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丙型肝炎病毒优势表位嵌合抗原在大肠杆菌中的表达及其在血清学检测中的应用 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 获得具有多表位的丙型肝炎病毒(HCV)嵌合抗原,以提高HCV酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断试剂的质量。方法 采用分子克隆将己获得的HCV各区段优势抗原表位基因,拼接为HCV嵌合抗原基因。将该基因克隆到pQE-30载体表达。表达抗原经纯化后,包被酶联板,对16份HCV阴性和16份阳性血清标本进行了检测。结果 pQE-HCV在大肠杆菌中有效表达了相对分子质量对53000的HCV嵌合抗原。经Ni-NTA金属螯合层析纯化后,获得了高纯度的目的蛋白。ELISA结果显示,HCV嵌合抗原能特异地与HCV感染血清反应,具有良好的抗原活性。结论 HCV多表位嵌合抗原包含了HCV具有代表性的主要表位,是HCV免疫学检测的良好试剂。 相似文献
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HCV IRES介导荧光素酶小鼠体内表达模型的建立 总被引:3,自引:0,他引:3
HCV内部核糖体起始位点(internal ribosomal entry site,IRES)含有40S核糖体的有效结合部位和与内部翻译起始因子eIF-3的结合部位,以内部起始方式调控介导HCV蛋白的翻译启动,在翻译调控中具有重要作用,是反义寡核苷酸、核酶和siRNA等药物治疗的重要靶位。王小红等曾构建了CMV 相似文献
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酵母表面展示技术及应用 总被引:4,自引:0,他引:4
酵母表面展示是近年发展的一种新的蛋白表面展示技术,能够展示需糖基化作用,二硫键异构化等翻译后修饰才具功能活性的复杂真核蛋白,本文介绍了该技术的基本原理,研究进程,筛选方法,应用及其发展前景。 相似文献
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O型血液一直被广泛认为,可以在紧急条件下不经过交叉配血就直接给受血者输用而很少引起急性溶血性输血反应。但是O型血浆中含有抗-A和抗-B,抗体效价的高低因人而异。当受血者接受了含有高效价抗体的血液后就会引起严重的溶血性输血反应。根据国内外文献报道,受血者可以接受的最 相似文献
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目的 探讨依达拉奉右莰醇联合替罗非班治疗大动脉粥样硬化型进展性缺血性卒中(PIS)的效果。方法 选取2021年1月至2022年3月于潍坊医学院附属医院神经内二科住院治疗的大动脉粥样硬化型PIS患者68例,采用随机数字表法将其分为观察组和对照组,每组34例。对照组在常规治疗基础上加用替罗非班,观察组在对照组基础上加用依达拉奉右莰醇。比较两组临床疗效及不良反应,治疗前、治疗14 d后美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、改良Rankin量表(mRS)评分、Barthel指数(BI)、CRP、Hcy、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、PLT、HDL-C、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)和C反应蛋白/高密度脂蛋白胆固醇比值(CHR)。结果 观察组临床疗效优于对照组(P<0.05)。两组治疗过程中无肝肾功能损伤、消化道反应、头晕头痛、出血及皮疹等不良反应发生。治疗14 d后两组NIHSS评分、mRS评分分别低于本组治疗前,BI分别高于本组治疗前,且观察组NIHSS评分、mRS评分低于对照组,BI高于对照组(P<0.05)。治疗14 d后两组CRP... 相似文献
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目的 观察偏头痛患者右向左分流(RLS)的阳性率及分流量大小,分析偏头痛与RLS的关系。方法 纳入129例确诊为偏头痛的患者为病例组,80例健康志愿者为对照组,病例组患者需完成偏头痛伤残评估问卷,应用经颅多普勒(TCD)发泡实验诊断RLS,并对阳性率、分流量进行统计分析。结果 先兆偏头痛组、无先兆偏头痛、对照组RLS阳性率分别为:59.3%,40.0%,23.8%,偏头痛组RLS阳性率显著高于正常对照组。RLS分流量比较中,先兆偏头痛组、无先兆偏头痛、对照组大分流率分别为30.5%,12.9%,3.8%,病例组的大分流率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),3组间中小量分流率无显著差异。Spearman相关分析示偏头痛致残程度与RLS分流量之间无显著相关性(P=0.072)。结论 偏头痛与RLS具有相关性,特别是大量的右向左分流;偏头痛伤残程度与分流量无显著相关。 相似文献
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目的 :从能感染HCV的人肝癌细胞HepG2中克隆出人LDLR基因 ,构建其真核表达质粒 ,并在小鼠肝癌细胞Hepa1 6中进行表达。方法 :从HepG2中提取总RNA ,采取逆转录PCR(RT PCR)方法得到人LDLR的cDNA。将获得的人LDLR基因克隆到真核表达载体pcDNA3中 ,进行酶切和序列鉴定。将重组质粒pcDNA3 hLDLR和空载体转入Hepa1 6 ,G4 18筛选 ,并用RT PCR和FACS检测人LDLR基因转录和蛋白的表达。结果 :人LDLR的cDNA已插入载体pcDNA3构建成真核表达质粒pcDNA3 hLDLR ,双酶切和测序表明 ,克隆的人LDLR与已登录GenBank的序列存在核苷酸多态性 ,但编码的氨基酸序列完全一致 ,该序列的GenBank登录号为gi|2 16 2 96 4 7|gb|AY114 15 5 .1,并且真核表达质粒的构建正确。用脂质体介导的方法转入Hepa1 6后 ,用RT PCR和FACS检测表明 ,细胞可表达人LDLR。结论 :成功地构建了真核表达质粒pcDNA3 hLDLR ,为进一步研究HCV和人LDLR的相互作用 ,以及建立可能的HCV细胞感染模型奠定了基础。 相似文献