金银花类药用植物IspE和IspH基因克隆和生物信息学分析

目的:克隆金银花类药用植物4-二磷酸胞苷-2-C-甲基赤藓糖激酶(4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol kinase,IspE)和4-羟基-3-甲基-2-邻苯基二磷酸还原酶(4-hydroxy-3-methylbut-2-enyl diphosphate reductase,IspH)基因,并对其基因序列、蛋白特性和转录活性进行分析、比较.方法:从忍冬Lonicera japonica转录组测序结果中分析获得了IspE,IspH基因.分别以忍冬、红白忍冬L.japonica var.chinensis、红腺忍冬L.hypoglauca和水忍冬L.dasystyla新鲜花蕾为材料,利用RT-PCR技术克隆获得了4种金银花类药用植物IspE和IspH基因的全长cDNA.运用生物信息学分析软件,预测编码蛋白的结构和功能,并通过RT-PCR检测IspE和IspH在忍冬、红白忍冬、红腺忍冬、水忍冬花蕾中的转录情况.结果:金银花类药用植物IspE基因含有1个完整的开放阅读框,长度为1 221 bp,编码406个氨基酸;IspH含有一个完整的开放阅读框,长度为1 380 bp,编码459个氨基酸.IspE和IspH均为非分泌蛋白,均定位于叶绿体中.RT-PCR分析结果表明在忍冬、红腺忍冬和水忍冬的花蕾中IspE,IspH基因的转录水平没有显著差异,但红白忍冬花蕾中IspE,IspH基因的转录水平均显著高于忍冬.结论:克隆获得忍冬、红白忍冬、红腺忍冬和水忍冬中IspE,IspH基因,并证实了其在不同金银花类药用植物中的表达,为进一步研究IspE,IspH基因对萜类化合物生物合成和花香气以及颜色的影响奠定了基础.     

沙棘果中总黄酮苷类的提取工艺研究

目的探讨沙棘果实中总黄酮苷类的最佳提取工艺。方法采用单因素实验和正交实验结合的方法筛选,对乙醇浓度、提取温度、料液比、提取时间进行四因素三水平的正交试验。结果最佳工艺条件为70℃下采用60%的乙醇浸提,固液比1∶15,回流提取(0.5 h×3)。结论首次将水解后的沙棘总黄酮苷元作为沙棘总黄酮提取工艺的评价指标,在分析检测方法上不仅应测定水解前,还应考察测定水解后总黄酮苷元的含量。     

正交试验结合苯酚-硫酸法优选茅苍术中多糖的提取工艺

目的:优选出茅苍术中多糖成分的最佳水提取工艺。方法:采用水提醇沉法提取多糖成分,以苯酚-硫酸法测定总多糖的含量。以总多糖含量为评价指标,以提取时间、提取次数和加水量为影响因素,采用正交试验优选茅苍术中总多糖的最佳提取工艺。结果:茅苍术中多糖成分的最佳提取工艺为水提取3次,每次加水10倍量,每次提取1.0小时。结论:正交试验结合苯酚-硫酸法考察茅苍术中多糖成分的最佳水提取工艺稳定可行。     

小金胶囊联合优甲乐治疗甲状腺结节的临床观察

目的:观察小金胶囊配合优甲乐治疗甲状腺功能功能正常的甲状腺结节的临床疗效。方法:189例甲状腺功能正常的甲状腺结节病例,分成优甲乐组(A组64例)、小金胶囊组(B组65例)和联合组(C组60例),分别治疗6个月,比较3组的治疗疗效及其不良反应。结果:小金胶囊联合优甲乐组总有效率高于单用优甲乐或小金胶囊治疗组(P0.05),且3组患者均无明显的不良反应发生。结论:小金胶囊联合优甲乐治疗甲状腺功能正常的甲状腺结节,疗效明显优于单用优甲乐或小金胶囊,且无明显不良反应。     

对照道地药材的研究策略与应用探讨

建立道地药材评价体系一直是中药领域中亟待解决的问题,也是制约实现中药材优质优价的难题。在国家药品标准物质要求的基础上,该文提出了在道地药材评价体系中首先建立对照道地药材,并论述了对照道地药材属性、评价指标体系及其研制要求,旨在为道地药材现代研究及其特征辨识提供支撑。     

木通与川木通及关木通的快速PCR鉴别

目的:建立一种准确、快速、高效鉴别木通、川木通及关木通的分子鉴别方法。方法:采集不同产地的木通、川木通及关木通基原植物,所有样品进行总DNA的提取,通过对木通、川木通及关木通样品trn L-trn F片段进行扩增、测序,进行同源比对后根据其变异位点设计特异性鉴别引物,采用2步法进行PCR扩增,从而对木通、川木通及关木通进行鉴别。结果:通过对影响PCR反应时间的退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化,并对不同型号PCR仪进行考察,分别获得木通、川木通及关木通快速PCR反应程序。在PCR产物中加入SYBR Green I染料,正品显示出明亮绿色荧光,而混淆品不显示荧光。结论:快速PCR方法可以简单快速鉴别木通、川木通及关木通,为实现药材分子鉴别的现场运用提供技术支撑。     

冬虫夏草PCR快速检测试剂盒的研制与效果评价

冬虫夏草为我国传统名贵中药材。资源短缺、价格昂贵和巨大的市场需求导致市售冬虫夏草掺伪掺假现象严重,亟需建立快速有效的鉴别方法。该研究基于实验前期已建立的冬虫夏草快速鉴定SS-PCR方法,按照体外诊断试剂评价标准开发试剂盒,并对试剂盒的特异性、检测限、重复性及保存期4项性能进行了评价。结果显示冬虫夏草质量占混合物质量的1/200(质量分数0.5%以上)以上时可被成功检测。试剂盒对冬虫夏草及其伪品的检测结果显示,仅有冬虫夏草可被成功扩增,并在紫外下显示绿色荧光。该试剂盒37℃温育7 d仍有效,说明4℃保存其在1年内稳定有效。同一批次试剂盒在不同条件下,不同批次试剂盒在相同条件下,其检测结果均一致且准确,表明试剂盒具有良好的批内及批间重复性。将该试剂盒用于市售冬虫夏草及其混伪品的检测,操作简单快速,结果准确可靠,为下一步中药快检试剂盒的商品化奠定了基础。     

多节段颈椎病前路手术严重并发症的护理干预

前路手术是治疗颈椎退行性疾病的有效方法[1],但手术风险大,并发症多[2],特别是行多节段颈椎前路手术时,解剖范围大、手术时间长、需长节段的植骨及内固定,增加了手术的风险.术后咽喉部水肿、呼吸道梗阻、颈部及硬膜外血肿、内置物脱落等严重并发症发生的可能性增大.本院自2008年来,对32例颈椎病前路多节段手术的患者进行早期的、有针对性的护理干预,取得良好效果,报告如下. 1 资料与方法 1.1 一般资料 本组32例为铜陵市人民医2008-2012年收治的患者,男性22例,女性10例;年龄43～68岁,平均年龄59岁;病程2个月至3年,平均8.3个月.颈椎两节段病变25例,三节段病变7例.     

丝裂原活化蛋白激酶及核因子-κB信号通路与肠上皮细胞损伤

肠功能障碍在危重病发展过程中起着非常重要的作用,因此,深入了解肠功能障碍时肠上皮细胞损伤发病机制,采取有针对性的保护治疗措施,将为临床上治疗及阻止多系统器官功能衰竭的发生提供更好的治疗手段.目前涉及肠功能障碍发病机制的因素有很多,近来研究表明,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核因子-κB(NF-κB)通过多方面的信号调节,影响着介质释放和细胞内其他信号通路,参与了肠道上皮细胞的促炎因子释放、细胞凋亡等损伤过程,通过阻断和调控MAPK和NF-κB信号分子的表达活性,可以恢复肠功能障碍中严重受损细胞的免疫功能.该文就MAPK及NF-κB信号通路与肠上皮细胞损伤相关的研究作一综述.     

肿瘤体积对局部进展期直肠癌预后的影响

目的:探讨肿瘤体积(gross tumor volume,GTV)对接受新辅助放化疗(neoadjuvant chemoradiotherapy,NCRT)和全直肠系膜切除术(total mesorectal excision,TME)后,局部进展期直肠癌(locally advanced rectal cancer,LARC)患者的预后影响。方法:回顾性分析2011年1月至2016年9月湖南省肿瘤医院收治的128例初治直肠癌患者的临床资料,均接受术前同步放化疗+TME。采用受试者工作特征曲线(receiver-operating characteristic,ROC)分析GTV截点值,用Kaplan-Meier生存分析和Cox比例风险回归模型进行预后分析。结果:行NCRT后T分期降期率为58.6%,N分期降期率为69.5%,总体降期率为77.3%,病理完全缓解(pathologi-cal complete response,p CR)率为16.4%,总体保肛率为57.03%。GTV的截点为79.31 m L,GTV≥79.31 m L与GTV<79.31 m L患者的3年总生存...