肝癌细胞注射组将上述2种方法联合使用;空白对照组注射生理盐水。1个月后,颈椎脱臼处死小鼠,取其肝组织,计算肝指数,苏木精-伊红染色（HE）后观察肝组织病理变化。结果地塞米松组、空白对照组未发现肝组织癌变,肝癌细胞注射组、地塞米松加肝癌细胞注射组癌变的百分比分别为71.4%（20/28）、91.2%（21/23）。结论肝癌细胞直接接种小鼠肝脏及联合地塞米松干扰均可建立肝癌移植瘤动物模型,但联合地塞米松干扰建模的成功率明显升高。     

血管回声跟踪技术在评估子痫前期孕妇颈动脉弹性的应用

目的探讨血管回声跟踪技术在评估子痫前期孕妇颈动脉弹性的应用。方法选择32例轻度子痫前期和32例重度子痫前期孕妇为观察对象,同期选择32例健康的晚期妊娠做阳性对照,进行双侧颈总动脉血管内膜中膜厚度（IMT）和压力应变弹性系数（Ep）、硬度指数（p）、顺应性（AC）及脉搏波传导速度（PWVl3）等弹性指标检测,评价不同组别孕妇颈总动脉弹性指标的差异,并与IMT相关分析。结果轻度子痫前期组孕妇左右两侧IMT分别为（O．47±0．08）min和（0．46±0．09）mm,重度子痫前期组孕妇分别为（0．48±0．07）和（0．47±0．08）mm,各组间比较差异无统计学意义（P=0．764和P=0．803）。颈总动脉弹性参数轻度子痫组和重度子痫组患者左右两侧AC均显著低于对照组（P〈0．001）。与轻度子痫组比较,重度子痫组孕妇左右两侧AC显著降低（P=0．002和P=0．001）。同样的方法比较三组孕妇颈总动脉其他弹性参数,发现轻度子痫组和重度子痫组孕妇左右两侧β、Eβ和PWVβ水平均高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．001）。进一步做相关分析显示,IMT与AC呈负相关（r=-0．473）,与IMT与β、EP、PWVβ呈正相关,相关系数分别为0．679、0．612、0．642。结论血管回声跟踪技术可以早期发现子痫前期孕妇颈总血管弹性变化。     

八桂止痛膏对小鼠镇痛 抗炎作用效果实验研究

目的探讨八桂止痛膏(BAO)对小鼠镇痛、抗炎作用效果。方法选择昆明种雌性小鼠作为实验对象,根据干预方式不同将其分为空白对照组(不予药物干预)、扶他林组(予扶他林软膏干预)和BAO组(予BAO干预)。通过热板实验、醋酸扭体实验和二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验评估干预处理对小鼠的镇痛、抗炎效果。结果在给药后15~45 min,扶他林组痛阈值呈逐渐上升趋势,而BAO组痛阈值呈先上升后下降趋势。两组给药后各时间点的痛阈值均高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。在给药后45 min时间点,BAO组痛阈值低于扶他林组,差异有统计学意义(P<0.05)。扶他林组和BAO组扭体次数低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。扶他林组和BAO组扭体次数和扭体次数抑制率比较差异无统计学意义(P>0.05)。扶他林组耳廓肿胀质量小于BAO组和空白对照组,BAO组耳廓肿胀质量亦小于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论BAO具有较好的镇痛、抗炎作用,其效果与扶他林软膏相当。     

复方龙胆合剂对小鼠激光损伤后皮肤屏障功能修复的研究

目的 研究复方龙胆合剂对于小鼠皮肤激光损伤后屏障修复的作用。方法 选择40只BALB/c小鼠,将小鼠背部脱毛后随机选取10只为正常组,其他30只使用Q开关1064激光机,以5 Hz频率、3 mm光斑、6 J能量照射脱毛区,构建激光损伤皮肤模型。将激光损伤模型小鼠随机分为模型组、对照组、实验组。模型组小鼠不做处理,对照组小鼠单一使用基质涂抹,实验组小鼠在基质涂抹的基础上每日灌胃给药复方龙胆合剂。分别在干预后6,24,48 h,7,14 d测试小鼠皮肤含水量、经皮失水量、小鼠皮肤中增殖细胞核抗原染色,ELISA法检测皮肤组织中髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88,MyD88）、白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）的蛋白表达,RT-QPCR检测皮肤中表皮抗菌肽S100a8、S100a9、MyD88以及IL-6的mRNA水平。结果 模型组和对照组在皮肤含水量和经皮失水量的比较中无显著统计学意义,而实验组皮肤含水量显著高于模型组、经皮失水量显著低于模型组（P<0.05）。实验组增殖细胞核抗原表达较强。模型组和对照组皮肤中MyD88、IL-6的蛋白水平以及S100a8、S100a9、MyD88以及IL-6的mRNA水平无统计学意义,但是显著高于正常组（P<0.05）,而实验组皮肤中MyD88、IL-6的蛋白水平,S100a8、S100a9、MyD88以及IL-6的mRNA水平显著低于模型组（P<0.05）。结论 复方龙胆合剂可以促进小鼠皮肤激光损伤后屏障功能的恢复,其作用和炎症抑制相关。