甘草查尔酮B对人非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨甘草查尔酮B(LCB)对于人非小细胞肺癌A549细胞增殖、周期及凋亡的影响。方法：采用CCK-8法和平板克隆形成法检测LCB对A549细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞技术检测对细胞周期、凋亡的影响;采用Western blotting法检测线粒体凋亡蛋白表达。结果：LCB可显著抑制A549细胞的增殖。LCB经处理后将A549细胞阻滞在G0/G1期（P<0.05）,同时细胞凋亡率也明显增加（P<0.05）。Bax/Bcl-2比值及Caspase-3蛋白表达明显上升（P<0.05）。结论：LCB可通过阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,从而抑制非小细胞肺癌A549的增殖。     

白藜芦醇通过下调 mdr1/P - gp表达逆转 K562/ADM细胞凋亡抑制

目的：研究白藜芦醇对多药耐药K562/ADM细胞的诱导凋亡效应及其分子机制。方法：以白血病多药耐药细胞K562/ADM为白藜芦醇作用的靶细胞,用MTT比色法检测细胞增殖活性,形态学和DNA片段化观察细胞凋亡;RT-PCR检测mdr1基因和Caspase-3基因mRNA的表达;FCM测定P-gp蛋白表达水平;比色法测定Caspase-3活性。结果：白藜芦醇显著抑制K562/ADM细胞增殖,白藜芦醇诱导后K562/ADM细胞出现典型的凋亡形态学变化和DNA片段化等特征性改变。白藜芦醇下调K562/ADM细胞mdr1基因表达、抑制P-gp合成,并上调caspase-3基因表达、增强caspase-3活性。结论：白藜芦醇通过下调mdr1/P-gp表达逆转K562/ADM多药耐药细胞的凋亡抑制。     

新生儿缺氧缺血性脑病血清MBP、NSE变化的临床意义

目的 :探讨神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、髓鞘碱性蛋白 (MBP)在新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE)患儿血清中的变化及其对临床诊断、分度、病程判断的价值 .方法 :HIE患儿32例 ,分别在急性期、恢复期采血 ,用ELISA法测定MBP含量 ,用放免法测定NSE水平并与血清常用酶学检测指标丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、肌酸激酶 (CK)、乳酸脱氢酶 (LDH)、α 羟丁酸脱氢酶 (а HBDH)等结果进行对照研究 .12例健康新生儿作为正常对照组 .结果 :与对照组比较 ,HIE患儿急性期各组血清中NSE水平明显增高 (P <0 0 5 ) ;恢复期各组NSE水平明显下降 (P >0 0 5 ) .重度组HIE患儿急性期MBP水平明显增高 (P <0 0 5 ) ,恢复期其水平明显下降 (P >0 0 5 ) .结论 :NSE可作为HIE患儿临床诊断、病情及病程判断的敏感指标 .     

XRCC3基因多态性与西北地区妇女乳腺癌的关联性研究

目的：通过对中国西北地区妇女乳腺癌与健康人群XRCC3基因多态性位点的研究,找出基因多态性与乳腺癌发病的相关性。方法：采集西北地区的517例乳腺癌患者和1 008例健康人群外周血,提取DNA后采用高通量芯片检测方法,测定XRCC3基因rs861534、rs861537、rs3212092和rs861530共4个多态性位点的基因分型。结果：Logistic回归分析发现XRCC3 rs861534位点的AG/AA基因型,病例组与对照组比较差异有统计学意义（P < 0.01,OR=0.36;P=0.013,OR=0.08）,同时,GG+AG基因型与对照组比较差异有统计学意义（P < 0.01）,XRCC3 rs861530位点的Logistic回归分析显示AG+AA基因型与对照组比较差异有统计学意义（P=0.044）。相关临床病理学指标分析显示rs861537位点的GG/AG基因型在ER⁺与ER^-患者中的分布差异有统计学意义（P=0.048,OR=1.50）。rs3212092位点的CC+CT基因型在Her-2^-与Her-2⁺患者中的分布差异具有统计学意义（P=0.027,OR=2.06）。结论：在中国西北地区妇女人群中XRCC3基因rs861534和rs861530两个位点的多态性与乳腺癌的发病有相关性。在XRCC3 rs861537位点,GG/AG基因型ER⁺携带者可能具有较高的乳腺癌内分泌治疗风险;在rs3212092位点,携带CT和TT基因型的Her-2⁺表达患者具有明显的乳腺癌转移复发风险。     

五种SOD活性测定方法的比较

超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD),作为机体O_2~-的消除剂,在医疗上具有广泛的应用前景。测定人体内SOD的含量,有助于一些疾病的诊断。SOD的测活方法很多,但有些方法由于仪器和试剂等因素的限制,不适于基层单位的应用。国内外学者对不同方法做过比较,对其优缺点众说不一。我们选择了国内应用较广的五种方法:邻苯三酚     

鹅绒藤蛋白酶的提纯与性质研究

从鹅绒藤 (CynanchumchineseR .Br.)茎干乳汁中用凝胶层析 ,离子交换层析纯化蛋白酶。经SDS PAGE、IEF鉴定 ,为均一条带。分子质量 18ku ;pI 6.7;作用最适pH 7.0 ,最适温度范围 60～ 80℃。对HbA β链水解的Km值为 1.5 9× 10 -6mol L。巯基酶抑制剂、保护剂实验提示该酶为巯基蛋白酶。用五肽胃泌素做底物 ,通过分配层析分离并用DABITC PITC双偶合法对肽斑片段测序的结果表明 ,该蛋白酶的水解位点特异性较低。结论 :该酶是一种活性较强的巯基蛋白酶     

深红酵母菌苯丙氨酸解氨酶的诱导及纯化

经Ｌ－苯丙氨酸诱导在深红酵母产生高于非诱导培养时６倍的苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）活性，并加以分离纯化，纯化９２．９倍，产率８．９８％。纯化过程中采用不同的亲和洗脱方式，结果表明：在Ｌ－苯丙氨酸－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ进行ＰＡＬ的亲和层析时，用５０ｍｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ８．８Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液平衡上柱后以Ｄ－苯丙氨酸洗脱为好。     

急性羰基镍吸入性致毒后肺含镍量及酶谱的动态观察

本文测定了大鼠急性羰基镍吸入性致毒前后肺组织的镍含量及酶谱的活性变化。发现实验大鼠吸入羰基镍后4h 肺组织含镍量最高,且主要在24h 内被清除。肺组织各种酶中,以ALT 变化最明显,且酶活性升高均在组织中镍含量升高之后,可能后者是引起前者升高的原因。     

端粒酶与肿瘤的靶向治疗

1985年Greider和Blackburn首次在四膜虫细胞提取物中发现了端粒酶(telomerase)。端粒酶是一种含有蛋白质和与端粒(tdomere,TEL)DNA互补RNA的核糖核蛋白酶,端粒DNA的合成必须以端粒酶中的RNA为模板,通过逆转录完成。自身携带模板是端粒酶区别于一般逆转录DNA聚合酶的主要特征。1994年Kim等发现端粒酶活性特异性地存在于恶性肿瘤组织、永生化细胞和生殖组织。目前已证明端粒酶与细胞的衰老、分化以及肿瘤的形成有密切关系。因此,它不仅是一种新的很有价值的肿瘤标志物,而且有可能成为一种特异性较强的肿瘤治疗的靶位置。     

几种固定化苯丙氨酸解氨酶方法的比较

目的：对不同方法固定化苯丙氨酸解氨酶（PAL）的偶联率或包被率以及固定化对PAL活性和稳定性的影响进行比较,以期得到较为方便、有效的固定化PAL。方法：（1）采用不同T：C比例的聚丙烯酰胺凝胶（PAG）包埋PAL;（2）分别用戊二醛和碘化－I－[环己基－3－（3－二甲氨丙基）]碳二亚胺（CDC）将PAL固定于Bio-Gel P-300;（3）分别用超声法、脱水再加水法、复乳法将PAL包被于三种脂类组成不同的质脂体;（4）对诱变选育出的含PAL活性酵母细胞进行丙酮处理。结论：（1）包埋法采用T：C比为8：30时固定化酶活性明显高于PAL活性酵母细胞进行丙酮处理。结论：（1）包埋法采用T：C法为8：30时固定化酶活性明显高于T：C比为8：19,两活性保留率分别为50．6％和17．1％;（2）载体偶联法以戊二醛将PAL固定于Bio-Gel P300优于用DCD固定化的酶,两活性保留率分别为27．2％和13．9％;（3）质脂体包被中以脱水再加水法对酶活性影响较小,脂类组成以磷脂酰胆碱;胆固醇：磷脂酰丝氨酸比值7：21：1最好;（4）固定化PAL活性酵母细胞能较好地抵抗人工肠液中胰蛋白酶的水解作用,亦能明显降低苯丙氨酸的浓度。