HPLC法测定栀子中栀子苷的含量

目的:建立栀子药材中栀子苷含量的检测方法。方法:采用SB-C18柱,以甲醇-水(23∶77,V/V)为流动相,柱温35℃、流速1.0 ml/min、检测波长240 nm。在此条件下,栀子苷可与样品中其他物质达到良好分离,进而对照标准曲线计算其含量。结果::所建立的方法线性范围可达2～10μg,平均加样回收率为101.2%、RSD为2.3%,5批栀子药材的栀子苷含量为0.910%～2.194%。结论:本研究建立的栀子苷检测方法,线性、稳定性、重现性及回收率均较为理想,可用于栀子药材及栀子苷分离纯化的质量控制。     

幽门螺杆菌外膜蛋白18的克隆表达及纯化研究

目的克隆表达幽门螺杆菌（HP）外膜蛋白,为HP的疫苗开发及诊断试剂盒的研究奠定基础。方法用PCR方法从HP临床分离株9806的染色体DNA中扩增出OMP18基因片段,将目的基因插入表达载体pQE30中,重组载体pQE30-OMP18经DNA测序鉴定后,将重组质粒转化大肠杆菌E．coli．M15,IPTG诱导表达。采用镍离子亲和层析纯化蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定其表达。结果PCR扩增出长度为537bp的OMP18基因,片段测序分析其与Gen—Bank公布的核苷酸序列相似性达99％;SDS—PAGE显示,重组工程菌经IPTG诱导表达了分子量为20．0kDa的目的蛋白,占总蛋白的20％,经纯化后,目的蛋白纯度达85％以上;Western blot结果表明,该蛋白可与兔抗HP的多克隆抗血清发生特异的抗原抗体结合反应。结论成功构建了OMP18表达载体pQE30-OMP18,并在大肠杆菌中获得高效表达,为HP疫苗有效抗原筛选及诊断试剂的开发奠定基础。     

致动脉硬化指数及血清同型半胱氨酸检测在糖尿病患者冠心病发病风险预测中的应用

目的 探讨致动脉硬化指数(AIP)及血清同型半胱氨酸(Hcy)水平预测2型糖尿病(T2DM)患者发生冠心病的临床价值.方法 选取102例T2DM患者、72例糖耐量减低(IGT)患者,与糖耐量正常(NGT)对照组75例,分别对其糖化血红蛋白(HbA1c)、同型半胱氨酸(Hcy)、脂蛋白(a)[Lp(a)]、超敏C反应蛋白(hs-CRP)以及常规血脂项目进行检测,计算AIP指数.T2DM患者再根据HbA1c的含量又分成血糖控制良好组(HbA1c≤7.0%,n=62)和血糖控制不佳组(HbA1c>7.0%,n=40),并与NGT组进行比较.结果 T2DM组和IGT组血清Hcy、AIP指数显著高于NGT组,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05);T2DM组与IGT组比较,血清Hcy、Lp(a)、hs-CRP、AIP指数差异均具有统计学意义(P<0.01或P<0.05);血糖控制不佳组(HbA1c>7.0%),其血清Lp(a)、AIP指数明显高于血糖控制良好组(HbA1c≤7.0%),差异有统计学意义(P<0.01),Hcy和hs-CRP也较血糖控制良好组(HbA1c≤7.0%) 升高(P<0.05),并且Hcy、Lp(a)、hs-CRP和AIP指数水平均具有随HbA1c升高而升高的趋势.结论 同时监测AIP指数及血清Hcy、Lp(a)、hs-CRP水平有助于判断糖尿病的发生、发展,相比而言,AIP指数和Hcy水平优于其他动脉粥样硬化指标,可作为IGT及T2DM发生动脉粥样硬化危险性的早期预测指标.     

跟腱延长术后康复治疗痉挛型脑瘫的临床观察

目的探讨痉挛型脑瘫跟腱延长术后进行长期系统的康复训练对患儿下肢功能的影响。方法对56例（年龄4～18岁）患儿行跟腱延长术后分为治疗组（30例）及对照组（26例）。治疗组采用了3个月康复机构系统训练,对照组仅进行家庭康复训练。分别在治疗前、治疗第1个月和3个月进行腓肠肌痉挛评分（改良Ashworth分值,MAS）、踝关节关节活动度（ROM）以及粗大运动功能量表（GMFM）评定。结果两组患儿治疗1个月和3个月后,MAS量化评分下降,GMFM站立走跑跳两大功能评分提高,与各自治疗前相比差异有统计学意义（P〈0.05～0.01）;踝关节ROM比治疗前改善明显,差异有统计学意义（P〈0.01）。治疗1个月和3个月后,治疗组MAS、踝关节ROM及GMFM等指标均优于对照组。结论痉挛型脑瘫跟腱延长术后,进行系统的康复训练可有效治疗改善痉挛型脑瘫患儿下肢功能。     

石杉碱甲对急性低压低氧模型大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 探讨石杉碱甲对急性低压、低氧模型大鼠空间学习与记忆能力的改善作用及其海马神经元细胞凋亡的缓解作用.方法 48只SD大鼠随机分为4组(n=12):平原组(对照组)、平原给药组、高海拔组(模拟6000m海拔)、高海拔给药组.各给药组在模拟低压、低氧实验前1d,按0.1mg/kg剂量给予石杉碱甲(配制成10mg/ml混悬液)灌胃给药.比较各组大鼠Morris水迷宫学习与记忆测试成绩.采用TUNEL法检测海马神经元细胞凋亡情况,Western blotting检测海马神经元细胞凋亡因子Bax及抗凋亡因子Bcl-2的表达.结果 与高海拔组比较,高海拔给药组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P＜0.05),60s内穿越平台次数增多(P＜0.05),目标象限滞留时间延长(P＜0.05),海马CA1区神经元凋亡数量减少(P＜0.05),海马组织中促凋亡因子Bax表达降低(P＜0.05),抗凋亡因子Bcl-2表达增加(P＜0.05).高海拔给药组与平原对照组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 石杉碱甲对急性低压、低氧导致的大鼠大脑海马神经元凋亡具有缓解作用,可改善模型大鼠的空间学习与记忆能力.     

2型糖尿病血糖控制水平与并发心血管疾病的风险研究

目的：探讨2型糖尿病（T2DM）患者血糖控制水平与并发心血管疾病风险的关系。方法：根据糖化血红蛋白（HbA1C）的含量将T2DM患者分成血糖控制良好组（HbA1C≤6.5%,n=62）和血糖控制不佳组（HbA1C〉6.5%,n=41）,分别对其脂蛋白（a）[LP（a）]、同型半胱氨酸（Hcy）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）以及常规血脂项目进行检测。结果：血糖控制不佳组,其血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、LP（a）、hs-CRP、Hcy均高于血糖控制良好组（P〈0.01或P〈0.05）,而高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）明显低于血糖控制良好组（P〈0.01）。结论：T2DM患者HbA1C水平越高,血糖控制越差,并发心血管疾病的风险就越高,因此,控制好血糖对预防或延缓T2DM患者并发心血管疾病具有重要意义。     

银杏内酯 B 对急进高原致大鼠空间记忆障碍的保护作用

目的探索银杏内酯B对大鼠急性低压低氧所致大脑空间记忆形成与保持能力的影响。方法80只SD大鼠随机分为5组：平原组（对照组,n=16）、急进海拔6000m组（6000m组,n=16）、急进海拔6000In不同剂量银杏内酯B给药组（6000m＋3、6、12mg·kg^-1组,每组n=16）。实验分为两部分,实验Ⅰ：大鼠急进高原损伤在Morris水迷宫定位导航实验与空间探索实验之间,实验Ⅱ：大鼠急进高原损伤之后进行Morris水迷宫定位导航实验和空间探索实验。两部分实验使用不同的大鼠,统计分析各实验组大鼠逃避潜伏期、游泳总路程、60S内穿越平台次数和目标象限滞留时间。结果实验Ⅰ中,预先给予6、12mg·kg^-1银杏内酯B组大鼠较6000m组60s内穿越平台次数显著增多（P〈0．05）,目标象限滞留时间显著增长（P〈0．05、P〈0．01）,而给予3mg·kg^-1剂量组较6000m组无显著性差异（P〉0．05）。实验Ⅱ中,预先给予6、12mg·kg^-1银杏内酯B组大鼠较6000m组第7天平均逃避潜伏期显著缩短（P〈0．05、P〈0．01）,平均游泳总路程显著缩短（P〈0．05、P〈0．01）,60s内穿越平台次数显著增多（P〈0．05、P〈0．01）,目标象限滞留时间显著增长（P〈0．05）,而给予3mg·kg^-1剂量组较6000m组无显著性差异（P〉0．05）。结论银杏内酯B可有效改善急进高原大鼠空间记忆的形成与保持能力。