北京鸭载脂蛋白A－Ⅰ的—级结构研究及其在动脉粥样硬化发病和生物学中的意义（简报）

北京鸭载脂蛋白Ａ－Ⅰ的—级结构研究及其在动脉粥样硬化发病和生物学中的意义（简报）王克勤，贺延春，李游，陈保生，戈托，顾梓伟，杨曼兰，解用虹，杨朝谕（中国医学科学院，中国协和医科大学，北京基础医学研究所，北京１００００５）以往本组发现北京鸭富含高密度脂...     

鸭血清脂蛋白的研究Ⅱ.鸭血清高密度脂蛋白的分离提纯与鉴定

利用硫酸右旋糖酐沉淀和区带头密度梯度超速离心一次即可获得总量达377毫克的鸭血清HDL,平均浓度为2.69毫克/毫升。样品经琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫双扩散、免疫电泳、双向免疫电泳及分析超离心鉴定,证实为纯净的HDL。制备的鸭HDL仍保持其抗原性,对牛乳脂蛋白脂肪酶有激活作用。本法提纯鸭血清HDL耗时短,纯度高,产量大,重复性佳;提纯样品为深入研究HDL及其载脂蛋白结构、功能和代谢等创造了条件。     

脂蛋白脂肪酶Pro207→Leu基因突变致高甘油三酯血症

目的探讨高甘油三酯血症与脂蛋白脂肪酶基因突变之间的内在联系.方法采用PCR-SSCP和DNA测序技术,对1例随访多年的高甘油三酯血症患者LPL基因第1～9个外显子、部分内含子和5'端调节区进行筛查.结果该患者经检测确定为LPL外显子5 Pro207→Leu错义突变.对先证者全家进行家系分析,证实家系中先证者及其父亲均为高甘油三酯血症患者,且均为LPL外显子5 Pro207→Leu错义突变.结论推测此突变影响了LPL分子的活性中心的形成,从而降低了催化活性,导致了高甘油三酯血症的发生.     

LpB：E标准物的制备

用纯化的人ＬＤＬ（ａｐｏＢ）免疫山羊，获得特异性羊抗人ａｐｏＢ抗血清。将用正辛酸、硫酸铵沉淀和Ｐｒｏｔｅｉｎ－Ｇ亲和层析纯化的羊抗人ａｐｏＢＩｇＧ与ＣＮＢｒ－ａｃｔｉｖａｔｅｄＳｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ共价交联，可制备获得特异性抗体亲和层析柱。将适量的人血清通过该亲和柱，用高ｐＨ缓冲液冲洗后，用低ｐＨ缓冲液洗脱，可获得含ａｐｏＢ的脂蛋白，其中包括了同时含ａｐｏＢ和ａｐｏＥ的ＬｐＢ：Ｅ组分。测定其ａｐｏＥ含量后，该组分可作为测定ＬｐＢ：Ｅ的标准物。     

脂蛋白脂肪酶基因Ser~(447)→stop变异对血脂水平的影响

目的探讨国人脂蛋白脂肪酶基因外显子9特别是Ser447→stop变异对血脂水平的影响.方法利用聚合酶链反应-单链构象多态性技术筛查基因突变,利用DNA测序和聚合酶链反应-限制片长多态性技术确定突变的性质,并分析突变与血脂水平的关系.结果在420例甘油三酯正常(<1.7 mmol/L)人群检出78例突变,其中1例为纯合子,77例为杂合子;经DNA测序和聚合酶链反应-限制片长多态性技术分析突变均为Ser447→stop无义突变.Stop447携带频率和等位基因频率分别为18.6%和9.4%.Stop447携带组的甘油三酯水平(1.05±0.32 mmol/L)低于Stop447非携带组(1.13±0.28 mmol/L)(P<0.05);Stop447携带组的高密度脂蛋白胆固醇水平(1.28±0.28 mmol/L )虽然高于Stop447非携带组(1.25±0.27 mmol/L),但无统计学差异(P>0.05 ).结论国人基因外显子9突变单一,仅表现为Ser447→stop多态性,Ser447→stop变异可能有较弱的降低甘油三酯的作用.     

一种新的脂蛋白脂肪酶基因突变(C562→T)

目的:筛查国人(天津地区)脂蛋白脂肪酶基因突变情况,并探讨其对血脂水平的影响。方法:利用聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术,对386例患者(血脂正常组278例,血脂异常组108例)的脂蛋白脂肪酶基因进行突变筛查,对可疑突变的扩增样品进行DNA序列测定。结果:在386例样本中,检出1例外显子3C562→T(Leu103→Leu)同义突变杂合子。结论:新LPL突变(C562→T)的发现,对进一步阐述LPL结构与功能的关系有重要的参考价值。     

天津地区国人CETP第15外显子突变(Asp~(442)→Gly)频率

目的 :检测胆固醇酯转移蛋白第15外显子突变 (Asp442→Gly) ,为探讨CETP在AS发生、发展中的作用提供基础数据和参考资料。方法 :利用特异设计的错配碱基引物 ,在PCR扩增获得的人CETP第15外显子突变片段人工导入了一MspI酶切位点 ,根据酶切片段的电泳图谱检测人CETPAsp442→Gly 突变。结果 :131例正常成年人中发现4例杂合子突变 ,突变率为3.05% ,首次证实Asp442→Gly 突变在天津的存在。结论 :天津地区存在CETPAsp442→Gly 突变 ,突变体HDLc平均水平虽高于正常对照组 ,但无统计学差异 (P>0.05)。     

应正确使用名词"醛固酮合酶"和"醛固酮合成酶"

中华心血管病杂志编辑部： 近读贵刊第33卷第7期的一些章，个人认为“醛固酮合成酶”命名和翻译可能有失当之处，提出以下意见供参考。     

脂蛋白脂肪酶外显子9基因突变研究

目的 :筛查国人脂蛋白脂肪酶 (LPL)外显子9基因突变和Ser447→stop突变频率 ,并探讨该突变对血脂水平的影响。方法 :依血脂测定结果 ,将169例分为高甘油三酯血症组(HTG组 ) ,48例和正常甘油三酯组(对照组 )121例 ,利用聚合酶链反应 -单链构象多态性和聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析技术对待测人群的LPL基因外显子9及其相邻内含子区域进行突变筛查 ,并对典型单链构象电泳图谱携带者进行PCR产物测序。结果 :在169例中检出1例Ser447→stop突变纯合子 ,50例Ser447→stop杂合子 ,未检出其它位点的突变 ;HTG组的Ser447→stop突变检出率 (25.0 % ,12/48)明显低于对照组 (31.4 % ,38/121) ,HTG组的Stop447 等位基因频率(12.5% )明显低于对照组 (16.5% ),两组比较差别均有统计学意义(P<0.01)。结论 :我国人群中LPL外显子9突变种类单一 ,Ser447→stop是一高频率的多态性位点 ,Stop447等位基因可能有轻微的降低血浆甘油三酯的作用。     

鸭血清脂蛋白的研究Ⅲ.鸭血清高密度脂蛋白主要载脂蛋白的分离、提纯及其某些性质的研究

经醇醚混合液及乙醚反复脱脂、提纯的鸭血清高密度脂蛋白在8M尿素中用SephadexG-200凝胶过滤可分离成三个组份。根据SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,组份Ⅰ主要由组份Ⅱ的聚合体和一些高分子成份组成,后者很可能是组份Ⅱ不可逆的聚合体。组分Ⅱ是HDL的主要蛋白成份,在电泳中显示单一的蛋白染色带,凝胶电泳测定其分子量为26,300道尔顿,由237个氨基酸残基组成,不含半胱氨酸。由于该成分与人的apoA-Ⅰ有相似的物理化学性质,称其为鸭apoA-Ⅰ。