铜绿假单胞菌外膜蛋白OprF基因的克隆与原核表达

[目的]克隆铜绿假单胞菌OprF基因,并进行原核表达,以期进一步开展铜绿假单胞菌基因工程疫苗的研究. [方法]利用PCR技术从铜绿假单胞菌基因组中扩增出OprF基因.采用T-A克隆构建pMD18-T-OprF重组质粒,测序正确后经BamH Ⅰ、Hind Ⅲ双酶切获得OprF片段,插入到表达载体pET32a,获得pET32a-OprF重组表达质粒并在表达宿主菌E.Coli BL21中诱导表达,利用Ni-NTA柱对目的蛋白进行纯化,通过SDS-PAGE电泳和蛋白质印迹进行鉴定. [结果]克隆OprF基因(459 bp)并经DNA测序证实,表达重组蛋白OprF并获得纯化蛋白,经SDS-PAGE电泳和蛋白质印迹鉴定正确.[结论]成功克隆了OprF基因并获得原核表达物,为铜绿假单胞菌的致病性研究和开展基因工程疫苗的研制奠定了基础.     

Runx3及其免疫调节作用的研究进展

Runx3作为Runx转录因子家族成员通过对细胞发育、信号转导等生物学作用的调控,参与淋巴细胞、树突状细胞等免疫细胞的分化、增殖和成熟,影响着Th1／Th2的平衡、树突状细胞的迁移和B细胞功能,且对肿瘤细胞具有明显的抑制作用,其作为重要的免疫调节和抑瘤基因正引起人们的广泛关注。     

脐带间质干细胞与壳聚糖支架的生物相容性研究

探讨脐带间质干细胞与壳聚糖支架的生物相容性。分离培养脐带间质干细胞,将其种植到壳聚糖支架上,观察细胞在支架上的形态特征,并检测细胞黏附性和细胞增殖活性。脐带间质干细胞能够在壳聚糖支架上黏附生长,并保持良好的细胞形态,与对照组相比,其黏附率和细胞增殖活性均无显著性差异。脐带间质干细胞与壳聚糖支架之间具有良好的生物相容性,可应用于复合材料的制备。     

IL-25与免疫相关疾病关系的研究进展

IL-25又称为IL-17E,是细胞因子IL-17家族的成员之一,主要由活化的Th细胞和肥大细胞所分泌。与其他家族成员不同,IL-25能够诱导Th2型细胞因子如IL-4、IL-5和IL-13的产生,介导Th2类免疫应答,还能够影响Th17细胞的分化并调节自身免疫性疾病的发生发展。总之,IL-25在多种免疫性疾病的发生发展中都发挥着重要的作用。     

Th9细胞:一种新型效应性CD4+T细胞亚群

长期以来, 人们认为IL-9是Th2类细胞因子, 作用于多种炎症细胞和组织细胞, 在对抗寄生虫感染和诱导变应性疾病, 尤其是过敏性哮喘中发挥着重要的作用.近来研究发现, 机体内存可能在着一群新型的不同于已知的Th1、 Th2及Th17的CD4+ Th细胞亚群, 具有分泌IL-9和IL-10的能力, 有学者称之为"Th9"细胞.由于IL-9主要由Th9细胞分泌, 这就需要对原本归于Th2类的生理或病理改变机制进行重新探讨, 以阐明Th9细胞在细胞免疫中的作用.现就Th9细胞的生物学功能及与相关疾病的关系进行简要综述.     

小鼠树突状细胞过继转移抗原作用的实验研究

用绵羊红细胞免疫小鼠，取其脾脏分离树突状细胞产针这些带有抗原信息的ＤＣＳ经尾静脉注射给小鼠，以观察ＤＣＳ过继转移抗原的作用。结果表明，各试验组小鼠抗体形成细胞及血清中ＳＲＢＣ效价明显高于对照组，Ｐ〈０．０１，再次免疫ＤＣ组抗ＳＲＢＣ效价高于初次免疫ＤＣ组Ｐ〈０．０５，ＤＣＳ具有过断转移抗原的作用。     

白介素17细胞因子家族与支气管哮喘

白介素17（IL-17）家族的提出，揭示了又一独特的受、配体信号系统。目前，IL-17A（IL-17）和IL-17F作为该家族的重要成员，其与哮喘的发生发展已经引起人们的关注，然而基于IL-17家族分子特性的支气管哮喘发生机制研究尚缺乏深度和系统性。本文就IL-17与IL-17F细胞因子的分子结构、受体、信号转导途径、功能及其与支气管哮喘关系的研究进展作一简要综述。     

改革医学基础实验教学培养医学生创新能力

江苏大学医学院利用综合大学优势,结合医学教育的特点,对五年制临床医学专业的医学基础实验教学进行了全面改革,将形态学、机能学、预防医学以及统计学课程有机结合起来,形成了较为完整的医学基础实验教学体系,并在学生进入临床课学习之前成功地开设了设计性实验.这一举措完善了医学基础实验教学体系,使学生顺利过渡到临床课的学习,同时改变了临床医学专业缺乏科研训练和论文写作的历史.但是,在设计实验体系的评价、定位以及带教师资等方面仍需进一步探索和完善.     

z66抗体诱导伤寒沙门菌鞭毛抗原表达转变后染色体结构分析

目的 分析z66抗体诱导z66抗原阳性伤寒沙门菌鞭毛抗原表达改变后染色体结构。方法 利用脉冲凝胶电泳（PFGE）结合XbaI消化，对伤寒沙门菌标准菌株Ty2，z66抗原阳性株GIFU10007及z66抗体诱变j抗原阳性株GIFU10007-j的染色体DNA进行比较分析。结果 GIFU10007-j染色体DNA有两个XbaI片段与GIFU10007不同，总体染色体减少约250kb；与Ty2相比，GIFU10007染色体DNA有13个相同及7个不同的XbaI片段，总体染色体大小接近。结论 z66抗体诱导伤寒沙门菌鞭毛抗原表达转变后的染色体DNA发生了局部结构缺损；伤寒沙门菌z66鞭毛抗原阳性及诱变阴性株与单相标准菌株Ty2间在染色体DNA结构上有明显差异。     

转录因子T-bet和GATA-3对婴幼儿喘息性支气管炎的免疫调控作用

目的探讨转录因子T-bet和GATA-3对小儿喘息性支气管炎的免疫调控作用。方法对32例喘息性支气管炎(喘支组)和30例正常儿童(对照组)抽取抗凝静脉血5 mL,Ficoll分离外周血淋巴细胞,以终质量浓度为100 mg/L的植物血凝素(PHA)刺激48 h,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测淋巴细胞T-bet、GATA-3的mRNA表达水平。结果喘支组淋巴细胞培养上清液IFN-γ水平[(528±164)ng/L]低于对照组[(870±203)ng/L](P<0.05),而IL-4水平[(106±29)ng/L]明显高于对照组[(47±15)ng/L](P<0.01);喘支组和对照组淋巴细胞T-bet mRNA水平分别为(0.11±0.03)(、0.17±0.03),GATA-3 mRNA分别为(0.54±0.09)、(0.41±0.07),提示喘支组T-bet mRNA表达较对照组减少(P<0.05),而GATA-3 mRNA明显高于对照组(P<0.01);喘支组IFN-γ水平与T-bet mRNA表达I、L-4与GATA-3 mRNA表达均呈正相关(r=0.57,0.60 P均<0.01);IFN-γ与IL-4水平、T-bet mRNA与GATA-3 mRNA表达均呈负相关(r=-0.38,-0.46 P均<0.05)。结论1.喘支组患儿淋巴细胞合成IL-4水平增高,IFN-γ减少,存在以Th2细胞过度分化为特征的T辅助细胞分化失衡。2.喘支组患儿T细胞分化失衡受到核转录因子T-bet和GATA-3的调控,T-bet表达减少可能是一重要因素。