妊娠相关血浆蛋白-A在血管平滑肌细胞中表达及其细胞学功能

目的:研究兔动脉粥样硬化(AS)模型中AS易损斑块培养出的血管平滑肌细胞(VSMCs)妊娠相关血浆蛋白-A (PAPP-A)的表达及其细胞学功能.方法:建立新西兰兔AS易损斑块模型,体外培养来源于主动脉正常组织、易损斑块组织的VSMCs.RT-PCR检测这两个不同来源VSMCs中PAPP-A的mRNA表达水平;细胞免疫组化方法检测PAPP-A的蛋白表达,并确定表达部位.利用MTT法测定细胞生长曲线,采用划痕法检测细胞迁移能力,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:易损斑块组织的细胞PAPP-A的mRNA水平高;正常组织的VSMCs无PAPP-A的mRNA表达.免疫组织化学结果显示PAPP-A在易损斑块平滑肌细胞为强阳性表达,主要分布于细胞的胞质,正常主动脉的VSMCs中未见PAPP-A表达.来自易损斑块的血管平滑肌细胞生长能力强,较易迁移但易调亡.结论:易损斑块的血管平滑肌细胞强烈表达PAPP-A,并表现出相应的细胞学功能改变.     

北京市城区18997名中老年男性睡眠状况及其影响因素调查

目的：调查中老年男性的睡眠状态,分析其影响因素.方法：由专业医生以问卷应用二阶段抽样统计方法,于2004-03/08对北京市5个城区的普通社区居民中的41～60岁的中年男性（6 000名）和＞61岁的老年男性（14 000名）,共计20 000名进行调查,符合年龄和性别条件愿意参加调查者即可加入填表.调查工具包括匹兹堡睡眠质量指数量表（包括7个项目,被调查者根据自己1个月来的实际情况分4个等级标准回答,分别计0～3分）和睡眠行为及影响因素表（包括入睡时间、进入睡眠时间、睡间活动、起床时间,依据所提供时间计算睡眠效率即：实际睡眠时间/卧床时间.影响因素包括20个自评条目,每项4个等级分别计0～3分：0分为无,1分为轻微,2分为较重,3分为严重.自评项目分≥2的说明该因素对睡眠质量构成影响）、一般项目调查表（包括人口统计学资料、婚姻状况、业余爱好等信息）等.全部资料用SPSS 10.0软件进行统计学分析.结果：资料完整、准确者18 997名（中年5 714名,老年13 283名）,应答率为94.985%.①不良睡眠发生率：中年人17.2%,老年人占25.4%.②影响睡眠的生理因素：主要为咳嗽打鼾（中年38.3%,老年45.2%）,多梦惊醒（中年30.5%,老年20.5%）,夜间如厕（中年25.1%,老年42.4%）,夜间易醒早醒（中年15.3%,老年40.6%）等.③影响睡眠的社会因素：婚姻状况婚姻状况不正常的睡眠质量不好分别占38.7%和43.1%;社会关系中经常参加社会活动的睡眠质量不好的分别占40.5%和24.3%;经济状况一般和经济状况不好的睡眠质量不好的分别占24.3%和33.7%.结论：①北京市中老年男性约20%存在睡眠质量问题,老年人睡眠质量不好的比率高于中年人.②影响睡眠的因素中主要为咳嗽打鼾、多梦惊醒、夜间如厕、夜间易醒早醒等生理因素及婚姻状况、社会关系及经济状况等社会因素.     

人冠状动脉平滑肌细胞表达基质金属蛋白酶3与白细胞介素1β的相关性

目的:观察人冠状动脉平滑肌细胞表达基质金属蛋白酶3与炎症因子白细胞介素1β的关系。方法:实验于2005-05/2006-08在解放军第三○五医院老年病中心实验室完成。人冠状动脉平滑肌实验用5～7代的细胞,按2.5×108L-1密度接种于25cm2的培养瓶中,24h后换液,生长接近80%融合时进行如下处理:①20μg/L质量浓度白细胞介素1β培养0,2,4,8,24,36h后收集上清夜和细胞。②不同质量浓度(0,5,20,40μg/L)白细胞介素1β处理6h后收集上清液和细胞。采用细胞总RNATRIzol试剂提取RNA,在紫外分光光度计确定总RNA的浓度和纯度,并在12g/L的琼脂糖凝胶中电泳,凝胶成像分析RNA的质量。应用实时荧光定量聚合酶链反应的方法检测细胞内基质金属蛋白酶3基因的表达量。结果:①细胞总RNA质量及纯度:每份样品取4μL稀释至400μL测定其A260nm/A280nm吸光度比值均在1.8～2.0之间,说明所提RNA纯度较高;电泳图片上可见RNA清晰的18S和28S的条带,无弥散,说明RNA质量较好。②目的基因的表达量:同剂量白细胞介素1β作用下,基质金属蛋白酶3基因的表达量在2h时开始发生上调,8h达高峰,而后开始下降;在不同剂量白细胞介素1β作用下,基质金属蛋白酶3基因的表达量在实验剂量范围内随着白细胞介素1β的剂量加大呈上升趋势(r=0.904,P=0.000),20μg/L和40μg/L白细胞介素1β作用下,基质金属蛋白酶3基因的表达量差异无显著性(P=0.154),其余各剂量间基质金属蛋白酶3基因的表达量差异均有显著性(P<0.05)。结论:炎症因子白细胞介素1β能促进冠状动脉平滑肌细胞中斑块稳定相关标记物基质金属蛋白酶3的表达,可能是炎症在急性冠状动脉综合征发生发展中的作用机制之一。     

人类风湿性关节炎滑膜细胞系(RASB)的建立和生物学特性的观察

目的　建立人类风湿性关节炎滑膜细胞永生细胞系。　方法　用重组有HPV16病毒E6 E7基因阅读框架的逆转录病毒载体转染原代培养的人类风湿性关节炎滑膜细胞 ,经G418筛选 ,获取细胞克隆RASB ,并从形态学、生长特性、核型组成、致瘤性和分泌功能等多方面对建系细胞RASB进行生物学观察。　结果　实验和观察证实 ,转化滑膜细胞染色体整合HPV病毒DNA ,表达HPVE6蛋白 ,基本保留了B型滑膜细胞特征形态、细胞骨架和分泌功能 ,倍增时间缩短一半 ,对裸鼠无致瘤性 ,软琼脂培养形成细小集落。已稳定传代大于 10 0代。　结论　建立了能长期体外稳定传代的人类风湿性关节炎滑膜细胞系。此细胞系的建立将为类风湿关节炎致病机理的研究和治疗提供极有意义的体外细胞模型。     

右心室心肌梗死32例心电图分析及其对临床价值

单纯右心室心肌梗死(RVMI)相对少见,且常伴有下壁、前壁和后壁等其他不同部位的心肌梗死,急性右心室心肌梗死(ARVI)又与左心室急性心肌梗死在治疗上差异很大,故早期RVMI的诊断对降低心肌梗死(MI)发病率意义重大。在发病早期,仔细分析心电图,捕捉某些异常心电图改变不失为早期诊断RVMI的简单、实用且具有较高敏感性及特异性的方法。     

缬沙坦对人脐动脉平滑肌细胞MMP-9、TIMP-1表达的影响——附106份检测报告

目的：探讨缬沙坦对人脐动脉平滑肌细胞基质金属蛋白酶-9（matrix metal—loproteinase,MMP-9）、组织型金属蛋白酶抑制物-1（tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP-1）表达的影响。方法：对人脐动脉平滑肌细胞进行原代培养,根据平滑肌原代细胞的培养方式分为氧化低密度脂蛋白（oxidized low—density lipoprotein,ox-LDL）培养组（ox-LDL组）、AngⅡ加ox-LDL培养组（AngⅡ组）、AngⅡ加ox-LDL加缬沙坦培养组（缬沙坦组）、普通培养基培养组（对照组）,应用ELISA法及逆转录PCR法分别检测4组上清液中的MMP-9、TIMP—1含量,以及细胞内MMP-9、TIMP-1 mRNA的相对表达量,并应用统计学方法进行比较。结果：AngⅡ组上清液中的MMP-9含量均明显高于其他3组（均为P〈0．01）。ox-LDL组与AngⅡ组上清液中TIMP-1的含量均明显低于对照组（均为P〈0．01）,缬沙坦组与对照组上清液中TIMP-1的含量比较差异无统计学意义（P〉0．05）。另外,AngⅡ组细胞内MMP-9 mRNA的相对表达量均明显高于其他3组（均为P〈0．01）,其TIMP-1 mRNA的相对表达量均明显低于对照组、ox-LDL组及缬沙坦组（均为P〈0．01）,缬沙坦组细胞内TIMP-1 mRNA的相对表达量明显低于对照组（P〈0．05）,但与ox-LDL组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：AngⅡ可增加人脐动脉平滑肌细胞MMP-9的表达而降低TIMP-1的表达,缬沙坦可以抑制AngⅡ的这种作用。     

桃叶珊瑚苷对高糖诱导的肾小管上皮细胞炎症损伤的机制

目的 探讨桃叶珊瑚苷(AU)对高糖诱导的肾小管上皮细胞炎症损伤的影响及分子机制.方法 将肾小管上皮细胞HK-2分为对照(Con)组、高糖(HG)组、桃叶珊瑚苷低、中、高浓度(HG+ AU-L、M、H)组、HG+ miR-NC组、HG+miR-374组、HG+ AU+ anti-miR-NC组、HG+ AU+ anti-...     

烯醇化酶1在肿瘤中的研究进展

烯醇化酶1(ENO1)是一种多功能蛋白质,作为糖代谢过程中的关键酶,在细胞能量代谢过程中发挥重要作用,大量研究证实了其在细胞内外表达量的变化与多种疾病之间存在密切联系。近年,ENO1以及与之相应的抗ENO1抗体在肿瘤方面的应用逐渐得到重视,很多肿瘤中存在ENO1的高表达,ENO1的高表达促进肿瘤细胞的增殖、迁移与侵袭。本文主要围绕ENO1与相关肿瘤间的关系展开综述,介绍其在肺癌、肝癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌等癌症中的研究进展。ENO1或有潜力作为新的肿瘤标志物应用于肿瘤的辅助诊断,以及作为新的靶点应用于肿瘤的治疗。     

液氮冻伤术建立动脉粥样硬化破裂斑块及血栓模型

目的 创建一种操作简单、经济实用的动脉粥样硬化(AS)破裂斑块及血栓动物模型.方法 21只雄性纯种新西兰白兔随机分为两组:液氮冻伤+高脂喂养组(A组=11只)和高脂喂养组(B组=10只).A组实施右颈总动脉内膜液氮冻伤术结合高脂饲料喂养,B组单纯给予高脂饲料喂养.8周末以液氮激发斑块破裂,激发前后分别采血检测血脂、hsC-RP、MMP-9及PAI-1水平;激发48 h后处死所有动物,取出右颈总动脉作HE染色及免疫组化染色等,光镜及电镜观察破裂斑块及血栓形成情况.结果 8周后兔血脂水平明显升高;激发后血浆hsC-RP、MMP-9及PAI-1均明显升高;所有A组兔子的右颈总动脉均可见AS破裂斑块及血栓形成,而B组兔子未见斑块或血栓形成;所建立的破裂斑块在组织结构、细胞构成、生长特征和脂质沉积方面与人类斑块相似.结论 液氮冻伤术能简便、快速、高效地建立AS破裂斑块及血栓模型,从而为研究人类AS破裂斑块及血栓形成的机理和药物干预治疗提供了一种新型动物模型.     

睾酮对雄兔hs-CRP、MMP-9、HO-1、APN和动脉粥样硬化斑块稳定性的影响

目的探讨睾酮对雄兔血高敏C反应蛋白（hs-CRP）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血红素氧化酶-1（HO-1）、脂联素（APN）和动脉粥样硬化斑块稳定性的影响。方法将66只雄性新西兰纯种兔随机分为4组,其中正常对照组10只（A组）、喂以普通饲料;假去势＋球囊损伤颈动脉组16只（B组）、去势＋球囊损伤颈动脉＋生理剂量睾酮（6mg/（kg.2周））肌注组16只（C组）、去势＋球囊损伤颈动脉＋生理盐水肌注组24只（D组）均喂以高脂饲料。在实验第8周随机抽取处死部分动物,观察颈动脉病变的形态特征,抽血测睾酮、hs-CRP、MMP-9、HO-1、APN水平。结果D组兔血睾酮水平显著降低;B,C组较D组兔血hs-CRP、MMP-9水平显著降低,HO-1、APN水平显著升高;且B,C组较D组兔动脉粥样斑块的面积和内-中膜厚度（IMT）显著减小,斑块纤维帽增厚、胶原含量明显增加。结论生理剂量睾酮可以影响雄兔血hs-CRP、MMP-9、HO-1、APN水平,并能调节动脉粥样硬化斑块进展与斑块的稳定性。