UPLC-MS/MS同时测定血浆样品中他莫昔芬及代谢产物的浓度和应用

目的:建立UPLC-MS/MS法测定人体血浆样品中他莫昔芬及代谢产物的浓度和应用.方法:采用Waters AcQuity型超高效液相色谱联用API4000型三重四级杆质谱仪,样品处理采用固相萃取的方法,采用Thermo hypurity C18( 150 mm×2.1 mm,5 μm)色谱分析柱,流动相为10 mmol/L甲酸胺-乙腈(40:60,V/V),流速为0.3 mL/min,进样体积为10 μL,柱温为30℃,样品室温度为5℃,质谱应用ESI源、正离子模式、多反应监测(MRM)方式检测他莫昔芬及各代谢产物的浓度.结果:他莫昔芬、NDTam和TamNox线性范围为1～400 ng/mL,4OH Tam线性范围为0.4～160 ng/mL,4-OHND-Tam线性范围为2～800 ng/mL,可以满足样本浓度定量检测的需要,方法稳定、特异性高,并成功地应用到用药后他莫昔芬及各代谢产物血浆浓度的检测.结论:该方法简便、准确、重复性好,可以准确地定量人体血浆他莫昔芬和代谢产物的浓度,除了为临床血药浓度监测及他莫昔芬药效学研究提供服务外,也可为遗传药理学科研提供技术方法.     

UPLC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中S-奥拉西坦浓度

目的:建立灵敏、准确的Beagle犬血浆中S-奥拉西坦浓度的UPLC-MS/MS检测方法,并用于该药在Beagle犬体内的药动学研究.方法:血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以甲醇-水溶液(85∶15,V/V,内加10 mmoL乙酸铵和0.1％甲酸)为流动相,用HP Amide LC-MS/MS Column(100 mm×3 mm ID,5μm)分离,采用电喷雾离子源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测,定量分析的离子反应分别为m/z 159.0/114.1(S-奥拉西坦)和m/z 143.0/126.1(内标,吡拉西坦).结果:S-奥拉西坦线性范围为0.05～50 μg/mL,定量下限为0.05μg/mL,日内、日间精密度(RSD)均小于15％.S-奥拉西坦大鼠血浆样品在储存、预处理、分析期间均显示良好的稳定性.应用此法研究了6只Beagle犬单剂量口服S-奥拉西坦50 mg/kg后的药动学特点.结论:该方法快速、专属、灵敏、适用性强,可应用于5-奥拉西坦的临床前药动学研究.     

豆腐果苷对人肝微粒体CYP450酶体外抑制作用研究

目的:通过评价豆腐果苷在体外对人肝微粒体CYP450酶的7种亚型酶活性的影响,预测服用豆腐果苷可能出现的食物-药物及药物-药物代谢的影响。方法:将豆腐果苷与CYP450酶7种亚型的特异性探针底物咖啡因(CYP1A2)、右美沙芬(CYP2D6)、甲苯磺丁脲(CYP2C9)、S-美芬妥因(CYP2C19)、氯唑沙宗(CYP2E1)、香豆素(CYP2A6)及咪达唑仑(CYP3A4)与人肝微粒体进行孵育反应,采用HPLC和LC-MS/MS法测定对应的7种代谢产物(1,7-二甲基黄嘌呤、去甲右美沙芬、4-羟基甲苯磺丁脲、4-羟基美芬妥因、6-羟基氯唑沙宗、7-羟基香豆素和1-羟基咪达唑仑)的浓度,与对照组比较,确定豆腐果苷对以上7种亚酶活性的影响。结果:豆腐果苷在1～100μmol.L-1时对7种酶的抑制作用均无明显统计学意义(P>0.05)。结论:豆腐果苷可能不会引起有临床意义的CYP450酶抑制现象的发生。     

孕烷X受体生物特性及其在药物代谢中的作用研究进展

核受体孕烷X受体是一类生物体内广泛分布的激素和环境感受器,不仅可参与能量、胆固醇、胆汁酸等物质的代谢以及调节炎症反应,还可以调控工相、Ⅱ相药物代谢酶和相关药物转运蛋白的表达而调节药物代谢,其作用对维持机体诸如细胞增殖分化、生长发育、新陈代谢、稳态维持等多种生理功能有重要意义。本文就孕烷x受体结构功能、生物学效应以及其对药物代谢酶和药物转运调节的作用等作一综述。     

液相-串联质谱法研究氧化苦参碱在食蟹猴体内的代谢

【摘要】 目的：研究氧化苦参碱在食蟹猴体内的药物动力学及代谢转化率。方法：建立食蟹猴血浆中氧化苦参碱及苦参碱的液相-串联质谱（LC/MS/MS）测定法;测定ig和iv氧化苦参碱后氧化苦参碱和代谢产物苦参碱的血药浓度,以及ig和iv苦参碱后苦参碱的血药浓度;计算氧化苦参碱的药动学参数与代谢转化率。结果：氧化苦参碱的代谢转化率为（30.7±6.6）%。结论：氧化苦参碱在食蟹猴体内代谢转化率高。     

药代动力学和药效动力学中数学建模与模拟的基本原理(2)

数学建模与模拟（modeling and simulation，M＆S）是药代动力学（药动学）与药效动力学（药效学）中重要的定量研究方法，在研究药物的处置和作用的机理、治疗药物监测及新药开发中发挥越来越重要的作用。但目前国内该领域的研究尚不多，有待大力发展。另外，M＆S涉及的数学知识较多，造成研究者阅读文献和实际应用的困难。本系列文章简要介绍M＆S的一些基本概念及重要原理，供读者参考。本部分着重讨论模型开发过程及拟合优度标准的有关问题。     

雷公藤内酯醇在Beagle犬体内的药代动力学

雷公藤内酯醇(triptolide，TP)是雷公藤的主要有效成分之一。研究不同剂量TP在Beagle犬灌胃给药时的绝对生物利用度和药代动力学， 可望为其临床研究提供参考。以泼尼松龙作内标， 用乙酸乙酯液液萃取， 建立LC-APCI/MS选择性离子监测方法测定血浆TP浓度。Beagle犬分别静脉注射TP 0.05 mg·kg^-1、 灌胃TP 0.05，0.08和0.1 mg·kg^-1进行药代动力学和绝对生物利用度研究。结果表明， TP在1～200 ng·mL^-1呈良好线性关系(r=0.999 7)，批内和批间精密度RSD均小于10%，准确度在95.0%～105.0%，提取回收率大于75%。静注0.05 mg·kg^-1 TP后，T_1/2β为(2.5±0.8) h。3个剂量灌胃组，T_max，T_1/2α和T_1/2β，经检验无统计学差异。AUC和C_max与剂量之间线性相关。灌胃0.05 mg·kg^-1后，TP在Beagle犬体内绝对生物利用度为(75±17)%。可见，LC-APCI/MS法灵敏、可靠、专属性强，可用来测定Beagle犬血浆TP的浓度；TP在Beagle犬体内消除较快，灌胃给药生物利用度较高。     

HPLC-ESI-MS法测定Beagle犬血浆中豆腐果苷浓度

目的：建立灵敏、准确的测定Beagle犬血浆中豆腐果苷浓度的液相色谱-电喷雾离子化-质谱联用（HPLC- ESI-MS）的分析方法，并将其应用于Beagle犬的药动学研究。方法：应用正丁醇作为提取剂的液-液萃取方法。色谱柱 为Luna C18 (150 mm×2.00 mm，3.5 μm)，流动相为乙腈和500 μmol?L-1的氯化铵，梯度洗脱程序。四极杆质谱，负 离子选择性离子检测方式，检测离子豆腐果苷和内标岩白菜素[M+Cl]-m/z分别为319.00 和363.05。结果：豆腐果苷的 最低定量限为5 ng?mL-1，本方法在5~2 500 ng?mL-1浓度范围内线性关系良好。被分析物的批内及批间变异在10.0 %以 内。豆腐果苷血浆样品在存储、制备和分析过程中稳定性良好。结论：本方法可以准确用来进行豆腐果苷临床前药动学 的定性、定量研究，并已经成功地应用于Beagle犬的药动学研究。