人工合成拟Smac多肽增强膀胱癌细胞化疗敏感性的实验研究

背景与目的: Smac是目前发现的惟一能直接同时抑制多个IAPs家族成员活性的凋亡相关蛋白,其N端的4个氨基酸残基AVPI(Ala-Val-Pro-Ile)是重要的促凋亡结构域,我们通过人工合成可穿透细胞的促凋亡融合多肽SmacN7,探讨其对膀胱痛化疗药物敏感性的促进作用.方法: 噻唑蓝(MTT)检测SmacN7融合多肽对低剂量丝裂霉素C(MMC)诱导的膀胱癌T24细胞的相对存活率的影响;Annexin V/PI双标流式细胞术检测T24细胞的凋亡:Western印迹检测SmacN7融合多肽与MMC联用后T24细胞内XIAP、Caspase-3的表达;同时检测Caspase-3活性及SmacN7融合多肽与MMC联用对T24细胞的杀伤作用.结果: SmacN7融合多肽能穿透细胞并与内源性XIAP结合,增加低剂量MMC诱导的T24细胞凋亡并呈时间和浓度依赖性;并能显著降低细胞内xlAP的表达水平,增强Caspase-3的表达及活性;在24 h和48 h,SmacN7 MMC组与单用MMC组相比,T24细胞的存活率分别降低55%和72.7%.结论: 人工合成可穿透细胞的促凋亡融合多肽SmacNT能促进化疗药物诱导的膀胱癌T24细胞凋亡,抑制细胞增殖,增强膀胱癌细胞对MMC的化疗药物敏感性.     

肾上腺皮质癌9例报告

目的：探讨肾上腺皮质癌的诊断和治疗方法。方法：回顾性分析9例肾上腺皮质癌患者的临床资料,其中男7例,女2例。年龄5个月～63岁,平均39岁。术前全部行B超及CT检查,有内分泌异常者2例,分别为Cushing syndrome及原发性醛固酮增多症。无内分泌异常者7例。结果：手术完整切除9例。术后病理检查：I期1例;Ⅱ期4例;Ⅲ期3例;Ⅳ期1例。随访4～60个月,平均生存30个月,1例因肺部转移而术后26个月死亡,1例失去随访,其余7例均存活至今。结论：肾上腺皮质癌恶性程度较高,预后较差,根治性切除是治疗肾上腺皮质癌最有效的方法。化疗及放疗可作为术后辅助治疗。早期诊断和早期治疗可提高患者生存率。     

钬激光前列腺剜除术和经尿道前列腺电切术治疗良性前列腺增生疗效和安全性的Meta分析

目的:系统评价钬激光前列腺剜除术(HoLEP)和经尿道前列腺电切术(TURP)治疗良性前列腺增生(BPH)的疗效和安全性.方法:计算机检索PubMed、Embase、The Cochrane Library和Web of Science收集比较HoLEP和TURP治疗BPH的随机对照试验(RCT),检索时限均从建库至2...     

茉莉素抗肿瘤作用及其机制研究进展

茉莉素在调控植物生长发育和应激反应中具有重要作用,亦可以通过促进凋亡、诱导分化等方式抑制多种肿瘤细胞生长,具有选择性作用于肿瘤细胞、可以抗耐药肿瘤细胞的特点,是一类潜在的新型抗肿瘤药物。目前认为,茉莉素的抗肿瘤机制与丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激活、线粒体PT孔开放、活性氧家族（ROS）产生、促凋亡蛋白Bax与Bcl-xS上调、细胞内ATP耗竭等有关。     

APEH基因在肾透明细胞癌中的表达研究

目的研究APEH基因在肾透明细胞癌中的表达,以探索其意义。方法应用半定量RT-PCR、实时定量PCR、免疫组化（IPH）检测30例配对肾透明细胞癌组织/癌旁正常肾组织标本中APEH基因mRNA和蛋白的表达,并对其中16例配对标本进行Western blot蛋白检测,予以统计分析。结果相较正常对照组,RT-PCR、实时定量PCR及IPH均显示肾细胞癌组织中APEH基因表达下调,其比例分别达到60.0%（18/30）、73.3%（22/30）和80.0%（24/30）,另外,Western blot示62.5%（10/16）的癌组织标本APEH蛋白表达下调。4种方法检验P值均〈0.05,差异有统计学意义,且针对同一批配对标本各检测方法结果之间一致性显著。结论 APEH可能为一新的肾透明细胞癌分子标志物。     

茉莉素对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH的抑制增殖及诱导凋亡作用

目的 观察茉莉素对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH的抑制增殖及诱导凋亡作用,并比较茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸作用强度差异.方法 1～10mmol/L茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸分别处理SK-N-SH细胞后,MTT法检测细胞生长活性;克隆形成实验检测细胞增殖能力;PI单染法流式细胞术检测细胞周期;AO/EB荧光染色法、Hoechst 33258荧光染色法、AnnexinⅤ-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡.结果 各浓度茉莉素作用后,SK-N-SH细胞呈时间、浓度依赖性生长抑制,其中茉莉酸甲酯作用最强,1～10mmol/L茉莉酸甲酯作用24 h后,细胞生长抑制率为(22.74～88.67)%,IC50为1.44mmol/L;2.5mmol/L茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸作用后,细胞克隆形成能力分别降低87.00%、78.66%、39.00%,细胞周期示S期细胞比率显著增高,G0/G1期细胞比率下降,部分细胞发生典型的凋亡形态学改变;1.5～2.5mmol/L茉莉酸甲酯作用后,细胞凋亡率为(23.77～36.43)%.结论 茉莉素能通过减弱瘤细胞增殖、诱导细胞周期阻滞和凋亡等机制抑制人神经母细胞瘤细胞株的生长活性.     

膀胱移行细胞癌中PKM2与多聚嘧啶串结合蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨PKM2与多聚嘧啶串结合蛋白(PTB)在膀胱移行细胞癌中的表达及意义.方法 半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定PKM2和PTB mRNA在不同分级膀胱癌组织和膀胱癌细胞株中表达水平的变化;Western blot法测定PKM1、PKM2和PTB蛋白表达水平的变化;免疫组织化学方法检测膀胱移行细胞癌组织及正常膀胱组织中PKM1、PKM2与PTB的表达差异.结果 PKM2与PTB的mRNA水平和蛋白水平在膀胱移行细胞癌中明显增高,以高分级癌组织和癌细胞株中最为明显.免疫组织化学显示膀胱移行细胞癌组织PKM2阳性率为84.4%(38/45),高于正常膀胱黏膜组织60.0%(27/45),P＜0.05;PTB在膀胱移行细胞癌组中的阳性率为95.6%(43/45),高于正常膀胱粘膜组织55.6%(25/45),P＜0.05,且PKM2的表达与PTB呈正相关.结论 PKM2与PTB在膀胱移行细胞癌组织中呈高表达,两者的表达呈正相关,提示PTB可能通过对PKM2的选择性剪接而调控膀胱癌细胞的能量代谢.     

非对称性小RNA干扰技术介导的USP22基因沉默的研究

目的 观察非对称小干扰RNA(aiRNA)对膀胱癌EJ细胞泛素特异肽酶22(USP22)基因的沉默效率及特异性的影响.方法 设计并合成USP22基因的小干扰RNA(siRNA)及aiRNA,利用脂质体Translipid转染EJ细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测转染前后EJ细胞USP22 mRNA的表达水平变化,比较USP22 siRNA与USP22 aiRNA对USP22基因沉默效率及特异性的差异.结果 浓度为50 nmol/L的15/21 USP22 aiRNA能明显抑制EJ细胞中USP22基因mRNA的表达,转染48 h后USP22 mRNA的表达水平下降到最低[(8.30±1.68)%,P＜0.05],且其沉默效率和特异性明显优于USP22 siRNA.结论 以非对称小RNA干扰技术为基础设计的USP22aiRNA能够有效沉默USP22基因,并且降低了非特异性的脱靶效应,减少了受RNA干扰中的"饱和机制"及"竞争机制"的影响,弥补了传统siRNA的一些不足.     

机器人辅助腹腔镜前列腺癌根治术治疗高危局部进展期前列腺癌临床疗效分析

目的:探究机器人辅助腹腔镜前列腺癌根治术治疗高危局部进展期前列腺癌的疗效,为临床提供理论参考.方法:选取华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科2016年1月-2020年10月收治的237例高危局部进展期前列腺癌患者作为研究对象,分为观察组129例和对照组108例.对照组采用常规腹腔镜根治术治疗,观察组经机器人辅助行...     

除草醚诱导的小鼠先天性膈疝肺发育不良模型的建立

目的 建立小鼠先天性膈疝(CDH)模型.方法 实验组10只妊娠第8天的BABL/C小鼠通过灌胃给于除草醚25 mg/只,正常对照组给予橄榄油,于妊娠第20天剖宫产取出子鼠,解剖显微镜下观察子鼠有无膈疝形成,测定子鼠体重及双肺重量,HE染色观测肺组织发育情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织SP-B、SP-C和VEGF表达水平.结果 实验组69只子鼠中有膈疝形成者39只,成功率为56.5%,子鼠双肺重量较对照组显著降低(P＜0.01);实验组有膈疝形成和无膈疝形成者的肺组织均发育不良,处于假腺体期和原始肺小管期;与对照组比较,实验组胎肺组织中SP-B、SP-C和VEGF表达水平均显著下调(P＜0.01),且与膈疝形成与否无关.结论 采用除草醚能在小鼠成功建立CDH模型,具有简便、成功率高的优点,为深入研究CDH发病机制及其治疗提供了新的手段.