桔梗皂苷D联合伊马替尼对K562细胞的增殖抑制作用及机制研究

目的探讨桔梗皂甙D（platycodin,PD）与伊马替尼（imatinib,IM）联合用药抑制慢性粒细胞白血病细胞株K562的作用及机制研究。方法体外培养CML细胞株K562,CCK-8测定PD和IM单药及联合用药对K562细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测AnnexinV/PI标记的细胞凋亡率,Westernblot方法检测cleavedcaspase-3、cleavedcaspase-9、PARP、cleavedPARP、Bcr/abl、p-AKT、p-mTOR蛋白表达。结果联合用药组对K562细胞的增殖抑制作用和诱导细胞凋亡率较单独用药组效果明显,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。与单药组比较,联合用药组可以明显上调cleavedcaspase-3、cleavedcaspase-9、cleavedPARP蛋白表达,同时下调PARP、Bcr/abl、p-AKT、p-mTOR蛋白的表达,差异均有统计学意义（P＜0.01或0.05）。结论PD与IM联合用药在抑制细胞增殖、诱导凋亡、抑制Bcr/abl蛋白和PI3K/AKT/mTOR信号通路方面明显优于单独用药。     

间接ELISA法检测结果标准化软件的研制与应用

开发一套能够将间接ELISA法检测结果标准化的软件.以克服试验条件不同对结果的影响.标准化方法采用改良光密度值标准化变换(I - STOD法),标准化公式中参数的估计采用高斯牛顿迭代法,以MATLAB图形用户界面为软件的开发工具.选择一组来自江西血吸虫病疫区的血清检验软件的使用效果,使用间接ELISA方法检测血清的抗体水平.其中,标准血清在每块试验板上按倍比稀释成8个浓度,用来拟合标准曲线.结果表明,软件可根据检测OD值绘制每块实验板上的标准曲线,同时计算出不同血清样本相对于标准品的浓度,克服了包板等因素所带来的影响,实现了血清抗体水平的板间比较.该软件界面友好,使用方便,为I - STOD方法的推广使用提供了有力工具.     

人参皂苷Rh_2抗肿瘤转移的功能研究进展

人参皂苷Rh2（ginsenoside-Rh2,G-Rh2）是一种含有达玛烷型骨架的四环三萜类皂苷单体,属于人参二醇型。人参皂苷Rh2是人参皂苷Rg3在体内的主要活性降解产物,二者均属于人参中的稀有皂苷,是白参蒸制为红参的过程中生成的次生皂苷[1]。药理学研究表明,G-Rh2药理作用广泛,对中枢神经系统、心血管系统、消化系统、免疫系统、内分泌系统等均有显著的调节功能,可显著提高患者的免疫能力,     

二氢丹参酮抑制人胃癌SGC7901细胞侵袭迁移作用及机制研究

目的研究二氢丹参酮(DHT)对人胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨其作用的分子机制。方法利用不同浓度的DHT处理细胞后,MTT法检测DHT对细胞生长活力的影响,划痕实验观察DHT对细胞运动能力的影响,Transwell小室模型研究DHT对细胞迁移和侵袭的影响,q RT-PCR和Western blotting检测基质金属蛋白酶MMP2、MMP9和Hedgehog通路调控基因Gli1和HHIP的m RNA和蛋白表达水平。结果与对照组相比,DHT可显著抑制SGC7901细胞的体外增殖及迁移能力,Transwell实验表明药物处理后穿膜细胞数明显低于对照组,并且呈剂量依赖性。Western blotting和q RT-PCR实验结果表明,DHT可显著抑制SGC7901细胞中MMP9的表达,降低Gli1基因的m RNA和蛋白表达,并提高HHIP基因的表达水平。结论 DHT能够抑制SGC7901细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与MMP9蛋白的表达降低和Hedgehog通路活性抑制有关。     

牛茄子叶绿体全基因组特征及系统发育分析

目的 以牛茄子Solanum capsicoides新鲜叶片为材料,对叶绿体基因组序列进行组装、注释和分析,探究牛茄子的序列特征和同属其他物种的系统发育关系。方法 基于Illumina HiSeq高通量测序,获得牛茄子完整叶绿体基因组序列,利用生物信息学方法进一步对其功能及特征、密码子偏好性、IR区域边界、核苷酸多样性、系统发育关系进行分析。结果 牛茄子叶绿体基因组全长为155 465 bp,为典型的四分体结构,总GC含量为37.85%,其中大单拷贝区、小单拷贝区和反向重复序列的长度分别为88 265、18 462、24 369 bp;共编码131个基因,包括86个蛋白编码基因、37个tRNA基因、8个rRNA基因。简单重复序列检测表明,叶绿体基因组包括51个SSR位点,其中以A和T组成的单核苷酸重复次数最多,占45.1%。密码子偏好性分析表明,亮氨酸是使用频率最高的氨基酸,AUU是使用次数最多的密码子,密码子偏向使用A/U结尾。属内叶绿体基因组比较分析显示,IR边界区域相对保守,但仍存在部分基因扩张和收缩等现象;核苷酸多样性分析获得了4个高突变热点：trnQ-psbK、psbF-psbE、clpP、ycf1,可作为物种鉴定和遗传多样性研究的潜在特征。系统发育分析显示牛茄子和喀西茄的亲缘关系更近,存在姐妹关系。结论 牛茄子叶绿体基因组的组装和系统发育分析,为茄属植物的分类和群体间遗传多样性的研究提供理论依据。     

隐丹参酮对K562细胞凋亡的影响及其机制

目的 探讨隐丹参酮诱导人慢性髓系白血病K562细胞凋亡的作用及其线粒体途径相关机制。方法 MTT法检测隐丹参酮对细胞增殖的抑制作用;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测丹参酮对细胞凋亡的影响,DAPI染色法观察细胞形态的变化;Western blotting检测丹参酮对细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9、PARP、Bax、Bcl-2和细胞色素C（Cyt C）表达的影响,线粒体膜电位检测试剂盒检测丹参酮对线粒体膜电位的影响;检测线粒体膜通透性转运孔（PTP）抑制剂环孢霉素A和caspase抑制剂z-VAD-fmk对隐丹参酮药效的影响。结果 隐丹参酮对K562细胞的生长有显著抑制作用,可引起细胞形态发生明显改变,诱导细胞发生凋亡,提高蛋白Bax/Bcl-2的比例,降低线粒体膜电位,促进Cyt C从线粒体释放到胞浆,增强促凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9和PARP的活性。环孢霉素A和cz-VAD-fmk均能减弱隐丹参酮抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。结论 隐丹参酮可显著诱导K562细胞凋亡,其机制与线粒体凋亡途径密切相关。     

太平洋海马的性状鉴别和COI-ATP6条形码分子鉴定研究

目的:基于性状鉴别和DNA条形码联用技术建立太平洋海马药材(Hippocampus ingens)的生药学鉴定特征,为其后续的应用开发奠定基础.方法:利用传统性状鉴别方法研究太平洋海马的典型性状特征;通过有效扩增测定10个太平洋海马样品的COI和ATP6基因片段序列,分别分析两种序列中碱基组成、变异位点等信息;基于K2P模型计算太平洋海马的种内种间遗传距离;通过NJ法构建太平洋海马与常见市售海马的系统聚类树,比较各海马间的亲缘关系.结果:太平洋海马最典型的性状特征包括体表光滑和体型巨大,全身密布白色竖线纹和突出的眼棘;10条太平洋海马样品COI、ATP6序列平均长度分别为649和603 bp,变异率分别为1.079％和1.990％.COI和ATP6序列的最大种内遗传距离均显著小于最小种间遗传距离,因此能与其他海马明显区分,同时与大海马的亲缘关系最近.结论:COI和ATP6序列均可作为将太平洋海马与其它常见海马明显区分的有效条形码,但ATP6序列更适合作为其标准条形码.本文提供了太平洋海马的性状和分子鉴别特征,为其品种的快速鉴定提供了技术支撑,对有效维护海马药材的市场秩序,控制和提高海马药材质量具有重要意义.     

海马化学成分及药理活性研究进展

海马Hippocampus为我国名贵珍稀动物类药材,其化学成分种类丰富,含有氨基酸、活性多肽、甾体类、脂肪酸和微量元素等多种化学成分。海马为传统补益类药材,药理作用广泛,其主要的药理活性包括性激素样作用、抗炎、抗氧化、抗肿瘤和提高机体免疫力等。通过查阅近年来国内外的相关文献,就海马的化学成分和药理作用等方面研究进展进行系统综述,结合课题组前期的工作对海马药材的相关问题进行了讨论与展望,以期为海马的临床应用和后续产品开发提供依据和参考。     

听神经瘤的脑干听觉诱发电位分析

听神经瘤易于漏诊和误诊,桥小脑角MRI检查对其诊断最为明确,但费用昂贵,作为筛选听神经瘤的一种较经济而有价值的方法是脑干听觉诱发电位(BAEP)测定.本科1999年3月至12月共收治11例听神经瘤,均经手术切除证实,现将BAEP测定结果报道如下.