实验室联合检测在新生儿败血症早期诊断中的应用

目的探讨降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)和血小板(PLT)联合检测在新生儿败血症诊断中的应用。方法选取同期住院符合条件的败血症患儿37例、局部感染患儿36例、非感染患儿30例,用酶联荧光分析法定量测定PCT,用免疫比浊法检测CRP,用LH750血细胞分析仪检测白细胞计数和血小板。结果 PCT和CRP水平在败血症组治疗前均显著高于局部感染组和非感染组(P<0.01),且二者间呈显著正相关(P<0.05),经有效抗生素治疗后显著下降(P<0.01);而败血症组WBC计数和PLT水平与局部感染组和非感染组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。PCT的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数、阳性似然比分别为89.2%、90.0%、91.7%、87.1%、0.79和8.92,为4项指标中最高。联合检测PCT、CRP、WBC、PLT,则其诊断新生儿败血症的特异度和阳性预测值均达100%。4项指标受试者工作曲线(ROC曲线)下面积分别为0.970、0.733、0.580、0.621。结论联合检测PCT、CRP、WBC计数和PLT能提高新生儿败血症早期诊断的特异度,诊断价值比单项检测更高。     

携带产新型碳青霉烯酶基因blaIMP-38肺炎克雷伯菌致病性分析

摘要：目的: 了解携带产新型碳青霉烯酶基因bla_IMP-38肺炎克雷伯菌（Kp）血清分型与毒力因子,探讨其致病性。 方法: 提取中南大学湘雅医院新生儿病房分离的9株携带bla_IMP-38的Kp基因组DNA,用PCR方法检测7种荚膜血清型（K1、K2、K3、K5、K20、K54、K57）和25种毒力基因（黏附性、铁摄入能力、荚膜多糖、脂多糖、尿素酶、抗血清活性、侵袭素、毒素及其他相关基因）。 结果: 9株携带bla_IMP-38的Kp菌株均携带9种毒力基因,分别为fimH1、mrkD、ycfm、kpn、entB、irp-2、uge、wabG和ureA,未发现其他毒力基因和上述荚膜血清型基因。 结论: 分离的携带bla_IMP-38的Kp菌株黏附性强,易在呼吸道和医疗器械定植,同时含有肠毒素和耶尔森毒素,可能是该克隆株致病性强的重要原因。     

中药灌肠治疗新生儿黄疸82例

自2005年1月至今,我们应用中药灌肠治疗新生儿黄疸患儿82例,同时加强患儿护理,收效满意,现将治疗与护理体会报道如下。     

荧光PCR法检测手足口病病原体及其临床意义

目的 探讨荧光定量PCR法对手足口病病原学诊断价值,以便为临床提供简便易行的实验室方法.方法 采集75份具有典型临床表现手足口病患者的便标本,提取病毒RNA,采用荧光定量PCR法进行肠道病毒筛选,及肠道病毒71型(EV71)与柯萨奇病毒A组16型(CA16)的检测,并结合临床诊断进行比较分析.结果 手足口病患者的75份便标本中,共检测出肠道病毒核酸阳性73份,检出率为97.3％,CA16核酸阳性11份,EV71核酸阳性49份,肠道病毒核酸阳性且CA16和EV71核酸均阴性18份;EV71与CA16感染病例的临床表现相似,主要为发热、口腔溃疡和皮疹.结论 发病早期采集粪便用荧光PCR法进行手足口病病原体检测有助于及时作出手足口病的病原学诊断,且是一种简单易行的方法.     

降钙素原在急性胰腺炎临床应用中的研究

目的 探讨血清降钙素原(PCT)对急性胰腺炎早期诊断、治疗效果和严重度分级的临床应用价值,快速、准确地为预后提供判断依据.方法 收集2011年3月-2012年6月71例初诊为急性胰腺炎住院患者作为研究对象,根据临床诊断及《重症急性胰腺炎诊治指南》,将研究对象分为轻症急性胰腺炎(A组)、重症急性胰腺炎Ⅰ级(B组)和重症急性胰腺炎Ⅱ级(C组),21名健康体检人员作为正常对照组(D组),采集患者入院24 h内和出院前血清及21名正常对照组血清,应用法国生物梅里埃公司VIDAS全自动酶联荧光分析仪检测血清PCT;应用IMANNG800双光路浊度免疫分析仪检测血清C反应蛋白(CRP),绘制受试者工作特征曲线(ROC),评价PCT诊断急性胰腺炎严重程度的价值.结果 血清PCT随着胰腺炎的严重程度升高而加重,轻症急性胰腺炎与正常对照组、重症急性胰腺炎Ⅰ级与正常对照组、重症急性胰腺炎Ⅱ级与正常对照组、轻症急性胰腺炎与重症急性胰腺炎Ⅰ级、重症急性胰腺炎Ⅰ级与重症急性胰腺炎Ⅱ级严重程度比较,差异均有统计学意义;出院前各病例组血清PCT水平回落,与入住前差异均有统计学意义(P＜0.01);以临床诊断为金标准,PCT分别以0.48、0.96、3.74 mg/L为界诊断轻症急性胰腺炎、重症急性胰腺炎Ⅰ级和重症急性胰腺炎Ⅱ级的性能最高,曲线下面积分别为0.76、0.87和0.97,特异度分别为72.44％、74.20％和84.60％,灵敏度分别为75.00％、91.20％和95.50％.结论 血清PCT检测可作为急性胰腺炎早期诊断指标,其检测结果可反映治疗效果,且对急性胰腺炎严重程度的诊断具有很好的敏感性和特异性.     

非发酵菌碳青霉烯酶检测及产酶菌株可移动遗传元件研究

目的 调查临床分离碳青霉烯类不敏感非发酵菌产碳青霉烯酶的情况,探讨产酶菌株可移动遗传元件分布,以了解产酶菌株分子流行病学特点及耐药机制.方法 对某院2011年10月-2012年3月临床各类标本中非重复碳青霉烯类不敏感非发酵菌进行细菌培养、鉴定及药敏试验;采用两种改良Hodge试验进行碳青霉烯酶表型确证;聚合酶链式反应(PCR)检测主要碳青霉烯酶基因;对碳青霉烯酶基因扩增阳性菌株进行可移动遗传元件如整合子、转座子记、插入序列及接合性质粒等遗传标记的PCR扩增.结果 分离的82株碳青霉烯类不敏感非发酵菌,包括27株铜绿假单胞菌和55株鲍氏不动杆菌,对多数抗菌药物耐药严重,耐药率大多＞60.0％,而对阿米卡星和头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低;采用大肠埃希菌ATCC 25922作为指示菌株的改良Hodge试验阳性菌株37株,不确定结果7株;采用肺炎克雷伯菌ATCC700603作为指示菌株的改良Hodge试验阳性菌株14株,不确定结果2株;1株铜绿假单胞菌携带VIM-2型基因,11株鲍氏不动杆菌携带blaOXA-23基因,这12株菌每株至少检出3种可移动遗传元件,最多检出5种可移动遗传元件,其中大部分受试菌携带4种可移动遗传元件,其他碳青霉烯酶基因未检出.结论 某院碳青霉烯类不敏感非发酵菌以鲍氏不动杆菌为主,大部分为多药耐药菌株,仅对头孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星较敏感,主要耐药机制为携带碳青霉烯酶基因blaOXA23和blaVIM2,且这些菌株易携带多种可移动遗传元件.     

铜绿假单胞菌耐药性分析及金属酶基因检测

目的分析中南大学湘雅医院临床分离铜绿假单胞菌抗菌药物敏感性及金属酶流行情况,以期指导临床用药。方法收集2010年11月—2011年4月临床分离非重复铜绿假单胞菌200株,所有菌株均经VITEK-2全自动微生物鉴定与药敏试验分析系统进行鉴定和药敏试验。采用双纸片协同试验作为金属酶表型初筛试验,初筛阳性菌株采用聚合酶链反应(PCR)检测IMP、VIM、SPM和NDM4种金属酶基因型以及Ⅰ类整合酶基因。结果 200株铜绿假单胞菌分离自ICU患者55株,占27.5%。药敏试验结果显示,该菌对美罗培南耐药率最低(8.5%),对庆大霉素耐药率最高(38.5%)。6株铜绿假单胞菌金属酶初筛试验阳性,检出率3.0%,经基因检测发现IMP型阳性菌株2株(2株均产IMP-1菌株),未检出VIM、SPM及NDM型金属酶,且这6株铜绿假单胞菌Ⅰ类整合酶基因均为阳性。结论该院产金属β内酰胺酶的铜绿假单胞菌检出率较低,主要金属酶基因型为IMP-1。铜绿假单胞菌耐药仍较严重,但对碳青霉烯类抗生素耐药率低。     

鲍曼不动杆菌耐药性分析及AmpCβ-内酰胺酶基因研究

目的：了解临床标本分离的鲍曼不动杆菌（Acinetobacterbaumannii,Ab）对常见抗生素的耐药现状并研究Ab中质粒及染色体介导的AmpCp．内酰胺酶基因的分布特点。方法：应用VITEK．2微生物分析系统对中南大学湘雅医院2010年11月至2011年4月临床标本进行分离培养、鉴定和药物敏感性分析,采用PCR扩增方法对173株非重复AbblaMOX,blaCMY-2,blaDHA,blaACC,blaACT-1,blaFOX．blaADC六种耐药基因进行分析。结果：173株临床分离菌株对第一、三代头孢菌素,青霉素,磺胺类复合制剂及呋喃妥因的耐药率均超过70％;对喹诺酮类药物中左旋氧氟沙星、环丙沙星耐药率分别为23．7％和89．0％;对氨基糖苷类抗生素耐药率为58．4％～85．5％;对氨曲南的耐药率为51．4％;对碳青霉烯类、第四代头孢菌素及β-内酰胺β-内酰胺酶抑制剂复合物耐药率为8．7％～89．6％（其中耐药率最低的为头孢哌酮,舒巴坦）。173株Ab中携带blaADC基因的为154株f89．0％1,且产blaADC基因的菌株对头孢曲松、庆大霉素、妥布霉素、复方新诺明、环丙沙星、亚胺培南的耐药率高于不产blaADC基因的菌株,两组间差异具有统计学意义（P〈0．05）。未扩增出blaMOX,blaCMY-2,blaDHA,blaACC,blaACT．1,blaFOX五种耐药基因。结论：头孢哌酮／舒巴坦可作为治疗A6感染的推荐药物。产ADC型AmpCβ-内酰胺酶是A6菌株对头孢曲松、庆大霉素、妥布霉素、复方新诺明、环丙沙星、亚胺培南耐药的重要原因之一。     

碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌IMP型金属β-内酰胺酶研究

目的:探讨肺炎克雷伯菌产金属酶的临床分离情况并对产金属酶菌株进行耐药性分析,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法:收集2009年1月—2009年10月天津医科大学总医院142株临床分离肺炎克雷伯菌,通过改良Hodge试验、改良三维试验检测其碳青霉烯酶,乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验检测金属酶,PCR法扩增金属酶基因,用纸片法和VITEK2-Compact全自动微生物分析仪进行药物敏感性试验。结果:142株肺炎克雷伯菌中,通过改良Hodge试验、改良三维试验检测出2株产碳青霉烯酶菌株,这2株菌通过EDTA协同试验检测为阳性,提示这2株菌产金属酶经PCR证实为产IMP型金属酶,MIC方法显示2株产金属酶的菌株对氨曲南敏感,而对青霉素类、头孢菌素类耐药,κ-B法检测显示碳青霉烯类抗菌药物耐药。结论:天津地区已出现产金属酶肺炎克雷伯菌,该酶是引起肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素的主要原因。